Bioactive compounds from Selaginella involven Spring that protect PC-12 cells

Two new compounds named as 3b 12 16-trihydroxy-6 8 11 13-abietatrien（1） （8R 80S）-4 40 8-trihydroxyl-3 30-dimethoxyl-90-lignanolide（2） and a new natural product 4 40-dihydroxyl-3 30 5 50-dimethoxyldiphenyl diketone（3） were isolated from the whole herbs of Selaginella involven Spring.The structures were elucidated by spectroscopic analyses including UV,IR,1D,2D NMR and MS methods.Additionally,these three compounds exhibited potent protective effect against the injury of PC-12 cells induced by hypoxia/reoxygenation.

基于网络药理学研究兖州卷柏对酒精性肝病小鼠的保护作用

目的利用网络药理学和动物实验研究兖州卷柏治疗酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)的分子机制。方法2022年2-10月通过查阅文献和中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)预测兖州卷柏有效成分及作用靶点,并通过靶点富集分析和分子对接预测兖州卷柏治疗ALD的作用机制。构建急性ALD小鼠模型,验证网络药理学预测结果。结果网络靶点分析结果显示,从兖州卷柏中共筛选出治疗ALD的有效成分20个,其中黄酮类化合物是治疗ALD的关键化合物。从兖州卷柏治疗ALD的65个靶点中筛选出6个核心靶点,核心靶点中除血管内皮生长因子A(VEGFA)外,均富集在白细胞介素-17(IL-17)信号通路。分子对接结果显示,黄酮类关键化合物与核心靶点均具有较好的结合活性。动物实验结果显示,模型组小鼠血清天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性[(240.16±15.77)U/L,(168.01±8.26)U/L]显著高于正常组[(112.43±6.88)U/L,(85.02±5.77)U/L],差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,低、中、高浓度兖州卷柏总黄酮AST[(201.39±9.63)U/L,(165.86±12.00)U/L,(151.72±9.07)U/L]和ALT[(147.51±6.61)U/L,(133.09±5.88)U/L,(111.52±8.00)U/L]活性均显著下降(P<0.05)。此外,兖州卷柏总黄酮能改善酒精引起的肝组织损伤,抑制IL-17信号通路关键基因mRNA表达。结论黄酮类化合物是兖州卷柏治疗ALD的主要成分,可通过多靶点、多途径实现治疗ALD的作用,其治疗机制可能与抑制IL-17信号通路有关。

江南卷柏与混淆品旱生卷柏和兖州卷柏的鉴别研究

目的:研究江南卷柏药材与混淆品旱生卷柏、兖州卷柏的性状与HPLC特征图谱的区别,为江南卷柏和近缘种的鉴定寻找解决方案。方法:观察比较江南卷柏与混淆品的性状特征。采用HPLC法,利用相似度软件计算其HPLC谱图的相似度,选择具有鉴别意义的指纹区,以穗花杉双黄酮色谱峰为参照,计算色谱峰相对保留时间,建立特征图谱,采用HPLC-DAD-ESI-MS/MS指认江南卷柏特征图谱的化学成分,并与其近缘种图谱进行比较。结果:江南卷柏、旱生卷柏、兖州卷柏具有其专属的性状特征。HPLC特征图谱方法学考察良好,10批江南卷柏样品的相似度为0.871~0.985,具有稳定的共有峰。江南卷柏特征图谱中13种黄酮类化学成分得到指认,江南卷柏特征图谱与其分类关系最近的兖州卷柏、旱生卷柏的特征图谱有明显区别。罗布斯塔双黄酮、罗布斯塔双黄酮-4′-甲醚为首次从旱生卷柏中发现。结论:该方法简便,可靠,实用性强,能准确地鉴别江南卷柏以及近缘混淆品,为江南卷柏的鉴定提供了科学依据。

