卷柏化学成分研究

目的 研究中药卷柏 (Selaginellatamariscina (Beauv .)Spring)水提物中的化学成分。方法 利用SephadexLH 2 0及硅胶等色谱技术进行分离纯化 ,根据理化性质、光谱数据进行结构鉴定。结果 得到 4个化合物 ,分别鉴定为 1 羟基 2 [2 羟基 3 甲氧基 5 (1 羟基乙基 ) 苯基 ] 3 (4 羟基 3 ,5 二甲氧基苯基 ) 丙烷 1 O β D 葡糖苷 (卷柏苷B ,I) ,腺苷 (II) ,鸟苷 (III) ,熊果苷 (IV)。结论 卷柏苷B为新化合物 ,腺苷、熊果苷。

卷柏中一个新木脂素苷的分离与鉴定

目的 研究卷柏的化学成分。方法 利用大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、硅胶柱色谱进行分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构。结果 从卷柏中分离得到4个化合物,分别鉴定为(75,8R)-7,8-二氢-7-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-8-羟甲基-[1’-(7’-羟基)乙基-5’-甲氧基]苯骈呋喃-4-O-β-D-葡糖苷(命名为卷柏苷C,化合物Ⅰ)、D-甘露醇(化合物Ⅱ)、酪氨酸(化合物Ⅲ)、莽草酸(化合物Ⅳ)。结论 化合物Ⅰ为新化合物,化合物Ⅱ和Ⅲ为首次从卷柏属植物中分离得到,Ⅳ为首次从卷柏中分离得到。

卷柏中化学成分的分离与结构鉴定

目的 研究中药卷柏 (Selaginellatamariscina (Beauv .)Spring)水提物中的化学成分。方法 用SephadexLH 2 0及硅胶等色谱技术进行分离纯化 ,根据理化性质、光谱数据进行结构鉴定。结果 得到 9个化合物 ,分别鉴定为( 2R ,3S) 二氢 2 ( 3′ ,5′ 二甲氧基 4′ 羟基苯基 ) 3 羟甲基 7 甲氧基 5 乙酰基苯骈呋喃 ( 1) ,3 羟基 苯丙酸 ( 2′ 甲氧基 4′ 羧基苯酚 )酯 (卷柏酯A ,2 ) ,丁香脂素 ( 3) ,1 ( 4′ 羟基 3′ 甲氧基苯基 )丙三醇 ( 4 ) ,阿魏酸 ( 5 ) ,咖啡酸 ( 6 ) ,香荚兰酸( 7) ,丁香酸 ( 8) ,7 羟基香豆素 ( 9)。结论 化合物 1,2为新化合物 。

卷柏的化学成分

目的研究卷柏[Selaginella tamariscina(Beauv.)Spring]的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、制备型HPLC等手段进行分离纯化,并利用波谱学方法鉴定化合物的结构。结果从卷柏乙醇提取物中分离得到13个化合物,分别鉴定为3β-羟基-7α-甲氧基-24β-乙基-胆甾-5-烯(1)、胆甾醇(2)、β-谷甾醇(3)、海棠果酸(4)、白桦脂酸(5)、5,4′-二羟基-7-甲氧基黄酮(6)、3-methoxychrysazin(7)、穗花杉双黄酮(8)、异柳杉双黄酮(9)、香草酸(10)、对甲氧基苯甲醛(11)、对羟基苯甲酸(12)、胡萝卜苷(13)。结论化合物1-2、4-7、10、13为本属植物中首次分离得到的化合物。

三种卷柏属植物对人单核细胞白血病U937细胞的增殖抑制作用

为了观察中华卷柏、鹿角卷柏、卷柏等三种卷柏属植物的甲醇总提物、乙酸乙酯部位、石油醚部位样品对体外培养的人单核细胞白血病细胞U937细胞的增殖抑制作用。通过常规传代培养人单核白血病U937细胞,再用噻唑兰比色法(MTT)检测不同浓度样品作用于U937细胞12、24 h和48 h后的细胞增殖情况。中华卷柏和卷柏对U937细胞的增值抑制呈时间和剂量依赖性。鹿角卷柏对U937细胞的增值抑制呈剂量依赖性。药物作用24 h时,三种卷柏属植物对U937细胞均有显著抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)分别为中华卷柏甲醇总提物102.54μg/m L、乙酸乙酯部位87.95μg/m L、石油醚部位91.63μg/m L;鹿角卷柏甲醇总提物118.69μg/m L、乙酸乙酯部位126.03μg/m L、石油醚部位135.8μg/m L;卷柏甲醇总提物103.92μg/m L、乙酸乙酯174.75μg/m L、石油醚102.64μg/m L。证明了三种卷柏均能有效抑制U937细胞的增殖,为后续对卷柏属植物抗癌机制的研究提供了方向。

