甜菜夜蛾核型多角体病毒(SeNPV)对家蚕细胞株(BmN)的感染

甜菜夜蛾 (Spodopteraexigua)核型多角体病毒 (SeNPV)经空斑法纯化获得G1、G3、G4三个克隆株。将三个克隆株及日本分离的SeNPV 1的游离病毒粒子感染家蚕细胞株 (BmN)后 ,4 8h开始引起细胞凋亡 ,脱壁漂浮于培养液中 ,72h后基本凋亡。感染的BmN细胞核未观察到病毒多角体 ,用空斑法未检出SeNPV出芽病毒粒子 (BV)的形成 ;Western印迹分析也未能检出多角体蛋白。而DNA原位杂交印迹 (SlotBlot)分析 ,发现SeNPV能在BmN细胞中复制病毒DNA ;提取感染SeNPV的BmN细胞DNA作酶切电泳 ,获得特异的SeNPVDNA区带 ,并发现EcoRI、PstI的酶切位点有所改变。本文讨论了SeNPV感染非寄主细胞并能在其中复制病毒DNA的可能性。

环境因子对SeNPV杀虫剂防治效果的影响

本文研究了不同的温度、不同的日照时间和不同的雨淋时间对甜菜夜蛾Spodoptera exigua Hubner核多角体病毒(SeNPV)杀虫剂的防治效果的影响,结果表明:温度在22℃时的LC50值为20．4242μg／ml,防治效果最好,低于或高于22℃的LC50值都增大;秋季日照对防治效果的影响不大,日照在4小时之内,防治效果在97．42％以上,而夏季日照对防治效果的影响则较较为明显;在降雨强度为5mm／hr的条件下,雨淋1小时后其防治效果仍为100％,雨淋4小时内防治效果为89．80％,但当雨淋6小时和雨淋8小时后,防治效果降低为83．67％和81．63％。

利用双杂交系统对SeNPV泛素与抗细胞凋亡蛋白相互作用的研究

本文报道利用酵母双杂交系统研究甜菜夜蛾核多角体病毒(SeNPV)的泛素(Ubiqutin)与抗细胞凋亡蛋白(IAP2,IAP3)相互作用的结果。使用Clontech公司的MACHMAKERGAL4Two-hybridsystem3,以病毒ubiquitin基因与酵母GAL4的DNA结合域重组表达“诱饵”蛋白,以病毒iap2或iap3基因与DNA活化域重组表达“猎物”蛋白,在低严谨型筛选培养基上均得到阳性克隆。这一结果表明,甜菜夜蛾核多角体病毒泛素与IAP2或IAP3在体外能进行相互作用,这种作用利用了酵母内源性E1和E2。SeNPV的抗细胞凋亡蛋白(IAPs)可能是泛素-蛋白酶水解途径(UPP)中的泛素连接酶(E3),或者是泛素依赖性蛋白水解酶的靶底物。

甜菜夜蛾核型多角体病毒对甜菜夜蛾幼虫的毒力测定

室内毒力测定表明，在一定范围内，不同浓度甜菜夜蛾核型多角体病毒（SeNPV）感染甜菜夜蛾2龄幼虫后，浓度越高，甜菜夜蛾死亡率越高，开始死亡时间越早，全程感染至死亡的天数越短，致死中时（LT50）为2．44～5．60d，致死中浓度LC50=7．11×10^4 PIB／ml。以剂量为2×10^5 PIB／ml的SeNPV样品感染甜菜夜蛾1～4龄幼虫，低龄幼虫的死亡高峰期为4～5d，全程期为6～7d；3龄以上幼虫死亡高峰期为7d左右，全程期为10～12d。

Bt-NPV复配剂对蔬菜害虫的田间药效试验

利用甜菜夜蛾NPV(Spodoptera exigua NPV,Se NPV)、棉铃虫NPV(Helicoverpa armigera NPV,Ha NPV)分别与苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)制成复配剂,分别对甜菜夜蛾和棉铃虫2~3龄幼虫进行田间防治药效试验,同时对小菜蛾(Plutella xylostella Linnaeus)、菜粉蝶(Pieris rapae Linne)进行田间兼治。结果表明,复配剂Bt+Se NPV1对甜菜夜蛾幼虫防效,7 d和10 d分别达到78.2%和82.16%,明显高于单剂Bt的防效60.23%和63.79%;Bt+Se NPV1防治白菜田间自然发生的小菜蛾、菜青虫,10 d防效分别达到60.75%、50.58%;复配剂Bt+Ha NPV1防治温室番茄棉铃虫,7 d和10 d防效分别达到63.62%和71.40%,显著高于单剂Bt的防效53.38%和60.78%。由此可见,复配剂Bt+Se NPV1、Bt+Ha NPV1可以有效防治甜菜夜蛾、棉铃虫幼虫,防效在杀虫速度和持续性上明显高于单剂Bt;同时Bt+Se NPV1对菜田的小菜蛾、菜青虫具有一定兼治作用,可扩大复配剂防治蔬菜害虫的作用谱。

甜菜夜蛾人工饲料中琼脂替代物的研究

研究了卡拉胶、淀粉和海藻酸钠 3种凝固剂的凝固特性 ,采取正交组合方法 ,获得以淀粉和卡拉胶混配替代甜菜夜蛾人工饲料中琼脂的最优组合方案。试验证明 ,该饲料饲养甜菜夜蛾幼虫增殖SeNPV的产量与用琼脂作凝固剂相当 ,但新配方中的成本仅为原来的 1 / 3。

不同虫龄甜菜夜蛾幼虫实验种群对核型多角体病毒的敏感性

利用经稀释10-1和10-3的甜菜夜蛾核型多角体病毒(SeNPV)初提液,对甜菜夜蛾各龄幼虫不同实验种群进行饲毒,以研究不同龄期宿主幼虫对SeNPV的敏感性差异.结果表明,宿主幼虫虫龄与其对病毒的敏感性呈显著负相关,虫龄越小,对病毒的敏感性越高.低浓度病毒(8.24×104PIB/mL)感染1～3龄幼虫,患病率达89%以上,患病个体死亡率达94%以上.高浓度病毒(8.24×106PIB/mL)能导致89.6%以上高龄幼虫死亡.SeNPV导致宿主幼虫死亡的时间相对较短.Weibull模型可较好地拟合各试验结果.