兖州卷柏的肽类化学成分及对低氧/复氧诱导的PC-12细胞损伤的保护作用

采用聚酰胺、硅胶柱层析、Sephadex LH-20和制备液相等分离方法对卷柏属植物兖州卷柏的化学成分进行分离纯化,根据理化性质和现代波谱技术鉴定了11个化合物：aurantiamide（1）、aurantiamide acetate（2）、Nbenzoyl-L-phenylalaninol（3）、neoechinulin A（4）、5,7-二羟基色原酮（5）、3-（3-羟基-苯基）-丙酸（6）、3-（3-羟基-苯基）-丙酸甲酯（7）、肉桂酸（8）、（1H-indol-3-yl）oxoacetamide（9）、3-甲醛-1H-吲哚（10）、3-甲酸-1H-吲哚（11）,以上11个化合物首次从该植物中分离得到,且为首次从卷柏属植物中得到。采用Hoechst Staining法评价化合物1~4四个肽在低氧/复氧诱导的PC-12细胞损伤中的保护作用,结果表明4个肽类化合物在低氧复氧诱导的PC-12中表现出较强的抗氧化作用,并具有剂量依赖性,对低氧/复氧诱导的PC-12细胞损伤呈现出一定的保护作用。

兖州卷柏化学成分研究

目的研究卷柏属植物兖州卷柏的化学成分。方法采用聚酰胺、硅胶、Sephadex LH-20等柱层析分离方法对兖州卷柏75%乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果从兖州卷柏提取物中分离得到16个单体化合物,分别为橡胶树双黄酮（1）、apigeninyl-（4,O,3）-kaempferol（2）、异柳杉双黄酮（3）、7,4＇-氧-二-甲基穗花杉双黄酮（4）、四甲基穗花杉双黄酮（5）、6-羟基芦荟大黄素（6）、大黄素-6-甲醚（7）、大黄素（8）、大黄酚（9）、5α-豆甾-3,6-二酮（10）、羽扇豆醇乙酸酯（11）、邻苯二甲酸二丁酯（12）、胡萝卜苷（13）、β-谷甾醇（14）、β-香树脂醇（15）、十七烷酸（16）。结论化合物1～12首次从该植物中分离得到,其中化合物10～12为首次从卷柏属植物中得到。

兖州卷柏化学成分及体外抗菌活性研究

本文研究兖州卷柏Selaginella involvens Spring.的化学成分及体外抗菌活性。运用反复色谱层析进行纯化分离得到7个化合物,经波谱解析结合理化鉴定确定化合物结构为:正十六烷酸(1),正十八烷酸(2),β-谷甾醇(3),豆甾醇(4),穗花杉双黄酮(5),β-D-glucopyranoside,(3β)-cholest-5-en-3yl(6),β-香树脂醇(7)。化合物1～7均首次从该植物中分离得到,6和7首次从该属植物中分离得到。此外研究了化合物5、6和7的体外抗菌活性。化合物5、6和7可能为兖州卷柏抗肺炎病菌的主要物质基础。

微波辅助提取兖州卷柏中的总黄酮

目的研究兖州卷柏黄酮成分的最佳提取条件。方法优选微波辅助提取法,在单因素实验的基础上,通过正交试验,确定提取兖州卷柏总黄酮的最优提取条件。结果总黄酮以70%乙醇为溶剂,料液比为1∶20,功率为462 W时,用微波辅助法提取10 min为最优提取条件。结论实验结果表明采用微波辅助法能有效提取兖州卷柏总黄酮。

兖州卷柏的红外光谱对比分析

文章首次采用傅里叶变换红外光谱法对兖州卷柏的叶、茎和根进行了对比研究,比较了它们红外光谱的异同。结果表明:兖州卷柏的叶、茎和根由于所含的化学成分不同和相对含量的差异,其红外光谱的吸收的位置和强度均有不同,它们具有各自的特征谱,为药用蕨类植物鉴定提供了科学依据。

两种卷柏科药用蕨类植物的红外光谱分析研究

本文首次利用傅里叶红外光谱对翠云草全草和兖州卷柏叶、茎及根的红外光谱图进行了对比研究。结果表明:由于它们所含的化学成分不同和相对含量的差异,其红外光谱的吸收峰的位置和强度均有不同,它们具有各自的特征谱,为药用蕨类植物鉴定提供了科学依据。

