光棘球海胆seali基因克隆及表达特性分析

seali基因隶属于PIWI超家族,其编码的RNA结合蛋白在生殖细胞发育过程中发挥重要作用。研究经同源比对从光棘球海胆(Mesocentrotus nudus)性腺转录组数据库中筛选得到seali基因片段,随后通过cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNA ends, RACE),获得其全长cDNA序列。光棘球海胆seali基因cDNA全长3462 bp,其中3′UTR长度为416 bp, 5′UTR长度为180 bp,其中3′UTR的加尾信号并非经典的AAUAAA或AUUAAA,而是较少见的AAUACA。开放阅读框(Open Reading Frame, ORF)2862 bp,编码954个氨基酸,具有保守的PIWI和PAZ结构域,多重序列比对和系统进化分析结果表明其属于Argonaute家族的PIWI亚家族成员。荧光定量PCR技术检测结果表明, Mnseali基因在光棘球海胆性腺、肠、管足和体腔细胞中均有表达,在性腺中表达量最高。此外, Mnseali基因为母源因子,在整个胚胎发育时期均有表达。在卵巢中,随着卵母细胞的成熟, Mnseali的表达量逐渐升高,而仅在成熟期的精巢中表达量显著上调。RNA原位杂交结果表明, Mnseali在光棘球海胆性腺的生殖细胞中特异表达,是光棘球海胆生殖细胞标记基因。该研究为海胆生殖细胞发育相关的研究提供了支撑。

22种金花茶显微结构差异分析

采用生药学常规的显微鉴定方法,观察22种金花茶[Camellia petelotii(Merr.)Sealy]根、茎、叶组织结构及粉末显微特征。结果表明,22种金花茶叶片粉末均可见(环纹、螺纹或孔纹)导管、草酸钙簇晶及不规则石细胞(分枝状),气孔不定式;毛瓣金花茶有较多的非腺毛,显脉金花茶含有大量草酸钙簇晶,大叶金花茶具有晶鞘纤维。22种金花茶的叶栅栏组织和海绵组织分化明显,栅栏组织内均可见草酸钙簇晶散在,栅栏组织在叶片内排列成1~3层;海绵组织内散有大型分枝状石细胞和草酸钙簇晶。陇瑞和大叶金花茶叶主脉有相连的2束维管束,其余金花茶均只有1束维管束。22种金花茶茎横切面主要分为木栓层、皮层、韧皮部、木质部和髓部5部分,根据茎横切面的皮层及韧皮部中石细胞数量可将金花茶分成2类,防城、扶绥、大叶、显脉及恩城金花茶茎横切面的皮层及韧皮部有石细胞环,其他金花茶茎横切面皮层及韧皮部的石细胞较少或极少。22种金花茶根横切面主要分为木栓层、皮层、韧皮部和木质部4部分,对根的解剖结构指标分析发现,大叶金花茶的木质化导管直径较大,是其他金花茶的3~4倍,具有鉴别意义。

腾冲红花油茶花芽分化及雌配子体发育的形态学观察

[目的]观察腾冲红花油茶花芽分化与雌配子体发育进程,旨在掌握腾冲红花油茶花芽分化整体进程,明确各分化时期的内部结构特征,完善腾冲红花油茶的生殖生物学基础数据,为腾冲红花油茶的栽培管理提供参考依据。[方法]以腾冲红花油茶为研究材料,采用石蜡切片的方法对其花芽分化及雌配子体的发育过程进行解剖观察。[结果]1)腾冲红花油茶的花芽分化经历了分化始期、萼片形成期、花瓣形成期、雌雄蕊形成期、子房花药形成期、雌雄蕊成熟期等6个时期,历时长达8个月,分化期间历经较长时间的低温环境。2)腾冲红花油茶子房有3~4个心室,每个心室多枚胚珠,每枚胚珠发育状况不一致,胚珠为倒生型胚珠,具双层珠被,胚珠发育属于薄珠心型。9月初,珠心中央的薄壁细胞迅速分裂形成孢原细胞,孢原细胞继续发育形成大孢子母细胞,在大孢子母细胞发育过程中珠心组织开始被溶解吸收。3)腾冲红花油茶雌配子体发育由大孢子母细胞进行两次减数分裂形成4个功能大孢子,进而发育成为四核胚囊,四核胚囊通过一次有丝分裂发育形成七细胞八核胚囊。胚囊发育类型为五福花型,胚囊为四孢子胚囊。其胚囊发育类型与普通油茶、攸县油茶的葱型胚囊有明显差异。[结论]腾冲红花油茶花芽分化历经6个时期;子房有3~4个心室;倒生胚珠,薄珠心型;胚囊发育类型为五福花型,胚囊为四孢子胚囊。

