经阴道超声联合血清SLPI、SMRP检测对卵巢肿瘤良恶性的诊断价值

目的探究经阴道超声(TVUS)联合血清分泌性白细胞肽酶抑制因子(SLPI)、可溶性间皮素相关肽(SMRP)检测对卵巢肿瘤良恶性的诊断价值。方法选择2022年1月—2023年6月陕西中医药大学第二附属医院妇科诊治的卵巢肿瘤患者120例,根据病理诊断结果分为良性组(70例)和恶性组(50例);使用彩色多普勒超声诊断仪对患者进行灰度超声检查和彩色多普勒超声检查并记录各项参数,ELISA检测血清SLPI、SMRP水平;多因素Logistic回归分析方法分析卵巢肿瘤良恶性的影响因素;ROC曲线分析TVUS联合SLPI、SMRP对卵巢肿瘤良恶性的诊断价值。结果良性组中TVUS阴性59例(84.3%)、阳性11例(15.7%),恶性组中阳性33例(66.0%),阴性17例(34.0%)(χ^(2)=31.759,P<0.001);恶性组病灶最大直径、收缩期最高峰值血流速度(Vs)、舒张期最低峰值血流速度(Vd)高于良性组(t/P=6.074/<0.001,3.247/0.002,3.048/0.003);与良性组比较,恶性组血清SLPI、SMRP水平较高(t=7.515,7.818,P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果表明,SLPI高、SMRP高、Vs高、Vd高为卵巢恶性肿瘤的独立危险因素[OR(95%CI)=1.625(1.066~2.477),1.834(1.053~3.194),1.375(1.033~1.831),1.624(1.059~2.490)];ROC曲线分析结果表明,TVUS、血清SLPI、SMRP及三者联合诊断卵巢肿瘤良恶性的AUC分别为0.751、0.820、0.813、0.948,三者联合诊断的AUC优于各自单独诊断(Z=5.468、3.441、3.517,P均<0.001)。结论SLPI、SMRP在卵巢恶性肿瘤患者血清中表达上升,是恶性肿瘤发生的影响因素,TVUS联合血清SLPI、SMRP诊断卵巢肿瘤良恶性具有较高的价值,可用于临床实践。

分泌性白细胞肽酶抑制剂与肿瘤关系的研究进展

分泌性白细胞肽酶抑制剂属于Kazal型-丝氨酸蛋白酶抑制剂家族,其与肿瘤发生发展、生物学行为及其预后有较密切的关系,而成为研究热点。在卵巢癌、非小细胞性肺癌、胃癌等均有表达,且与肿瘤的发生、发展相关。然而,到目前为止,分泌性白细胞肽酶抑制剂在肿瘤中的作用仍然存在争议。探讨其在肿瘤及抗肿瘤中的作用及可能的肿瘤发生、发展机制,将有助于肿瘤的防治及对疾病预后的判断。

分泌性白细胞蛋白酶抑制剂在胃溃疡愈合中的作用机制探讨

【目的】探讨分泌性白细胞蛋白酶抑制剂（secretory leucocyte protease inhibitor，SLPI）在胃溃疡愈合中的作用机制。【方法】采用免疫组织化学染色法、反转录聚合酶链反应（Reverse TranscriptionPolymerase Chain Reaction ，RTPCR）等方法，对30例胃溃疡患者愈合前后胃黏膜组织中SLPI的表达进行检测。【结果】免疫组化染色法显示，SLPI主要表达于胃黏膜上皮及胃腺上皮细胞胞质中，溃疡愈合前胃黏膜组织中SLPI的表达水平为A=0.7083±0.0593，与愈合后A=0.2641±0.0236相比明显增强（P〈0.05）（A为平均吸光度）。RTPCR检测结果显示SLPI mRNA的表达与其蛋白质的改变相一致（P〈0.05）。【结论】SLPI可能通过促进成纤维细胞和血管内皮细胞的增殖活化，促进结缔组织增生和微血管形成，从而促进溃疡愈合。

红霉素对慢性阻塞性肺疾病大鼠转化生长因子-β1和分泌型白细胞蛋白酶抑制剂表达水平的影响

目的 探讨红霉素在COPD发病过程中的保护性作用.方法 健康SPF级雄性Wistar大鼠36只,体重（220±20）g,用随机数字表法分为模型组、干预组和对照组,每组12只.采用香烟烟雾暴露及气管内滴加脂多糖复制COPD大鼠模型.观察3组大鼠在红霉素干预前后的肺功能及病理变化,免疫组织化学及逆转录PCR法检测支气管肺组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）和分泌型白细胞蛋白酶抑制剂（SLPI）表达的变化.多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验,采用直线相关分析进行相关性检验.结果 模型组大鼠的饮食和活动逐渐减少,平均体重较对照组减轻,后期可见毛发干枯、发黄,可有明显喘息音;干预组大鼠的症状较轻,对照组大鼠未出现上述情况.模型组大鼠FEV0.3/FVC[（58±7）%]和动态肺顺应性[（0.16±0.07） L/cm H2O,1 cm H2O=0.098 kPa]均明显低于对照组[（83±7）%和（0.33±0.16） L/cm H2O],气道阻力[（0.69±0.14） cm H2O·L-1·s-1] 明显高于对照组[（0.33±0.11） cm H2O·L-1·s-1];干预组大鼠FEV0.3/FVC[（65±9）%]和动态肺顺应性[（0.23±0.08） L/cm H2O]均明显高于模型组[（58±7）%和（0.16±0.07） L/cm H2O],气道阻力[（0.50±0.13） cm H2O·L-1·s-1]明显低于模型组[（0.69±0.14） cm H2O·L-1·s-1];干预组大鼠支气管肺组织中TGF-β1的蛋白（积分吸光度值×103）和mRNA（吸光度值）表达（6.7±1.5和0.45±0.13）均明显低于模型组（10.7±1.9和0.66±0.18）,SLPI的蛋白和mRNA表达（9.9±1.7和0.69±0.34）均明显高于模型组（8.1±1.7和0.41±0.27）;TGF-β1与SLPI表达呈显著负相关（r=-0.686,P〈0.05）.结论 COPD大鼠的支气管肺组织中SLPI 表达明显减少,TGF-β1表达明显升高,两者呈负相关.红霉素可以抑制大鼠的气道炎症反应,使TGF-β1对SLPI的抑制作用减弱,提示红霉素可能具有局部保护作用.

