硒化壳聚糖的制备及理化性质的研究

运用乌氏粘度计、常规溶剂和WZZ-1自动指示旋光仪等方法对硒化壳聚糖的理化性质进行测定,结果表明:硒化壳聚糖的特性粘度为96;脱乙酰度为29.43%;硒化壳聚糖在水中可溶,而且溶解度随温度升高而增加,但在有机溶剂中基本不溶;硒化壳聚糖在25℃时的旋光度为-14。通过紫外光谱、红外光谱的测定分析,确定亚硒酸根连接在壳聚糖分子中C2位的氨基上和C6位的羟基上。

不同硒源及水平对蛋用种公鸡肝脏中硒含量、抗氧化性及基因表达的影响

本试验旨在研究和比较不同硒源及水平对蛋用种公鸡肝脏中硒含量、抗氧化性、硒酶活性及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)基因mRNA表达水平的影响。试验采用单因子试验设计,选取196只150日龄海兰褐蛋用种公鸡,随机分为7个处理,每个处理4个重复,每个重复7只。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂分别在基础饲粮中添加0.4、0.8和1.2 mg/kg硒化壳聚糖(SC)和亚硒酸钠(SS)2种硒源的试验饲粮。试验期35 d。结果表明:1)2种硒源及水平对生长性能无显著影响(P>0.05)。2)饲粮添加SS和SC均能显著增加血浆和肝脏的硒含量(P<0.05);且随着饲粮添加硒水平的增加而机体硒含量增加。3)SC组能显著提高谷胱甘肽过氧化物酶、总超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性(P<0.05),显著降低丙二醛含量(P<0.05)。4)SS组和SC组均能提高各试验组的硫氧还蛋白还原酶和Ⅰ型脱碘酶活性(P<0.05);且SC组显著高于SS组(P<0.05)。5)硒添加水平为0.8 mg/kg时,SC组的GPx4基因mRNA相对表达水平与对照组相比显著升高(P<0.05)。综上所述,不同硒源及添加水平均可影响蛋用种公鸡肝脏中硒含量、抗氧化性、硒酶活性及GPx4基因mRNA表达水平,其中有机硒优于无机硒。

硒化壳聚糖的制备及其体外抗氧化活性研究

以壳聚糖为载体制备了硒化壳聚糖,采用紫外光谱和红外光谱对其结构进行了表征,研究了其体外清除自由基的能力,包括对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基的清除作用和还原能力。结果表明,硒化壳聚糖和壳聚糖对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基均有一定的清除作用,浓度为5.000mg·mL-1的硒化壳聚糖对上述3种自由基的清除率分别为49.58%、78.29%和50.68%。硒化壳聚糖的抗氧化能力要强于壳聚糖,但还原能力与壳聚糖相差不大。

硒复合壳聚糖对肉鸡回肠表观消化率、免疫和肉品质的影响

将120只1日龄AA肉仔鸡随机分为1个对照组和3个处理组,每组3个重复,每个重复10只鸡。对照组Ⅰ喂给基础日粮,试验组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分别在基础日粮中添加0.1 mg/kg的硒和0.05%的壳聚糖、0.2 mg/kg的硒和0.1%的壳聚糖和0.3 mg/kg的硒和0.15%的壳聚糖,进行42 d的生长试验。试验表明:添加硒复合壳聚糖各组在42 d时都能提高回肠食糜干物质表观消化率,并能显著提高回肠能量表观消化率,差异极显著(P<0.01),且以试验Ⅲ组效果最好。试验组Ⅲ对42 d的脾指数影响差异显著(P<0.05),对42 d的法氏囊指数、胸腺指数无显著影响(P>0.05);42 d时各试验组与对照组相比,肌肉的肉色、嫩度、滴水损失都没有显著的影响,差异不显著(P>0.05),试验结果表明,添加硒复合壳聚糖可以提高回肠表观消化率,促进脾脏指数的升高,但对法氏囊和胸腺指数以及肉品质没有显著影响。

硒化壳聚糖理化性质和分子结构的研究

运用高效凝胶色谱 (HPGPC)、乌氏粘度计、XYG- 1 1 0型多功能原子荧光仪、常规溶剂和 WZZ- 1自动指示旋光仪等方法对本实验室制备的硒化壳聚糖的理化性质进行测定 ,结果表明 :硒化壳聚糖的分子量为3448;特性粘度为 99;室温干燥放置 1年 ,硒化壳聚糖保持稳定 ;硒化壳聚糖在水中可溶 ,而且溶解度随温度升高而增加 ,但在有机溶剂中基本不溶 ;硒化壳聚糖在 2 5℃时的旋光度为 - 1 4。通过紫外光谱、红外光谱、氢谱 (1 HNMR)和碳谱 (1 3 CNMR)的测定分析 ,确定亚硒酸根是连接在壳聚糖分子中 C2 位的氨基上和 C6位的羟基上。

