SEDline镇静监测下右美托咪定在胸腔镜肺叶切除术病人中的应用

目的:通过SEDline镇静监测下右美托咪定在胸腔镜肺叶切除术病人中的应用,以期为麻醉选择更为安全有效的方法。方法:选择ASAⅠ或Ⅱ级的胸腔镜肺叶切除术病人20例,采用随机数字表法分为右美托咪定组(D组)和对照组(N组),每组10例。记录2组病人麻醉诱导前(T_(0))、切皮时(T_(1))、单肺通气30 min(T_(2))、术毕即刻(T_(3))的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、血氧饱和度(SPO 2)、病人状态指数(PSI);记录2组病人术中瑞芬太尼和丙泊酚的用量;以及术后6 h、24 h VAS评分和Ramsay评分。结果:2组病人在T_(1)、T_(2)、T_(3)时间点MAP均降低(P<0.01),HR减慢(P<0.01),PSI均降低(P<0.01)。其中,N组在T_(2)时间点MAP降低较D组更明显(P<0.01),D组在T_(1)时间点HR低于N组(P<0.01),在T_(2)时间点PSI低于N组(P<0.01);术中瑞芬太尼和丙泊酚的用量D组均明显低于N组;在术后6 h VAS评分D组低于N组(P<0.01),术后6 h Ramsay评分D组高于N组(P<0.01)。结论:胸腔镜肺叶切除术病人行右美托咪定联合SEDline镇静监测,术中病人麻醉状态得以控制,血流动力学更加平稳,术后镇静镇痛更加完善,无术后躁动,能对病人的快速康复起到一定的积极作用。

EBI3与Sedlin蛋白的相互作用

目的初步确定EBI3蛋白与Sedlin之间相互作用的区域。方法构建缺失突变体，利用酵母双杂交系统进行测试。结果正确构建了4个EBI3基因的突变体，将突变体与Sedlin基因共转化酵母细胞后，β-半乳糖苷酶测试表明酵母克隆均为阳性。结论EBI3蛋白的氨基酸54-97区域和166～229区域均可与Sedlin结合。

SEDL基因及其编码蛋白sedlin在小鼠多种组织中表达研究

目的:研究SEDL基因及其编码蛋白sedlin在小鼠多种组织中的表达。方法:采用Real-TimePCR和Western Blot检测小鼠9种组织中SEDL基因和sedlin蛋白表达水平及1、2、4周龄小鼠骨组织中的SEDL基因及sedlin蛋白表达水平。结果:①所检测小鼠9种组织中均有SEDL基因及对应的sedlin蛋白表达。组织中SEDL基因及sedlin蛋白表达量上有统计学差异(P<0.0001),以骨组织中SEDL基因及sedlin蛋白表达水平高。②不同周龄小鼠骨组织中,SEDL基因及sedlin蛋白的相对表达水平有统计学差异(P<0.01),二者的表达量随年龄变化的趋势相吻合。结论:SEDL基因和sedlin蛋白在所测组织中的表达相一致。二者的表达量在组织间均有差异性,其中以骨组织中表达水平最高。小鼠骨组织中SEDL基因及sedlin蛋白的表达量上有相同时相性改变。

Masimo SedLine麻醉深度监测技术在指导地佐辛复合丙泊酚妊娠终止术中的应用

目的:探究Masimo SedLine监测不同麻醉深度指导地佐辛复合丙泊酚在妊娠终止术中的应用及血清COR、E水平的差异性。方法:本研究以我院进行终止妊娠的患者186例作为研究对象,按照简单随机原则,分为观察组和对照组各93例。对照组采取地佐辛复合丙泊酚麻醉治疗,观察组患者采取Masimo SedLine监测不同麻醉深度辅以地佐辛复合丙泊酚麻醉治疗。比较两组患者的血流动力学指标、麻醉指标、疼痛情况、血清COR、E水平以及不良反应的差异。结果:相比对照组,观察组患者的收缩压、舒张压、血氧饱和度以及心率在不同的时点波动情况显著低于对照组(均P<0.05),两组患者的手术时间差异无统计学意义(P>0.05),观察组患者的丙泊酚使用量(t=6.737,P=0.000)、诱导时间(t=8.384,P=0.000)以及苏醒时间(t=17.090,P=0.000)均小于对照组,两组患者的不同时间的VAS评分显著低于对照组,T0阶段,两组患者的血清COR、E水平之间的差异无统计学意义(P>0.05),T6阶段,两组患者的血清COR、E水平均显著升高,且观察组患者的血清COR(t=19.868,P=0.000)、E(t=27.134,P=0.000)水平显著低于对照组,观察组患者发生术中体动(χ^(2)=4.731,P=0.030)、呼吸抑制(χ^(2)=5.142,P=0.023)、术后宫缩痛(χ^(2)=5.721,P=0.017)情况低于对照组。结论:在妊娠终止术中,Masimo SedLine监测不同麻醉深度能指导地佐辛复合丙泊酚麻醉剂量,对患者的麻醉作用以及血清氧化应激反应的降低均有显著优势。