卷柏总蛋白质提取方法及双向电泳条件的建立

目的:建立复苏植物——卷柏总蛋白质的提取方法,以及可以对其蛋白质组进行阵列分离的双向电泳条件。方法:通过多种条件的组合与优化,建立了以物理和化学2种方法充分裂解植物组织细胞,并采用低温操作、加入PVP等去除植物组织中大量的酚类物质,最后离心去除不溶性杂质的卷柏蛋白质组双向电泳(2-DE)样品制备方法。第1向电泳为固相pH梯度等电聚焦,第2向电泳为垂直平板SDS-PAGE。结果:通过对样品制备、蛋白定量、第1向和第2向电泳、染色方法等各实验环节进行控制和优化,凝胶经考马斯亮蓝染色后,可分辨蛋白质斑点数约600个。结论:建立了卷柏总蛋白质的提取方法及蛋白质组双向电泳技术,为后续研究卷柏在干旱胁迫下的差异表达奠定了基础。

卷柏雌激素样活性有效部位对去势大鼠骨代谢的影响

目的:研究卷柏雌激素有效部位对去势大鼠骨代谢的影响。方法:Wistar雌性大鼠,除假手术组以外均进行去势手术,建立绝经后骨质疏松大鼠模型。术后以卷柏雌激素活性有效部位给药进行干预。给药40 w后,处死大鼠,测定大鼠右股骨骨密度(BMD)和骨生物力学指标;检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、钙(Ca)、磷(P)、血清雌二醇(E2)、甲状旁腺素(PTH)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、骨钙素(BGP)、降钙素(CT)、Ⅰ型前胶原羧基端前肽(PICP)等生化指标。结果:与模型组比较,卷柏有效部位能提高去势大鼠血清中E2与CT水平(P<0.05);降低血清中ALP、TRAP、BGP、PTH、PICP水平(P<0.05);提高股骨刚度(P<0.05);对股骨的骨密度、最大载荷、最大位移、破断位移、最大能量吸收、弹性模量等指标有一定的改善作用,但差异无统计学意义。结论:卷柏雌激素样有效部位对绝经后骨质疏松具有一定的改善作用。

卷柏黄酮对小鼠中枢神经系统的影响

目的:观察卷柏黄酮对小鼠中枢神经系统的影响。方法:采用行为学法观察高、中、低3个剂量卷柏黄酮作用小鼠后对小鼠自主活动、协调运动及阈下剂量戊巴比妥钠催眠作用的影响。结果:与空白对照组相比,3个剂量组小鼠的自主活动次数有所减少,尤以高剂量卷柏黄酮组减少最为明显(F组间=9.819,F时间=4.480,F交互=2.489,P均<0.001);与空白对照组相比,中、低剂量卷柏黄酮对小鼠的协调运动无明显影响,高剂量卷柏黄酮可明显降低小鼠的协调运动能力(F组间=93.265,F时间=287.416,F交互=88.062,P均<0.001);与空白对照组相比,3种剂量的卷柏黄酮对小鼠阈下剂量戊巴比妥钠睡眠持续时间无明显影响(P>0.05)。结论:高剂量卷柏黄酮对小鼠有一定的镇静作用。

卷柏中穗花杉双黄酮化学对照品的制备方法

目的研究从卷柏中分离穗花杉双黄酮化学对照品的制备方法与分析技术。方法采用溶剂和色谱方法从卷柏中分离、纯化、制备穗花杉双黄酮对照品,以紫外、红外光谱、质谱、氢谱和碳谱鉴定结构,以薄层色谱法、高效液相色谱法进行纯度检查。结果制得的穗花杉双黄酮经薄层色谱法检查无杂质斑点,经高效液相色谱法检测纯度达98.5%以上。结论所建立的分离、纯化方法简便,成本低。