基质配比对金花茶容器苗生长的影响

器育苗基质选椰糠、泥炭土、黄壤,按照不同配比分为Z1、Z2和Z3组,Z1组配比(2∶4∶4)、Z2组配比(1∶3∶6)、Z3组配比(2∶3∶5),比较了相同基质不同配比下对金花茶容器育苗的影响。结果表明:①成活率:Z3顶芽育苗成活率、二芽育苗成活率和底芽育苗成活率均高于Z1、Z2,依次表现为Z3>Z1>Z2,组间比较有差异(P<0.05);②叶片形态特征:Z3叶长、叶宽、叶面积和叶片数高于Z1、Z2(P<0.05),其中Z1、Z2叶片数比较无差异(P>0.05),Z1叶长、叶宽和叶面积高于Z2(P<0.05);③根部形态特征:Z3根直径、根总长、根表面积和根体积均高于Z1和Z2(P<0.05),Z1、Z2比较无差异(P>0.05);④生理生化指标:各组叶绿素a、叶绿色b含量表现为Z3>Z1>Z2,组间比较有差异(P<0.05),各组可溶性蛋白、可溶性糖含量表现为Z2>Z1>Z3(P<0.05)。指出了相同基质不同配比下对金花茶容器育苗生长发育有显著影响,以椰糠、泥炭土、黄壤为基质,在2∶3∶5配比下,金花茶幼苗成活率最高,叶片、根部和生理生化指标最理想。试验研究不同基质配比对金花茶容器育苗成活率、叶片形态特征、根部形态特征和生理生化指标的影响,旨在为金花茶的高效育苗提供新思路。

滇西地区红花油茶主要病虫害种类调查

对我国云南山茶的原生种腾冲红花油茶Camellia reticulata f.simpex Sealy的重点分布区和主要栽培区的18个县(乡)进行了病虫害调查,共鉴定出23种主要病害和5种主要虫害。

综合评分法优化金花茶叶提取工艺及抗氧化活性分析

目的:优化金花茶叶的超声提取工艺,并对不同生长期金花茶叶醇提物的抗氧化能力进行考察。方法:采用单因素试验结合响应面分析法,选取乙醇浓度、液料比、提取温度和提取时间为考察因素,以总黄酮、茶多酚含量和浸膏得率为综合指标,采用综合评分法进行单因素试验和4因素3水平的Box-Benhnken试验,并对不同生长期金花茶叶醇提物的清除DPPH·自由基、ABTS+自由基能力及FRAP还原力进行考察。结果:优化得到的提取工艺为:乙醇浓度60%,液料比80∶1(mL/g),提取温度55℃,提取时间30 min。不同生长期金花茶叶醇提物的抗氧化活性大小为成熟叶>老叶>幼叶。结论:优化的工艺合理可行,金花茶叶适宜采收期为成熟叶,该研究为金花茶叶作为天然抗氧化剂资源的开发提供技术参考和理论依据。

西南山茶抗IgE介导Ⅰ型过敏有效部位及有效成分的研究

目的以致敏大鼠血清免疫球蛋白E(IgE)和白三烯(LT)、全血和肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸性粒细胞(EOS)及肺组织炎症面积为活性指标,跟踪研究西南山茶叶抗IgE介导Ⅰ型过敏的有效部位和有效成分。方法西南山茶叶用95%乙醇提取,提取物用石油醚、醋酸乙酯萃取,醋酸乙酯萃取物进行化学分离。用卵白蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]的混合液致敏和诱发,制成Ⅰ型过敏反应动物模型。将实验动物随机分组即正常组,模型组,孟鲁司特钠(Men-glusitena)组,各样品的低、高剂量组。采用ELISA法测定致敏大鼠血清IgE和LT含量;采用细胞计数法,检测大鼠全血和BALF中EOS数量;通过病理学检查,检测肺组织炎症面积。结果得到95%乙醇提取物(总黄酮10.95%,总多酚15.73%)(1)、石油醚萃取物(2)、醋酸乙脂萃取物(总黄酮39.38%,总多酚20.01%)(3)、水层(4)。化学分离得到7个黄酮醇类化合物,其槲皮素(5)含量最高(5g)。1、3、5均可降低血清中IgE和LT含量,强弱顺序为1<3<5;1、3、5均能减少全血和BALF中EOS数量,强弱顺序为1<3<5;1、3、5均可减少肺组织炎症面积,强弱顺序为1<3<5。结论西南山茶叶抗IgE介导Ⅰ型过敏反应的有效部位为黄酮醇类酚性成分。有效成分或代表性成分为槲皮素,其活性强度优于孟鲁司特钠。

