国内外原油可采储量评估的差异分析及思考

针对国内原油可采储量标定与SEC储量评估结果差异较大的状况,分析了导致储量评估结果差异大的主要原因,诸如,评估单元、评估方法、参数取值不同等;同时,就国内原油可采储量标定与SEC储量评估合理接轨问题提出了一些思考意见,对于解决评估结果差异、实现可采储量客观评价、满足油田开发决策和上市披露的需求都具有一定的现实意义。

大肠杆菌tRNA^Sec关键核苷酸位点

在原核生物中,硒蛋白合成需要tRNA^Sec(SelC)与硒代半胱氨酸合成(Sec synthase,SelA)、硒代半胱氨酸特异性延伸因子(Sec-specificelongationfactor,SelB)之间相互作用。【目的】基于大肠杆菌掺硒机器,寻找tRNA^Sec骨架上关键核苷酸位点,为解决硒蛋白目前面临的掺硒效率较低、产量低的问题提供新思路。【方法】以大鼠细胞质型硫氧还蛋白还原酶(thioredoxinreductase1,TrxR1)为掺硒模式蛋白为定点突变tRNA^Sec,转化至BL21(DE3)gor-获得阳性重组菌株(携带pET-TRSter/pSUABC’),用于表达大鼠硒蛋白TrxR1,然后使用2￠,5￠ADP-Sepharose亲和层析和凝胶过滤两步法分离纯化TrxR1,最后利用经典硒依赖型DTNB还原反应测定TrxR1的酶活,分析关键核苷酸位点,评价掺硒效率。【结果】在存在SECIS元件的前提下,当SelA、SelB、tRNA^Sec共表达时,与野生型相比,携带突变型tRNA^Sec所共表达的TrxR1酶活力呈现不同程度的降低,其中E.colitRNA^Sec的G18、G19这两个位点的所有的TrxR1酶活远低于野生型(<10%);然而,a26和b7的酶活相对较高。【结论】E.coli tRNA^Sec骨架上G18和G19位点对于维持tRNA稳定性和灵活性发挥了关键作用,位点突变引起tRNA结构变化会影响tRNA^Sec与掺硒元件的互作,因此有望通过改造tRNA核苷酸位点来提高硒蛋白的掺硒效率。