利用甜菜夜蛾日本品系增殖核多角体病毒

比较了甜菜夜蛾3种品系增殖甜菜夜蛾核多角体病毒(SeNPV)的效果。结果表明,利用甜菜夜蛾日本品系幼虫增殖SeNPV产量最高,其平均单头病毒含量分别比广州品系和荷兰品系高19 6%和53 3%;病毒总含量分别高20 4%和116 7%。在此基础上,进一步研究了虫龄、感染浓度和饲养密度对用甜菜夜蛾日本品系幼虫增殖SeNPV的影响,确定了利用甜菜夜蛾日本品系增殖SeNPV时,以上3因子的最佳条件为:在27±1℃下用1×108PIB/ml的SeNPV感染5龄初幼虫,并按30头/dm2的密度饲养。

SeMNPV两个分离株的生物活性比较及病毒杀虫剂的应用

本文对甜菜夜蛾核型多角体病毒的两个分离株(SeMNPV-M,SeMNPV-Z)的生物活性进行了比较,并对甜 菜夜蛾核多角体病毒杀虫悬浮剂的田间应用效果进行了评估。病毒生物测定结果显示,SeNPV-M和SeNPV-Z 感染三龄幼虫的半致死剂量(LD50)分别为195．8 PIBs／克饲料和242．4 PIBs／克饲料。使用6000PIB／克饲料的病 毒剂量感染三龄幼虫,其半致死时间(LT50)分别为3．50d和3．68d。甜菜夜蛾病毒杀虫悬浮剂已在工厂生产,田间 实验结果表明,甜菜夜蛾病毒杀虫悬浮剂可有效控制目标害虫的危害。

甜核·苏云菌制剂防治水稻大螟技术初探

为了寻找防治水稻大螟的理想药剂,开展了甜核·苏云菌不同配比对不同时期的大螟田间防治的技术研究。田间试验表明,武汉武大绿洲生物技术有限公司生产的甜核·苏云菌(高端)产品对水稻大螟具有较好的防治效果,而且持效期长。在水稻大螟卵孵至2龄幼虫高峰期用药,用量为450 g/hm^2时,该药剂保苗效果和杀虫效果均可达到90%以上,且对水稻生产安全。

甜菜夜蛾中增殖的几种杆状病毒DNA限制酶分析

甜菜夜蛾（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｅｘｉｇｕａ）除可被其自身病毒ＳｅＮＰＶ感染外，还对其他多种昆虫ＮＰＶ有一定敏感性．以苜蓿丫纹夜蛾（Ａｕｔｏｇｒａｐｈａｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ）ＮＰＶ，棉铃虫（Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓａｒｍｉｇｅｒａ）ＮＰＶ，甘蓝夜蛾（Ｍａｍｅｓｔｒａｂｒａｓｓｉｃａｅ）ＮＰＶ分别感染甜菜夜蛾均可引起典型病症，其ＤＮＡ限制酶图谱表现为各自独特带型，表明这些ＮＰＶ在替代宿主甜菜夜蛾中增殖后，其酶切图谱未发生改变．毒力及宿主范围有无变化未作评价。

甜菜夜蛾核型多角体病毒的致病力测定与群养对病毒产量的影响

以3龄中甜菜夜蛾幼虫为试虫,测定出甜菜夜蛾核型多角体病毒的半致死浓度(LC50)为1.66×105PIB/mL,计算出1×108PIB/mL、1×107PIB/mL、1×106PIB/mL3种浓度的半致死时间(LT50)分别为3.95d,4.47d,5.35d;研究了甜菜夜蛾群养条件对病毒产量的影响,确定出感染浓度为1×108PIB/mL、感染龄期为5龄初幼虫、饲养密度为30头/dm2时获得的病毒产量最高。

甜菜夜蛾卵和成虫携带核型多角体病毒对种群数量的影响

在室内分别测定了甜菜夜蛾的卵、雌蛾和雄蛾分别携带甜菜夜蛾核型多角体病毒(SeNPV)对其卵孵化率、幼虫存活率及单雌产卵量的影响。结果表明:甜菜夜蛾卵块携带SeNPV后,卵孵化率和幼虫存活率均显著下降。雌、雄蛾分别携带病毒再交尾后,对单雌产卵量、卵孵化率和幼虫的存活率也有显著影响,并且不同带毒量处理间存在显著差异,表现为带毒量越高,单雌产卵量越少、卵孵化率和幼虫存活率越低。同等带毒处理条件下,卵、雌蛾和雄蛾带毒3种处理方式对甜菜夜蛾种群数量的影响没有显著差异。说明SeNPV能通过甜菜夜蛾的卵、雌蛾和雄蛾3种虫态进行垂直传播,可以明显抑制甜菜夜蛾种群数量的增长,为昆虫性诱剂和病毒集成技术在田间的应用提供了理论依据。