滇西红花油茶褐斑病病原鉴定、致病性及主要生物学特性研究

为了给腾冲红花油茶（Camellia reticulataf.simpex Sealy）褐斑病的综合防治提供一定的理论依据,通过实地调查与室内分离、鉴定及接种试验,对腾冲红花油茶褐斑病病原菌及其致病性进行了研究。结果表明,红花油茶褐斑病病原为半知菌亚门腔孢纲黑盘孢目（科）的拟盘多毛孢属茶褐斑拟盘多毛孢Pestalotiopsis guepini。该菌种在人工针刺接种条件下均能在大棚内表现出典型症状。并将发病叶片再分离,得到同样的病原。该菌在PDA培养基上菌丝生长温度为10~30℃,最适25℃;产生分生孢子的温度为20~25℃,最适25℃;分生孢子萌发的温度为15~30℃,最适28℃。该病菌在pH4~8条件下均能生长和产孢,产生分生孢子最适pH5~6,分生孢子萌发和菌丝生长最适pH5。该菌对生长势弱或有伤口的植株有很强的致病性,并为红花油茶褐斑病病原学、发病规律及防治技术的系统研究奠定了基础。

油茶籽油对核桃油抗氧化作用的影响

[目的]探讨油茶籽油对核桃油抗氧化作用的影响。[方法]采用Schaal烘箱法研究了3种油茶籽油对核桃油的抗氧化作用,确定了油茶籽油对核桃油的抗氧化能力及适宜的添加量。[结果]油茶籽油对核桃油的抗氧化作用以腾冲红花油茶籽油最佳,其表现出较强的抗氧化活性,且加入量以25%～30%为宜;其次是白花油茶籽油和普洱油茶籽油。[结论]为开发调和的功能性核桃油提供了理论依据。

金花茶SCoT-PCR反应体系的正交优化及引物筛选

目的:建立适用于金花茶的SCoT-PCR反应体系,为金花茶组植物遗传多样性研究提供技术支持。方法:以金花茶基因组DNA为模板,采用SCoT分子标记方法,通过正交试验设计法对影响PCR反应体系的引物、DNA模板、2×Taq PCR Master Mix用量以及扩增程序进行筛选和优化。结果:最佳PCR反应体系为20μL:10 ng/μL的DNA模板1μL,10μmol/L的引物0.8μL,2×Taq PCR Master Mix 12μL,ddH_(2)O 6.2μL。PCR扩增程序为94℃预变性4 min;94℃变性35 s,退火60 s,72℃延伸80 s,30个循环,72℃延伸5 min,扩增产物4℃保存。结论:该研究所建立的SCoT-PCR反应体系经16份金花茶组样品的验证,反应体系稳定可靠,适于金花茶的SCoT分子标记研究。筛选出的10个引物均具有较高的多态性,为进一步深入开展金花茶遗传亲缘关系、品种鉴定、遗传育种等工作奠定了实验基础。

抽水蓄能机组主轴密封故障分析及新型密封环研制

分析了天荒坪抽水蓄能机组运行时主轴密封的失效原因。运用流体静力学理论,分析了密封摩擦面的承载机理,提出了保持操作腔的压力随尾水压力变化而变化是保证水膜承载能力与负载平衡的关键,并导出了计算公式,为系统结构改造提供了理论依据。原密封环属于木纤维素浸渍酚醛树脂制品,其使用最高温度为(150～200)℃。新型密封环采用减摩改性高温树脂,混合有机芳纶(KEVLAR)碳纤维与无机纤维,并添加了石墨粉、二硫化钼粉、铜粉等固体润滑剂,其使用最高温度为(250～300)℃。最后介绍了新型密封环的生产工艺流程。

岳麓连蕊茶染色体核型及C-带带型分析

采用去壁低渗法及BSHG显带流程,对岳麓连蕊茶细胞染色体进行计数和核型及C—带带型分析。结果表明,其染色体数目为2n=30;属于对称性很强的原始核型;其着丝粒带多而且明显,有中间带,其他带不明显。为研究其与山茶属其他植物间的亲缘关系提供了依据。

