20份黄皮种质资源果肉游离氨基酸对风味品质和药用价值的影响及其评价

为研究黄皮果实中游离氨基酸的组分特征、科学评价不同黄皮种质游离氨基酸对果实风味和药用价值的影响,利用高效液相色谱法,测定20份黄皮种质果肉的20种常见游离氨基酸,采用味觉活度值、主成分分析和聚类分析等方法对各种质进行综合评价。结果表明:在20份黄皮种质果肉中均含有除胱氨酸和精氨酸以外的18种游离氨基酸,种类丰富,且多数种质间含量差异显著;各种质的总游离氨基酸质量浓度在1309.7~9832.0 mg/kg之间,其中非必需氨基酸含量最高,必需氨基酸含量次之,半必需氨基酸含量最低;药用氨基酸占总游离氨基酸的6.3%~18.6%,以天冬氨酸和谷氨酸为主;根据氨基酸呈味特性的不同,将18种氨基酸分为3大类呈味氨基酸,发现种质M1的甜味氨基酸含量最高,G2的鲜味氨基酸和苦味氨基酸含量最高;仅16份种质中的丙氨酸与少数种质中的天冬酰胺、天冬氨酸的味觉活度值(taste activity values,TAV)>1,对黄皮果实风味有贡献;大多数游离氨基酸呈显著或极显著正相关关系;主成分分析提取到4个主成分,累计贡献率达到89.766%,能较好地反映出黄皮果肉游离氨基酸的综合特征;各黄皮种质的综合得分在–3.18~3.51之间,M1的综合得分最高;聚类分析将20份黄皮种质聚为3大类,其中第Ⅲ类群的X2、Y-1、G2、M1的总游离氨基酸、药用氨基酸、呈味氨基酸含量高,氨基酸营养品质好,风味品质佳。研究结果可为黄皮良种选育和品质评价提供参考依据。

疏果对黄皮果实发育着色及树体器官碳水化合物含量的影响

以‘大鸡心’黄皮为材料,研究了不同程度疏果对果实发育、着色、产量及树体不同器官碳水化合物含量的影响。结果表明:疏果减少了树体产量,但促进了果实发育,花后95d(采收)时,疏果50%和25%处理的果实鲜样质量分别比对照增加了33.7%和13.9%,疏果有利于果实的着色,同时提高了叶片、1cm粗枝条、结果母枝及果实的总碳水化合物含量。此外,疏果有利于采果后新梢生长,显著增加新梢的长度和粗度。

黄皮胚轴耐脱水性的诱导

不同发育时期黄皮种子的胚轴，经梯度蔗糖及梯度蔗糖加ＡＢＡ（１０μｍｏｌ／Ｌ）预培养后，活力指数均有所提高；生理成熟期种子的胚轴经两种方法预培养后可降低胚轴的致死含水量，诱导胚轴的耐脱水性．其中。

无核黄皮叶片中矿质元素质量分数的年动态变化

以广东省郁南县无核黄皮Clausena lansium‘Yunan Seedless’为试验材料,在秋梢期、花芽分化期、开花期、幼果期、果实膨大期和收获期6个时期,对其叶片矿质元素进行分析,研究黄皮不同物候期叶片矿质营养元素的年变化规律。结果表明,3个果园在年生长期内,收获期氮、磷、钾营养水平降到最低,随后因施肥在新的秋梢期而迅速恢复。3个果园自秋梢期到来年收获期叶片钙、锰的营养水平呈明显上升趋势,之后到了新的秋梢期有所下降。镁、钼在整个生育期相对稳定。3个果园铜呈现波动性的变化,新城果园在翌年成熟期铜降到最小值,新的秋梢期达到最大值;农科所果园在果实膨大期达到最大值,秋梢期降到最小值;农委果园在花芽分化期达到最大值,果实膨大期降到最小值。3个果园锌的季节性变化各不相同,新城和农委果园在开花期降到最低值,之后逐渐升高,分别在收获期和新的秋梢期达到最高值;农科所果园锌水平在幼果期降到最低值,在新的收获期又再度增加。3个果园的铁呈现波动性变化,新城果园在开花期降到最低值,果实膨大期达到最大值;农科所和农委果园在秋梢期达到最大值,分别在新的秋梢期和开花期降到最低值。3个果园硼的营养水平在开花期最小,新城和农委果园在收获期达到最大值,到了新的收获期又下降,农科所果园在新的收获期达到最大值。

无核黄皮叶片中铁锌营养的年周期变化及诊断

通过对2个果园中植株各个物候期叶片铁、锌养分分析,结合郁南无核黄皮产量的测定,探讨了无核黄皮叶片铁、锌营养变化规律和营养诊断指标。结果表明：高产园与低产园铁锌营养含量差异显著,但元素含量在生长季的波动规律基本相同。通过比较临界值法（critical value method）和适宜值法（sufficiency ranges method）对无核黄皮铁、锌营养诊断的结果,最后确定运用适宜值法拟定2种养分适宜范围,铁为60.46-75.66 mg/kg,锌为33.07-40.78 mg/kg,营养诊断适宜时期铁、锌均为1月。

黄皮胚轴的脱水敏感性及成苗

黄皮 (Clausenalansium [Lour ]Skeels)离体胚轴 (不带子叶的胚 )在无激素的木本植物培养基上可长成小植株 .几种因素包括胚轴剥取和培养技术均可影响胚轴成苗 .