兖州卷柏乙醇提取物对人食管癌裸鼠移植瘤细胞的抑制作用

目的探讨兖州卷柏乙醇提取物对人食管癌裸鼠移植瘤细胞的抑制作用。方法构建人食管癌裸鼠移植瘤模型,随机分成5组,每组各10只,分别灌胃给药等体积的兖州卷柏乙醇提取物高、中、低剂量组(400、200、100 mg/kg),并设置阳性对照(环磷酰胺,5 mg/kg)组和阴性对照(生理盐水,0.2 mL/只)组。每天给药1次。给药4 d后,开始测量并计算肿瘤体积。给药20 d后,处死裸鼠,称瘤重,并计算抑瘤率,肝脏、脾脏指数。结果实验结束后,兖州卷柏乙醇提取物高、中剂量组的肿瘤体积均比阴性对照组小且差异有统计学意义(P<0.01),但均比阳性对照组大且差异有统计学意义(P<0.05);低剂量组比阴性对照组小(P<0.05)。高剂量组食管癌肿瘤的重量比阴性对照组小(P<0.01),其抑瘤率为30.51%,但比阳性对照组大(P<0.05);中、低剂量均比阴性对照组小(P<0.05),抑瘤率分别为18.12%和9.25%。高剂量组肝脏指数比阴性对照组小(P<0.01);中剂量组肝脏指数也比阴性对照组小(P<0.05)。高剂量组脾脏指数比阴性对照组小(P<0.05)。结论兖州卷柏乙醇提取可以抑制人食管癌裸鼠移植瘤细胞的生长。

兖州卷柏生物碱的抗氧化活性研究

从兖州卷柏中提取生物碱类化合物,用沉淀法和分光光度法对生物碱进行鉴定,并检测兖州卷柏生物碱对DPPH自由基清除活性以及对大鼠肝脏匀浆丙二醛(MDA)含量、总抗氧化(T-AOC)和一氧化氮合酶(NOS)活性的影响。结果表明,从兖州卷柏中分离出的生物碱类化合物具有较强体外抗氧化活性。兖州卷柏生物碱具有清除DPPH自由基活性、提高大鼠肝脏匀浆的T-AOC活性、降低NOS活性以及清除MDA含量的功能。

超声辅助提取兖州卷柏生物碱及其对H22肝癌细胞增殖抑制影响

目的:研究超声波辅助兖州卷柏生物碱提取工艺,以及兖州卷柏生物碱对小鼠H22肝癌细胞的增殖抑制作用。方法:采用超声辅助乙醇浸提法对兖州卷柏生物碱进行提取,并设计正交实验对提取工艺进行优化。采用MTT法研究兖州卷柏生物碱对小鼠H22肝癌细胞增殖抑制活性。结果:超声辅助兖州卷柏提取最佳工艺为:乙醇浓度70%、固液比1:40、超声时间60min、超声功率400W和超声温度60℃。最高提取率达1.18%。兖州卷柏生物碱对小鼠H22肝癌细胞增殖抑制效果随浓度增大和培养时间增长而增加,其中细胞培养48h,生物碱浓度为8mg/mL时,对肝癌细胞增殖抑制率达53.25%。结论:超声辅助法是兖州卷柏生物碱提取的有效方法,兖州卷柏生物碱对肝癌H22细胞有明显抑制作用。

兖州卷柏乙醇提取物对食管癌细胞增殖及NO-cGMP通路的影响

采用体外培养人食管鳞癌细胞(EC-9706),观察兖州卷柏乙醇提取物对食管鳞癌细胞增殖的影响,并检测兖州卷柏乙醇提取物作用于食管鳞癌细胞后,一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、环鸟苷酸(c GMP)含量的变化;同时,观察兖州卷柏乙醇提取物对培养小鼠肝细胞的影响。结果显示不同浓度兖州卷柏乙醇提取物能不同程度地抑制食管鳞癌细胞的增殖,降低其细胞中NO、NOS和c GMP含量,且对培养小鼠肝细胞的损伤具有保护效果。

兖州卷柏的形态鉴别和数码显微鉴别

目的:观察兖州卷柏植物学形态特征和全草粉末的显微特征,为兖州卷柏的植物鉴别提供科学依据。方法:采用植物形态学鉴别和数码显微镜的粉末显微鉴别研究方法,并拍摄植物形态学图片和显微彩色数码图片。结果:植物形态学主要特征为孢子叶穗、孢子叶、孢囊等;全草粉末的主要显微鉴别特征为螺纹导管及管胞、晶纤维、非腺毛、薄壁细胞、木纤维、表皮细胞及气孔,构成了兖州卷柏重要的植物学鉴定特征。结论:植物形态学图片和显微彩色数码图片真实、直观反应兖州卷柏的鉴别特征,可以为兖州卷柏粉末的植物鉴别和进一步研究利用提供科学依据。

