LRRK2调控ERES支架蛋白Sec16A分布的研究

目的探讨LRRK2和内质网出口位点(ERES)支架蛋白Sec16A之间的相互作用,以及LRRK2对细胞中Sec16A分布的影响。方法利用Lrrk2基因敲除小鼠(Lrrk2^-/-小鼠)及野生型小鼠(Lrrk2^+/+小鼠),应用免疫共沉淀实验和蔗糖梯度离心实验检测LRRK2和Sec16A之间的相互作用,应用免疫染色实验观察LRRK2表达缺失对细胞中Sec16A的分布的影响。结果免疫共沉淀实验显示Lrrk2^+/+小鼠脑皮质中内源性的LRRK2和Sec16A存在相互作用;蔗糖梯度离心实验显示LRRK2和Sec16A存在于相同组分中;免疫荧光染色结果显示小鼠原代成纤维细胞中LRRK2缺失导致Sec16A异常弥散分布。结论LRRK2和Sec16A存在相互作用,二者之间的相互作用可能促进Sec16A锚定于ERES。

血浆支架蛋白SEC16A评估乙型肝炎相关肝硬化及肝细胞癌的临床价值

目的探明血浆支架蛋白SEC16A水平及相关模型诊断乙型肝炎病毒相关肝硬化(HBV-LC)及肝细胞癌(HBV-HCC)的临床价值。方法选择2017年6月至2021年10月河北医科大学第三医院经临床、实验室检查、影像学及肝组织病理学诊断的HBV-LC及HBV-HCC患者,设立健康对照组。血浆SEC16A水平采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,血清甲胎蛋白(AFP)采用电化学发光仪检测。应用SPSS 26.0、MedCalc 15.0统计学软件分析血浆SEC16A水平与肝硬化、肝细胞癌发生和发展的关系,有序logistic回归模型分析相关因素,并建立SEC16A联合诊断模型(SAA),受试者操作特征曲线评估该模型诊断肝硬化及肝细胞癌的临床效能。Pearson相关性分析明确新型诊断标志物的影响因素。结果共纳入健康对照60例、HBV-LC 60例、HBV-HCC 52例,血浆SEC16A平均水平依次为(7.41±1.66)ng/ml、(10.26±1.86)ng/ml、(12.79±1.49)ng/ml,P<0.001;SEC16A诊断肝硬化、肝细胞癌灵敏度为69.44%、71.05%,特异度为89.36%、88.89%。SEC16A、年龄、AFP为HBV-LC、肝细胞癌发生的独立危险因素,以此建立模型SAA诊断界值分别为26.21、31.46,灵敏度为77.78%和81.58%,特异度为87.23%和97.22%;诊断早期HBV-HCC灵敏度、特异度分别为80.95%、97.22%。Pearson相关性分析显示:AFP水平与丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)均呈正相关,P值均<0.01;而血清SEC16A水平仅在肝硬化组中与ALT、AST呈轻度正相关(r值分别为0.268、0.260,P值均<0.05)。结论血浆SEC16A可作为乙型肝炎肝硬化及肝细胞癌的诊断标志物,SEC16A联合年龄、AFP诊断模型SAA可显著提高HBV-LC及HBV-HCC的早期诊断率,其应用有助于HBV相关系列疾病进展的诊断及鉴别诊断。

Lrrk2缺失损害内质网蛋白输出的机制研究

目的 探讨帕金森病相关蛋白Lrrk2对内质网蛋白输出功能的调节作用及相关机制。方法 利用Lrrk2基因敲除小鼠(Lrrk2^-/-小鼠)及野生型小鼠(Lrrk2^+/+小鼠)获取成纤维细胞和皮质神经元,应用免疫荧光染色法检测Lrrk2缺失对内质网出口位点(ERES)形态以及对N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-asparticacidreceptor,NMDAR)亚基NR2A输出至胞膜的过程的影响。结果 Lrrk2缺失导致成纤维细胞中ERES直径增大,与内质网至高尔基体蛋白运输抑制剂BrefeldinA(BFA)处理效果类似;Lrrk2缺失抑制了河豚毒素(TTX)所诱导的NR2A蛋白输出至胞膜过程。结论 Lrrk2缺失导致内质网至高尔基体蛋白输出功能障碍,而这种异常会抑制神经元活性依赖的NMDA受体蛋白输出至胞膜的过程。