分光光度法测定蒙药卷柏中总黄酮含量

采用分光光度法 ,测定了蒙药卷柏中总黄酮的含量 ,检测波长为 5 0 0 nm,校准曲线相关系数为 0 .9996 ,相对标准偏差为 1 .0 1 %,平均加样回收率为 1 0 1 .6 1 %。此法准确度较高 ,为卷柏中黄酮含量测定提供了一种切实可行的方法。

微波消解ICP-AES/ICP-MS法同时测定卷柏中的24种无机元素

采用微波消解-电感耦合等离子体发射光谱(ICP-AES)联合电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)法对卷柏中的Mg、Fe、Ti、Cu、Zn等24种元素的含量进行测定,方法的准确性用中国国家一级标准物质GBW-10015对比分析证实。结果表明,该方法快速准确、灵敏度高,完全可以满足样品中的元素测定要求。应用提出的分析方法测定了卷柏中24种化学元素(包括宏量、微量与痕量元素)的含量,为卷柏的深度开发提供了科学依据与测试手段。

液相色谱质谱联用法测定卷柏中熊果苷的含量

目的：采用高效液相色谱质谱联用（LC-MS/MS）方法测定卷柏药材中的熊果苷的含量。方法：色谱柱为Diamonsil C18（5μm,150 mm×4.6 mm,i.d.）色谱柱,流动相为为乙腈-0.4%甲酸（80∶20,v/v）,流速为0.6 m L·min-1,柱温为室温,进样量为10μL;采用电喷雾离子源进行正离子模式检测,选择性反应检测模式（SRM）用于定量测定。结果：熊果苷在1.0~150μg·m L-1范围内与峰面积线性关系良好,低、中、高3个水平的加样回收率分别为98.8%、98.8%和99.7%,RSD均小于1.1%。结论：该方法简便,准确,重现性好,可用于卷柏中熊果苷的含量测定和质量控制。

中药卷柏的原植物鉴定

研究常用中药卷柏的原植物卷柏和垫状卷柏的植物学特征，明确两者的分类地位。观察两者的外部形态特征，并用扫描电镜观察它们的孢子和叶片表面特征。结果：两者在中叶形状，侧叶边缘齿，孢子纹饰、叶片表面特征方面均有差别。结论：垫状卷柏不宜作为卷柏的变种处理，应视为不同种。本工作为其分类学提供了新资料，可用于正确鉴定、合理应用卷柏类中药。

卷柏止血作用实验观察

卷柏制剂止血作用实验观察的结果表明:以200％卷柏注射液给小鼠iPO.2ml/10g,其凝血时间明显缩短,与空白对照组比较(P<0.01)差异具有非常显著意义;另以卷柏炭喂饲小鼠8天后,测定凝血时间也明显缩短,与空白对照组比较(P<0.01),两组差异亦有非常显著意义。卷柏对家兔凝血酶原时间的影响,虽给药后较给药前缩短,但统计学处理结果为(P>0.05),差异无显著意义。对离体兔耳血管灌流的实验结果为给卷柏后灌流量减少不明显,说明无血管收缩作用。

卷柏抗肿瘤转移的活性成分

目的研究卷柏抗肿瘤转移的活性成分。方法卷柏全草采用70%乙醇提取、系统溶剂萃取,综合运用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、制备HPLC色谱等分离色谱法分离纯化卷柏中的化学成分;采用NMR和质谱等有机波谱学方法鉴定化合物的结构;通过伤口愈合实验来评价卷柏化学成分抗肿瘤转移的活性。结果从卷柏中分离鉴定了7个化合物,分别为阿罗托双黄酮(1),扁柏双黄酮(2),罗波斯塔黄酮(3),异柳杉双黄酮(4),卷柏酸(5),麦芽碱-O-α-L吡喃鼠李糖苷(6),麦芽碱-O-[(6″-O-反式肉桂酰基)-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖基-α-L-吡喃鼠李糖苷](7)。此外抗肿瘤转移活性筛选结果表明,化合物6和7均能剂量依赖性提高抗肿瘤转移活性。结论化合物5～7为首次从该植物中分离得到,化合物6和7与阳性对照药LY294002相比能够更强地抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的迁移的抗肿瘤转移活性。