黄皮种子脱水敏感性与其水份状况的关系

不同发育时期黄皮种子胚轴中水份状况有差异，其中生理成熟期胚轴中不可冻结水的比例最低，可冻结水的熔解热焓则较高．成熟黄皮种子脱水程度越大，胚轴中水份状态转换的起始温度和能量越低，且脱水至较低含水量时不形成玻璃化状态。

用固相萃取—高效液相色谱法测黄皮中的异菌脲残留量

样品用乙腈提取,固相萃取后浓缩,采用高效液相色谱法,测定了黄皮中的异菌脲残留量。测定结果表明:异菌脲的浓度范围在1￣50μg/mL内,其峰面积与进样质量的线性相关系数为0.9990,其回收率为83.6%￣96.9%,相对标准偏差RS(Dn=5)在0.53%￣6.21%之间,检出限为0.002mg/kg。该法具有灵敏、准确,前处理简单易行等优点。

疏果促进黄皮果实发育的细胞形态学观察

以石蜡切片技术,从形态学角度,观察疏果促进黄皮果实的果皮和果肉细胞发育的作用。结果表明,疏果对黄皮果实的果皮和果肉细胞膨大有明显的促进作用,果皮和果肉细胞大小与果实的纵径、横径、鲜果重之间呈明显的正相关。

提高黄皮种子贮藏活力的技术研究

黄皮种子种粒大小及活力与果实的大小有关手工剥种并及时进行处理可防止种子贮藏霉烂． ２０ ℃比１５℃、保鲜袋保湿比饱和盐保湿、采后含水量比部分脱水更适于保存种子活力．重新吸胀处理能提高失水种子的含水量、活力以及耐贮藏力．

发酵型无核黄皮甜米酒的研制

以郁南无核黄皮果为特色辅料通过全发酵制得黄皮保健糯米甜酒。探讨了主要发酵工艺及原料配比、黄酒高活性干酵母(YWBY)接种量、发酵温度、发酵时间和料水比对产品的影响。结果显示,在糖化醪中加入6.0%黄皮干粉,采用料水比为1:1.0,接入0.08%YWBY,26℃发酵8d,再经后发酵、压榨、澄清、灭菌等,酿造的黄皮甜米酒,酒体橙黄色,醇厚,甘甜爽口,保持了黄皮果的特征香味与治疗价值,有独特的风味。

顽拗性黄皮种子的发育模式和脱水敏感性研究

黄皮（Clausenalansium）种子在花后40～46天开始形成活力．74天达到生理成熟．88天完全发育成熟．根据黄皮种子发育过程中的性状和内部生理变化．将其发育分成五个发育阶段（I－V）．不同发育期的种子对脱水的敏感性不同，第Ⅲ期种子最低，第V期种子最高．成熟黄皮种子的高脱水敏感性与其在发育后期的高含水量和高代谢活性有关．

程序降温处理对黄皮果实贮藏品质和采后生理的影响

以‘无核’黄皮果实为实验材料,研究程序降温(LTC)处理对黄皮果实贮藏品质及采后生理的影响。将采后黄皮果实分别经LTC Ⅰ(12℃,4 d)、LTC Ⅱ(8℃,4 d)、LTC Ⅲ(12℃,2 d后转至8℃,2 d)处理后,转至低温(3.0±0.5)℃贮藏12 d,每4 d测定各项品质和生理指标。结果表明:与对照相比,程序降温处理有效减轻了黄皮果实的褐变,促进了可溶性固形物(TSS)和维生素C含量的积累,促进了可滴定酸(TA)的降解,减少丙二醛(MDA)的积累,维持较高的超氧化物歧化酶(SOD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性,抑制过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性,同时保持较高的总酚和类黄酮含量,从而延缓了果实采后衰老速度,有利于减轻黄皮果实褐变和提高贮藏品质,其中以LTC Ⅱ处理的保鲜效果最为显著。

黄皮酱加工工艺及其优化

为提高广西特产黄皮果及山黄皮产品的多样性,增加其经济效益,本试验以黄皮果、山黄皮为主要原材料,辅以黄豆酱、澳洲坚果麸粕、蒜米、白砂糖等材料,研究黄皮酱的加工工艺及工艺参数。在单因素试验的基础上,通过正交优化试验及对其感官评价,研究不同配比对产品风味的影响,确定最佳工艺参数为黄皮果400g,山黄皮200g,黄豆酱80g,澳洲竖果麸粕80g,白砂糖75g。通过本试验制得的黄皮酱口感细腻,风味独特,感官评分较高,是一款适宜大众消费的调味食品,对黄皮酱的开发及优化也提高了黄皮果及山黄皮的加工附加值。