RB1-C磷酸化位点突变体与Sedlin的共定位研究

目的研究人视网膜母细胞瘤蛋白1羧基端(RB1-C)磷酸化位点突变体的蛋白表达和细胞定位情况及其与迟发性脊椎骨骺发育不良病蛋白(Sedlin)共定位的变化情况。方法设计RB1-C磷酸化位点突变体的引物,以质粒pcDNA3.1-FLAG-RB1-C为模板,利用PCR技术分别扩增出pcDNA3.1-FLAG-RB1-C-S788A、S795A、S807A、T811A、T821A、T826A共6个突变体,并对各位点进行测序。分别将以上突变体单独转染至HEK 293T、COS7细胞中,利用Western blot和免疫荧光(IF)技术观察其蛋白表达和细胞定位情况;分别将以上突变体及Sedlin共同转染至COS7细胞中,利用IF技术观察二者在细胞内的共定位情况,并与野生型RB1-C的结果进行比较分析。结果测序结果显示RB1-C的6个磷酸化位点均突变成功,并能够在真核细胞内正常表达,且与野生型RB1-C的细胞定位基本一致,即主要定位在细胞核内。与野生型RB1-C相比,RB1-C-S788A、S795A、T821A、T826A与Sedlin的共定位未发生改变,即主要共定位在细胞核内;但RB1-C-S807A、T811A与Sedlin的共定位发生了显著变化,除了共定位于细胞核外,在细胞质中也存在共定位现象。结论RB1-C磷酸化位点突变体成功构建并表达,其中S807A、T811A两个磷酸化位点的突变能够显著改变RB1-C与Sedlin在细胞中共定位区域,表明它们是RB1-C和Sedlin结合的关键位点之一,为进一步研究RB1-C和Sedlin的相互作用奠定了基础。

Sedlin突变体的表达及其与RB1在细胞中的共定位

目的构建脊椎骨骺发育不良蛋白(Sedlin)的缺失突变和点突变体质粒,检测其在细胞内的表达、定位及其与RB1蛋白的共定位情况,为后续研究蛋白质相互作用提供依据。方法以Sedlin全长cDNA序列为模板,扩增目的基因序列,连接至表达载体,构建3个原核表达质粒,即pGEX-3X-SedlinN/Y115A/Y115F和相应的真核表达质粒,即pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F。分别转化pGEX-3X-SedlinN/Y115A/Y115F到大肠杆菌BL21感受态细胞中,IPTG诱导表达、谷胱甘肽琼脂糖球珠纯化后进行SDS-PAGE电泳,考马斯亮蓝染色法检测其表达情况;分别转染pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F于HEK 293T细胞,Western blot法检测相关蛋白在真核细胞中的表达情况;分别单转pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F以及将上述质粒与pDNA3.1-FLAG-RB1共转到COS7细胞中,进行免疫荧光制片,观察其在真核细胞内的定位情况。结果测序结果显示pGEX-3X-SedlinN/Y115A/Y115F和pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F重组质粒构建成功;考马斯亮蓝染色显示融合蛋白GST-SedlinN/Y115A/Y115F在BL21细胞中能够大量表达;Western blot结果显示GFP-SedlinN/Y115A/Y115F在HEK 293T细胞中能够高效表达;免疫荧光结果显示GFP-SedlinN/Y115A/Y115F蛋白在COS7细胞的细胞质和细胞核中均有分布,并与RB1蛋白存在明显的核内共定位。结论人Sedlin及其突变体在BL21菌株和HEK 293T细胞中均能有效表达;在COS7细胞中,Sedlin主要表达于细胞核,而Sedlin突变体除在细胞核中表达外,在细胞质中也有相当量的表达,Sedlin及其突变体均与RB1蛋白共定位,显示Sedlin羧基端以及NPFY基序中的Y磷酸化与否并不影响与RB1蛋白的共定位。