正交实验优化卷柏类黄酮提取工艺及其体外抗氧化作用

以冀南山区的卷柏为试材,通过单因素试验和L9(34)正交实验优化类黄酮提取工艺参数,并对其抗氧化活性进行检测,探究卷柏类黄酮提取的最佳工艺及其体外抗氧化效果。结果表明:在最优工艺条件乙醇体积分数60%、料液比1∶15 g·m L-1、浸提时间30min、浸提温度70℃时,类黄酮的提取率为15.7%。卷柏提取液具有较好清除超氧负离子自由基的能力,当浸提物溶液浓度为3.0 mg·m L-1时,超氧阴离子清除率达到最大值69.4%。结果不仅为进一步优化类黄酮提取工艺参数提供数据参考,而且还为深入理解卷柏抗氧化机理和合理高效利用药用植物资源提供参考依据。

基于网络药理学研究槐花丸治疗结肠炎机制

通过网络药理学的方法对槐花丸治疗结肠炎的作用机制进行探索和研究.通过TCMSP和ETCM数据库找到槐花丸的主要成分,通过Swiss Target Prediction对成分靶点进行预测;使用OMIM、GeneCards、TTD Database和MalaCards数据库以“colitis”为关键词进行检索,获得结肠炎相关的疾病靶点;将疾病靶点与主要成分靶点进行交集得出药物作用成分;使用Cytoscape软件绘制出药物的主要作用成分-靶点相互关系网络图;使用STRING平台导出药物的蛋白与蛋白相互作用(PPI)网络图.应用DAVID数据库对核心靶点进行GO分析及KEGG相关通路分析,并对KEGG信号通路进行可视化.得到槐花丸共有54个主要作用成分,其中26个成分活性较好,可能作用于STAT3、TP53、MAPK3、AKT1、TNF、VEGFA等关键靶点,参与91条信号通路.通过绘制药物成分-疾病靶点网络、药物蛋白与蛋白相互作用网络等多条途径,对槐花丸治疗结肠炎的作用机制进行了初探和研究,为其他相关研究提供了依据,为其后续临床疗效评价指标的筛选提供了研究方向.

卷柏总黄酮提取工艺研究

目的:通过比较实验室和工业化生产车间制备的卷柏总黄酮提取物中总黄酮及穗花杉双黄酮含量,探讨实验室和工业生产制备的卷柏总黄酮的质量差异。方法:采用紫外分光光度法测定卷柏提取物中总黄酮的含量;采用HPLC法测定穗花杉双黄酮的含量,并分析卷柏总黄酮部位中的总黄酮的成分组成。结果:工业化生产车间制备的卷柏总黄酮提取物中各含量指标与实验室制备样品无显著差异。结论:工业化生产车间大生产条件下制备的卷柏总黄酮部位与实验室制备的卷柏总黄酮部位无显著差异,为进一步的新药研究和工业化生产提供了保障。

卷柏各部位对糖尿病大鼠胰岛组织形态及骨骼肌葡萄糖转运蛋白-4表达的影响

目的:观察卷柏醇提物所得各部位对糖尿病大鼠胰岛组织形态及骨骼肌葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)表达的影响。方法:通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ,65mg/kg)诱导糖尿病大鼠模型,观察卷柏各部位给药7d后,空腹血糖、餐后4h血糖变化,观察胰岛组织HE染色切片,并通过免疫组化的方法观察GLUT-4的表达情况。结果:卷柏80%乙醇部位组大鼠空腹血糖及餐后4h血糖与模型组比较均显著降低(P<0.05),GLUT-4的表达量比模型组显著增加(P<0.01),胰岛组织形态与模型组比较也有所改善。结论:卷柏80%乙醇部位可能是卷柏降糖的活性部位,其降糖作用机制可能与修复受损的胰岛组织,增强骨骼肌GLUT-4表达,进而增强机体胰岛素敏感性有关。

卷柏复苏过程中抗氧化系统响应机制及海藻糖含量变化

本文模拟卷柏复苏过程,检测在不同脱水和复水时间条件下卷柏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性、丙二醛(MDA)含量、膜透性及海藻糖含量,研究卷柏复苏过程中抗氧化系统响应机制及海藻糖变化规律,并探讨其复苏机理。研究结果表明:卷柏在含水量极低的情况下,通过复苏作用可基本恢复至初始状态;SOD、CAT和POD活性,MDA含量以及细胞膜透性均随着脱水时间的延长而上升,随着复水时间的延长而下降;海藻糖含量亦随着脱水时间的延长而增加,随着复水时间的延长而减少。卷柏抗氧化系统在复苏过程中启动其保护酶防御机制抵抗水分胁迫,而海藻糖在卷柏保护生物分子过程中发挥着重要作用。