“巴伦比”发酵型无核黄皮果酒的研制

以广东云浮郁南县优质成熟无核黄皮为原料,经过破碎打浆、多种酶混合酶解浸渍、低温发酵、低温澄清、稳定性处理和除菌过滤等工艺,酿造出澄清透明、呈金黄色,具有浓郁的无核黄皮果香和酒香,口感醇厚丰满、酸甜爽口,典型性突出,风格独特,稳定性好的"巴伦比"无核黄皮果酒。通过正交试验及理化指标和微生物指标检测,确定其最佳的生产工艺。

有核黄皮与无核黄皮的GC-MS成分分析研究

采用溶剂萃取和同时蒸馏萃取(SDE)方法对有核黄皮和无核黄皮进行萃取处理,萃取液经气相色谱-质谱联用仪分析对比,得出有核黄皮和无核黄皮的主要成分为β-侧柏烯、甲位蒎烯、月桂烯、水芹烯、1-松油烯醇、松油烯-4-醇、甜橙醛,其中β-侧柏烯相对质量分数(峰面积相对百分比)最高(无核黄皮中可达65.182%),有核黄皮中甜橙醛相对质量分数(5.97%)是无核黄皮(2.31%)的两倍以上。

中国黄皮果树种质资源果实品质性状的多样性分析

为深入了解中国黄皮种质资源的果实品质特点,本研究对广东省农业科学院果树研究所黄皮资源圃保存的78份黄皮种质14项果实品质性状指标进行分析和综合比较。研究结果表明,不同黄皮种质的果实品质性状存在丰富的多样性,其中糖酸比的变异系数达105.24%,多样性最为明显。相关性分析结果表明,不同果实品质性状间存在显著或极显著的相关性。不同类群黄皮种质的果实品质综合比较结果表明,可滴定酸含量、维生素C含量、还原糖含量、蔗糖含量、糖酸比和固酸比在三个类群之间的差异达到极显著水平,而可滴定酸和可溶性糖组分在不同种质果实中的含量差别可能在一定程度上决定了黄皮果实风味的差异。研究结果为黄皮种质资源保存和利用、品种品质改良和优质新品种的选育提供了依据。

实生黄皮种质资源收集与表型性状遗传多样性分析

为了解实生黄皮种质资源遗传多样性,本研究对60份海南省实生黄皮的32个表型性状进行遗传多样性分析、相关性分析、主成分分析和聚类分析。结果表明,60份实生黄皮资源表现出丰富的遗传多样性,17个数量性状的变异系数范围在10.43%~93.65%,变异系数最大的是固酸比,为93.65%;32个表型性状遗传多样性指数范围为0.60~2.04,遗传多样性指数最大的是可溶性固形物含量,为2.04。性状相关性分析结果表明,相关性系数大于0.80的性状有单果重(WF)与果实纵径(LDF)等4组。聚类分析在欧式距离10.9处将收集的黄皮资源划分为5大类。主成分分析提取了8个主成分,累积贡献率为68.599%。研究发现收集的实生黄皮具有丰富多样性,可以对实生黄皮种质资源进行深入研究与选育。

黄皮果实ClPPO基因克隆及表达分析

多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)是果实采后酶促褐变的一个关键酶。为了获得黄皮(Clausena lansium(Lour.)Skeels)中多酚氧化酶基因序列信息及其在低温贮藏期间的表达情况,基于本实验室前期转录组测序结果,通过TA克隆及RT-PCR(Reverse transcription PCR)技术,鉴定了一个PPO基因,命名为ClPPO(GenBank登录号:MW532091)。ClPPO全长1782 bp,具有完整的开放阅读框,编码593个氨基酸,包含Tyrosinase、PPO1_DWL和PPO1_KFDV三个保守结构域。与其他植物的氨基酸序列总体相似性为75.85%,与柑橘CcPPO进化关系最近。ClPPO为亲水不稳定脂类非分泌蛋白,无跨膜蛋白区,含有63个磷酸化位点和3个二硫键。ClPPO蛋白酶的二级结构无规则卷曲比例最高,三级空间结构模型与苹果络氨酸酶(MdPPO1,6els.1.A)序列同源性达70%以上。亚细胞定位分析推断ClPPO蛋白定位于叶绿体中。RT-qPCR实验表明,低温贮藏过程中,ClPPO基因表达量在果肉中呈先上升后下降的趋势,HT(热处理,50℃/30 s)和LTC(程序降温,8℃/4 d)处理均能有效抑制ClPPO基因表达的上升,ClPPO基因表达与果肉PPO酶活性变化趋势高度一致。果皮PPO酶活性呈现与果肉类似的变化趋势,但果皮ClPPO基因表达与PPO酶活性间变化趋势并不一致,表明ClPPO基因主要在黄皮果肉中起到调控作用,从而延缓果肉褐变及衰老进程。