TGF-β1／Smads信号通路介导支气管上皮细胞分泌型白细胞蛋白酶抑制因子下调

目的探讨支气管上皮细胞分泌型白细胞蛋白酶抑制因子（SLPI）表达下调与TGF-βl／Smads信号通路的关系。方法将人正常支气管上皮HBE细胞分为正常对照组、转化生长因子β1（TGF-β1）刺激组（刺激组）、Smad4小分子干扰RNA（siRNA）预处理后再行TGF-β1刺激组（干扰组）、阴性对照siRNA预处理后再行TGF-β1刺激组（干扰对照组），采用免疫细胞化学及蛋白质印迹法检测各组细胞中Smadd、SLPI的表达，反转录聚合酶链反应法检测各组细胞中Smad4 mRNA及SLPI mRNA的表达。每次试验每组各取1孔细胞，每项检测各重复4次。结果刺激组HBE细胞中Smadd蛋白及mRNA表达水平（分别为1．18±0．17、1．33±0．16）明显高于而SLPI蛋白及mRNA表达水平（分别为0、17±0．10、0、11±0．05）明显低于正常对照组（分别为0．29±0．06、0、31±0．07、1．29±0、21、0．83±0．13，均P〈0．01）和干扰组（分别为0、27±0．08、0．34±0．09、1．22±0．18、0．81±0．11，均P〈0．01），干扰对照组Smadd和SLPI表达水平与刺激组比较差异无统计学意义。结论TGF-β1可促使支气管上皮细胞SLPI表达下调，其作用可能是通过TGF-β1／Smads信号通路介导的。

分泌性白细胞蛋白酶抑制因子可抑制LPS诱导人近端肾小管上皮细胞炎症反应和凋亡

目的寻找脓毒症相关性急性肾损伤(AKI)的关键基因, 为脓毒症相关性AKI的治疗提供理论和实验依据。方法①生物信息学分析:对基因表达数据库(GEO)中GSE30718和GSE53773数据集进行生物信息学分析, 这两个数据集记录了肾移植手术前后对移植肾进行规律性肾活检的基因芯片数据, 一部分患者在肾移植后发生了AKI。对两个数据集中AKI相关基因表达差异进行分析, 找到在两个数据集中差异一致且受试者工作特征曲线下面积(AUC)较高的基因作为目的基因, 进行后续细胞验证实验。②细胞验证实验:体外培养人近端肾小管上皮细胞株HK2, 使用10 mg/L脂多糖(LPS)孵育6 h制备LPS-HK2细胞模型(LPS模型组), 并设空白对照组;使用小干扰RNA(siRNA)技术对LPS-HK2细胞中通过生物信息学分析得出的目的基因进行敲减(基因敲减组), 并设置基因阴性对照组。采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HK2细胞中目的基因的表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中炎症因子水平;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测细胞中凋亡关键蛋白的表达。结果①生物信息学分析结果:两个数据集间有325个基因呈现相同的表达趋势, 其中144个显著下调, 181个显著上调, 而分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)在两个数据集中表达差异的统计学意义均较大;进一步受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析证实, GSE30718和GSE53773数据集中SLPI表达量对AKI的诊断效能均较大, AUC分别为0.83和0.92。故选择SLPI作为目的基因进行后续细胞验证实验。②细胞验证实验结果:RT-qPCR结果显示, LPS模型组细胞中SLPI表达较空白对照组显著升高(2^(-ΔΔCT):1.80±0.14比1.00±0.11, P<0.01), 变化趋势与生物信息学分析结果相符。进一步敲减SLPI基因分析显示, 基因敲减组LPS-HK2细胞培养液中炎症因子水平较阴性对照组显著上调〔白细胞介素-6(IL-6, ng/L):509.58±27.08比253.87±75.83, IL-1β(ng/L):490.99±49.52比239.67±26.97, 肿瘤坏死因子-α(TNF-α, ng/L):755.22±48.66比502.06±10.92, 均P<0.01〕, 说明SLPI可抑制LPS诱导的HK2细胞炎症反应;基因敲减组LPS-HK2细胞凋亡关键蛋白Bax、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达均较阴性对照组显著升高〔Bax蛋白(Bax/GAPDH):1.38±0.12比1.00±0.10, caspase-3蛋白(caspase-3/GAPDH):1.44±0.15比1.00±0.11, 均P<0.05〕, 而Bcl-2表达显著降低(Bcl-2/GAPDH:0.83±0.08比1.00±0.05, P<0.05), 说明SLPI可抑制细胞在炎症反应中的凋亡。结论 SLPI能抑制LPS诱导的HK2细胞炎症反应和凋亡, 可能参与肾小管细胞在脓毒症反应中的保护机制, 成为脓毒症相关性AKI治疗的潜在靶点。