正交实验优化兖州卷柏总黄酮的提取工艺

目的:研究兖州卷柏总黄酮提取工艺。方法:根据单因素分析结果,采用3因素3水平正交实验对兖州卷柏总黄酮提取工艺进行优化。结果:温度是影响兖州卷柏黄酮提取的首要因素,其次为提取时间和料液比。兖州卷柏总黄酮最佳工艺是:温度70℃、时间7 h、固液比为1∶20(A2B2C3)。结论:此方法简单可行,是兖州卷柏总黄酮提取的有效方法。

兖州卷柏总生物碱对小鼠H22肝癌移植瘤的影响

目的:皮下接种H22肝癌细胞株构建小鼠H22肝癌移植瘤模型,研究兖州卷柏总生物碱对小鼠抗肿瘤效果。方法:将H22肝癌移植瘤小鼠随机分5组,Ⅰ组为NS阴性对照组,每天一次性灌胃等量生理盐水;Ⅱ组按20 mg/kg剂量每天一次性灌胃环磷酰胺(CTX)水溶液;Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组分别按40、80、120 mg/kg剂量每天一次性灌胃兖州卷柏总生物碱溶液。连续2周,末次给药24 h后,称体重,观察治疗前后小鼠体重变化;颈椎脱臼处死小鼠,剖取腋下瘤组织、肝肝、脾脏和胸腺组织,分别称重,计算抑瘤率和胸脾指数。取部分肿瘤组织10%甲醛固定,切片,HE染色,观察肿瘤组织病理学变化。结果:各剂量的兖州卷柏生物碱均能延长H22肝癌移植瘤小鼠生存时间和抑制肿瘤生长,且各剂量组中抑瘤率呈现剂量-效应关系。结论:兖州卷柏生物碱对小鼠H22移植瘤具有抑制效果。

兖州卷柏苯丙素类和木脂素类化学成分研究

目的研究兖州卷柏Selaginella involven中苯丙素类和木脂素类化学成分，探讨其在卷柏属植物进化中的作用。方法采用聚酰胺、硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱分离方法对兖州卷柏75％乙醇提取物进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果从兖州卷柏提取物中分离得到15个苯丙素类和木脂素类结构，分别鉴定为3-（3-羟基-苯基1-丙酸（1）、3-（3-羟基-苯基）-丙酸甲酯（2）、肉桂酸（3）、3-hydroxy-1-（3-methoxy-4-hydroxyphenyl）propan-1-one（4）、3-hydroxy-l-（3，5-dimethoxy-4-hydroxyphenyl）propan-1-one（5）、荛花酚（6）、去甲络石苷元（7）、罗汉松脂素（8）、（5H）-2-furanone-3，4-bis[（4．hydroxy-3-methoxyphenyl）methyl]（9）、acutissimalignan B（10）、detetrahydroconidendrin（11）、丁香脂素（12）、3，3’，5．trimethoxy-4，7-epoxy-8，5＇-neolignan-7-ene-4，9-9＇tri01-9-aldehyde（13）、刺五加酮（14）、tarennone（15）。结论15个化合物均为首次从该植物中分离得到，其中化合物1～3、9～11、13～15为首次从卷柏属植物中分离得到。兖州卷柏中一系列以芥子醇和松柏醇及其衍生物为代表的苯丙素类和木脂素类成分的发现在卷柏属植物系统进化中占有重要的地位。

不同生长季节兖州卷柏中穗花杉双黄酮的含量变化

目的:建立兖州卷柏中特征成分穗花杉双黄酮的含量测定方法,比较不同生长季节兖州卷柏中穗花双黄酮的含量。方法:采用HPLC法对样品中总黄酮醇苷和总内酯进行定量分析。对样品中穗花双黄酮进行定量分析。结果:5月份穗花杉双黄酮含量最高,9月份后穗花杉双黄酮含量有所降低,12月份穗花杉双黄酮含量最低。结论:不同季节兖州卷柏中穗花杉双黄酮含量差异较大,此结果为适时采收兖州卷柏质量评价和合理开发利用提供依据。