金花茶幼苗对铅胁迫的生长生理响应

以金花茶幼苗为试验材料,采用单因素完全随机设计,研究铅胁迫对金花茶生长生理特性的影响,旨在为金花茶的栽培及推广提供科学依据。结果表明:低浓度(62.5和125 mg·kg^-1)铅处理促进了金花茶幼苗株高、地径、叶面积和生物量增加。随铅浓度升高,叶绿素含量和净光合速率(P n)、气孔导度(G s)、蒸腾速率(T r)先升后降,在62.5 mg·kg^-1处理时最大;根冠比呈上升趋势,MDA含量和抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性均呈先降低后增加的趋势。苗木质量评价中,低浓度铅(≤125 mg·kg^-1)能促进金花茶幼苗生长,而较高浓度的铅胁迫(>125 mg·kg^-1)使其生长受到抑制。综合分析表明,金花茶具有一定耐铅特性,可在一些轻度铅污染地区推广栽植。

显脉金花茶叶片中山奈酚的提取分离及含量测定

利用溶剂提取法对显脉金花茶(Camellia euphlebia Merr.ex Sealy)干燥叶乙酸乙酯部位提取分离,并测定其含量。结果表明,从显脉金花茶叶片中乙酸乙酯部位首次分离得到化合物山奈酚(kaempferol);建立了HPLC法对显脉金花茶叶中山奈酚的含量测定方法,山奈酚含量在0.10~0.40μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为99.84%(RSD=1.59%),山奈酚含量为0.3182~0.3640 mg/g。

基于电阻应变片式传感器的单体液压支柱密封检测系统

介绍了一种单体液压支柱密封检测系统,可对单体液压支柱做高、低压密封试验,系统前端检测元件采用电阻应变片式传感器。阐述了系统的设计方法和技术特点,指出该系统可提高煤矿单体液压支柱密封检测工作的自动化水平,具有很好的应用前景。

显脉金花茶叶的化学成分研究

[目的]利用现代化学技术分析显脉金花茶叶的化学成分。[方法]用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取经乙醇浸提得到的显脉金花茶总浸膏,通过薄层硅胶柱分离、薄层色谱(TLC)鉴别,重结晶得到7种单体化合物,利用各种光谱技术和理化性质进行结构鉴定。[结果]鉴定出其中7个化合物的结构,包括甾醇类2个,三萜类化合物3个,脂肪醇类1个,黄酮类化合物1个,分别为β-谷甾醇、α-菠菜甾醇、β-香树素、齐墩果酸、olibanumol-L、正三十四醇和山奈酚。[结论]α-菠菜甾醇、正三十四醇和olibanumol-L均为首次从该种植物中鉴定出来,β-香树素和山奈酚为首次从该属植物中分离鉴定出来。

床垫变时装 A28携手Sealy”游弋”上海时装周

时装周上,也许你看过模特穿睡衣走T台的,但你一定没见过身着'床垫'走秀的?而就在2017SS这一季的上海时装周里,高级女装成衣品牌A28和全球床垫品牌丝涟让我们见证了'奇迹'.

盖层厚度对天然气封闭能力的实验分析

盖层的封闭能力是评价油气藏保存条件的关键。然而盖层的厚度对盖层封闭能力的作用一直存在很大的争论。研究选取与塔里木盆地超深层勘探领域油气藏盖层岩性密切相关的膏岩、盐岩和白云岩样品开展岩石长度对气体突破压力影响的实验。通过标准测试法和恒压突破法相互结合、相互印证的手段来判别岩石长度的变化对突破压力值的影响。实验结果显示:气体突破均质岩样的压力值与岩样的长度相关性不明显,但长度影响了气体的突破时间;当恒压注气初始值大于样品自身的毛管压力值时,突破时间与岩样长度呈正相关性。通过对实验数据的解析认为:现行的标准测试法中每个注气点的压力保持时间过短,造成了最终测试突破压力值偏大,影响了封闭能力测试的真实性;突破压力值与均质岩样的长度无关,但受不同测试气体的影响突破压力值有所差异;从宏观上分析厚度对盖层的物性封闭能力影响不大,但是厚度对盖层的稳定性和阻止油气的扩散起到了积极作用。

金花茶叶皂苷类成分研究

目的研究金花茶Camellia euphlebia叶皂苷类成分。方法利用超声提取、大孔树脂富集以及制备色谱对金花茶叶水溶性部分进行分离纯化,运用NMR、MS、IR等光谱手段进行结构鉴定。结果分离得到3个单体化合物,分别为人参皂苷Rg1(1)、人参皂苷F1(2)和人参皂苷F5(3)。结论化合物1～3均为首次从该植物中分离得到的人参皂苷,其中人参皂苷Rg1、F5为首次从山茶属中分离得到。金花茶为国家一级保护的珍稀药用植物,这些成分的分离鉴定对其进一步的活性研究、开发利用和推广种植具有重要意义。