SEDline镇静监测下瑞马唑仑静脉麻醉联合胸椎旁神经阻滞在胸腔镜肺叶切除术中的应用

目的探讨在SEDline镇静监测仪监测下甲苯磺酸瑞马唑仑复合胸椎旁神经阻滞(TPVB)在胸腔镜肺叶切除术中的临床应用效果。方法前瞻性随机对照研究。纳入2021年6月—2022年5月蚌埠医学院第一附属医院择期行胸腔镜下肺叶切除术患者80例,其中男45例、女35例,年龄40~71岁。80例患者采用数字表法随机分为4组,其中采用甲苯磺酸瑞马唑仑静脉麻醉联合TPVB为TR组,采用甲苯磺酸瑞马唑仑静脉麻醉为R组,采用丙泊酚静脉麻醉联合TPVB为TB组,采用丙泊酚静脉麻醉为B组,每组20例。患者均在SEDline镇静监测仪监测下行胸腔镜肺叶切除术,术中根据患者大脑状态指数(PSI)调控麻醉药用量,PSI维持在25~50。观察指标:(1)比较4组患者性别、年龄、体质量指数(BMI)、术前血清同型半胱氨酸(Hcy)、术前简易精神状态检查量表(MMSE)认知功能评分等临床基线资料;(2)记录对比4组患者麻醉诱导前(T_(0))、切皮时(T_(1))、单肺通气30 min(T_(2))、术毕即刻(T_(3))的血氧饱和度(SPO_(2))、心率、平均动脉压(MAP),以及血清丙二醛(MDA)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)水平;(3)记录对比4组患者手术时间、术中输液量、出血量和盐酸瑞芬太尼用量;(4)对比术后6、24 h疼痛VAS评分和Ramsay镇静评分,术后24 h血清Hcy水平、MMSE评分、镇痛泵按压次数。结果(1)4组患者性别、年龄、BMI、术前Hcy、术前MMSE评分等临床基线资料比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05)。(2)组内比较:R组心率不同时间点差异有统计学意义(F=3.30,P=0.025),TR组、TB组、B组心率在不同时间点差异均无统计学意义(P值均>0.05);各组中的MAP、SPO_(2)、MDA、AOPP不同时间点差异均有统计学意义(P值均<0.05)。组间比较:在T_(0),4组间MAP、心率、SPO_(2)、MDA、AOPP差异均无统计学意义(P值均>0.05)。在T_(1)、T_(2),心率、MDA、AOPP差异均有统计学意义(P值均<0.05),其中TB组心率均最低,TR组MDA、AOPP均最低;而MAP、SPO_(2)差异均有统计学意义(P值均<0.05)。在T_(3),MAP、MDA、AOPP差异均有统计学意义(P值均<0.05),其中B组MAP最低,TR组MDA、AOPP均最低;而心率、SPO_(2)差异均无统计学意义(P值均>0.05)。(3)TR组、TB组患者术中盐酸瑞芬太尼用量较少,R组、B组较多,4组间比较差异有统计学意义(F=23.67,P<0.001);而手术时间、术中输液量、术中出血量4组间比较,差异无有统计学意义(P值均>0.05)。(4)4组患者术后6、24 h疼痛VAS评分和Ramsay镇静评分,以及术后24 h血清Hcy水平、MMSE认知功能评分、镇痛泵按压次数比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论甲苯磺酸瑞马唑仑联合TPVB应用于胸腔镜肺叶切除术中,能更精准地控制麻醉状态,且患者循环指标波动范围较小,术后镇静、镇痛效果更有优势。

干扰SEDL基因表达对软骨细胞生理活性的影响

目的初步研究干扰SEDL基因表达后对人软骨细胞中II型胶原蛋白表达水平、内质网位置分布及超微结构和软骨细胞活性的影响。方法将靶向干扰SEDL基因的病毒转染入人软骨细胞中,QPCR及Western Blot分别检测SEDL基因及Sedlin蛋白表达水平,评价干扰SEDL基因的软骨细胞模型是否建立成功;免疫荧光及Western Blot检测II型胶原蛋白表达情况,荧光探针检测内质网位置分布改变,电镜检测内质网超微结构改变,MTT法检测软骨细胞增殖活性情况。结果 (1)转染干扰SEDL基因病毒的软骨细胞SEDL基因表达明显降低,具有统计学差异(P<0.05)。Sedlin蛋白表达降低,表明干扰SEDL基因的细胞模型构建成功。(2)随着Sedlin蛋白的减少,II型胶原蛋白表达量降低,具有统计学差异(P<0.05)。(3)细胞模型中内质网分布发生改变,其形态变圆,触角变少,颜色变淡,细胞与细胞间内质网荧光排列不规则,紊乱。(4)电镜下观察,细胞模型中内质网超微结构出现水肿扩张。(5)转染干扰SEDL基因病毒的软骨细胞活性在48 h达峰,之后细胞活性下降,且具有统计学差异(P<0.05)。结论 Sedlin降低影响软骨细胞II型胶原蛋白表达,软骨细胞中内质网形态位置分布及超微结构发生改变,致使软骨细胞活性降低。

两位伟大的民族自我批判者——鲁迅与萨尔蒂科夫——谢德林的比较研究

落后民族要改变自己的落后面貌 ,首先必须进行深刻的自我批判。鲁迅与萨尔蒂科夫———谢德林即是中俄民族伟大的自我批判者。他们批判了各自民族普遍存在的愚昧、麻木、卑怯、奴性 ;批判了人们之间的隔膜、不相桐 ;批判了各自民族的“无特操”的劣根性 ;提出了“庸人与屠夫的互补”这一深刻命题。对于国民性格诸多不良方面的成因 ,两人都将其归为专制制度的残暴统治。他们在民族自我批判方面亦有明显不同 :谢德林对知识分子关切重于批判 ;而鲁迅对知识分子的态度要严厉得多。