内质网出口输出分泌蛋白的机制与神经退行性疾病

内质网是蛋白分泌通路上的第一个场所,对细胞内蛋白质平衡和细胞功能的维持有着重要意义。细胞内蛋白质失衡可导致多种神经退行性疾病的发生,如阿尔茨海默病、帕金森病和亨廷顿病。蛋白质在合成后被整合进入内质网腔,经过修饰和折叠,在内质网膜上装配、出芽的COPⅡ有被小泡包裹离开内质网被运送至高尔基体。内质网上COPⅡ有被小泡形成的部位被称为内质网出口。本文将对内质网出口的结构、形成、功能的调节以及其与神经退行性疾病相关蛋白的关系进行综述。

SEC16B、DNAJC27、FTO和MC4R基因多态性与汉族学龄前儿童超重肥胖的关联性

目的研究SEC16B基因rs633715、DNAJC27基因rs713586、FTO基因rs11642015和MC4R基因rs6567160多态性与汉族学龄前儿童超重肥胖的关联性。方法选取2022年来自“早期儿童营养包干预长期营养健康作用评估”项目监测点的河南省和贵州省749名2~6岁汉族儿童为研究对象,分成超重肥胖组和正常对照组。采用KASP SNP分型技术对rs633715、rs713586、rs11642015和rs6567160进行基因多态性检测。使用χ^(2)检验分析4个位点的基因型多态性分布,使用多因素Logistic回归模型分析4个位点与学龄前儿童超重肥胖的关联性。结果rs633715和rs6567160的基因型多态性在河南省和贵州省学龄前儿童中的分布有统计学意义(P<0.05)。rs633715位点的CC纯合突变型和隐性模型与学龄前儿童患超重肥胖的风险有关[OR及95%CI分别为2.915(1.163~7.305)和2.997(1.226~7.323),P<0.05];rs713586位点的TC杂合突变型和显性模型与学龄前儿童患超重肥胖的风险有关[OR及95%CI分别为2.362(1.054~5.289)和2.362(1.054~5.289),P<0.05]。rs11642015和rs6567160位点的多态性与学龄前儿童超重肥胖的关联无统计学意义。rs633715和rs713586的累积效应分析结果显示,携带风险基因型的数量与学龄前儿童患超重肥胖的风险存在正向关联(P趋势<0.01)。结论在汉族学龄前儿童中,SEC16B基因rs633715和DNAJC27基因rs713586位点的多态性与超重肥胖易感性有关,且SEC16B基因rs633715和DNAJC27基因rs713586位点的多态性对学龄前儿童超重肥胖易感性有累积效应,携带风险基因型的数量与儿童超重肥胖风险呈正向关联。

SEC16B基因多态性与体质指数和肥胖关联的Meta分析

目的 探讨SEC16B基因多态性与BMI和肥胖的关联性。方法 系统检索2009-2015年在万方数据库（Wanfangdata）、中国期刊全文数据库（CNKI）、维普中文科技期刊全文数据库（VIP）、PubMed、Embase、Web of Science、NIH GWAS catalog数据库中收录的关于SEC16B基因多态性与BMI和/或肥胖关联性的文献。分别以β值和OR值及其95% CI作为Meta分析效应合并指标。采用Stata 12.0软件对研究结果进行异质性检验和效应值合并计算。结果 最终纳入28篇文献，包括rs10913469相关15篇和rs543874相关13篇。Meta分析显示，在加性遗传模型下，rs10913469-C和rs543874-G与BMI水平具有正向关联，合并β值（95% CI）分别为0.04（0.03～0.05）和0.03（0.02～0.04）；与肥胖罹患风险关联的合并OR值（95% CI）分别为1.11（1.08～1.15）和1.28（1.20～1.36）。按种族、年龄和文献质量进行亚组分析后，rs10913469和rs543874位点与肥胖关联的合并OR值仍有统计学意义。结论 SEC16B基因多态性rs10913469和rs543874位点与不同种族人群BMI及肥胖均有关联，rs10913469-C等位基因和rs543874-G等位基因可增加肥胖罹患风险。