硒化壳聚糖对种公鸡组织硒含量、硒酶活性及其基因表达的影响

本试验旨在比较研究硒化壳聚糖(SC)和亚硒酸钠(SS)对海兰褐种公鸡组织硒沉积量,硫氧还蛋白还原酶(TrxR)、Ⅰ型脱碘酶(IDⅠ)活性及TrxR2、IDⅠ基因表达的影响。选取280只20周龄海兰褐种公鸡,随机分为7个处理,每个处理4个重复,每个重复10只鸡。将SC和SS分别以0.4、0.8和1.2 mg/kg 3个硒水平添加到海兰褐种公鸡基础饲粮中,对照组饲喂基础饲粮,进行为期35 d饲养试验。结果表明:1)不同的硒源和硒添加水平对种公鸡生长性能影响不显著(P>0.05)。2)在睾丸中,1.2 mg/kg SS添加组硒含量显著高于对照组(P<0.05),1.2 mg/kg SC添加组硒含量极显著高于对照组(P<0.01);在肾脏中,0.8 mg/kg SS、1.2 mg/kg SS以及1.2 mg/kg SC添加组硒含量均显著高于对照组(P<0.05)。3)饲粮中添加0.4 mg/kg SS极显著提高了种公鸡睾丸TrxR活性(P<0.01),添加0.4 mg/kg SC显著了提高种公鸡睾丸TrxR活性(P<0.05),但只有添加0.4 mg/kg SC才能极显著提高肾脏IDⅠ活性(P<0.01)。4)0.4 mg/kg SC添加组睾丸TrxR2基因mRNA相对表达水平最高,但各组均差异不显著(P>0.05);随着硒添加水平的升高,在SS添加组,睾丸TrxR2基因mRNA相对表达水平呈现先升高后下降的趋势,而在SC添加组,睾丸TrxR2基因mRNA相对表达水平呈现先升高后下降再升高的趋势。与对照组比较,0.4 mg/kg SS添加组肾脏IDⅠ基因mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05)。由此可知,SC对海兰褐种公鸡组织硒沉积,TrxR、IDⅠ活性以及TrxR2、IDⅠ基因表达有较大影响;建议添加低水平(0.4 mg/kg)SC。

硒化壳聚糖的制备及其表征

本研究将具有良好的生物相容性的壳聚糖无机硒酸进行硒化,并对其硒化产物进行结构表征。硒化壳聚糖的IR和UV光谱证明:硒化位点为壳聚糖碳6位上的羟甲基与碳2位上的氨基。硒化壳聚糖为低分子量水溶性物质,有望开发成为高效低毒的抗肿瘤有机硒药物。

硒化甲壳胺的制备及性质

利用制备的甲壳胺的糖单元上碳 2位和碳 6位上的硒化反应制备了硒化甲壳胺 ,并对其结构进行了表征 .动物实验结果表明 ,硒化甲壳胺小白鼠的半数致死量 (LD50 )比起文献报道的亚硒酸钠明显低 .抗癌实验结果表明 ,硒化甲壳胺对癌细胞有明显的抑制作用 .本实验结果对开发毒性小的具有抗癌特性的补硒剂和食品强化剂有实际意义 .

硒化壳聚糖的制备及其硒含量测定的研究

本文利用壳聚糖为反应物制备硒化壳聚糖并对其硒含量检测方法进行了改进,考察了温度,搅拌时间,pH值及提纯方法对制备硒化壳聚糖的影响,得到最优反应条件为反应温度35℃,搅拌2 h,pH=5,用70%乙醇作为提纯试剂得到纯度较高,收率为78.6%的硒化壳聚糖。采用3,3’-二氨基联苯胺分光光度法来测定硒化壳聚糖中硒的含量,省去了高氯酸消化步骤,简化了实验操作,经验证对结果显著影响,可作为快速简便地测定有机硒含量的方法。

HepG2细胞滚瓶培养工艺优化及硒酸壳聚糖对其抑制作用

以HepG2为研究对象,细胞产量为考察指标,在单因素试验的基础上,采用响应面分析法,优化了HepG2细胞滚瓶培养工艺:接种量4×10~7个/瓶,培养时间48 h,滚瓶转速9 r/min,此条件下每滚瓶HepG2细胞产量预测值10.56×10~7个/瓶,验证试验得到实际细胞量为10.88×10~7个/瓶,与理论预测值相比,其相对误差约为3.03%。体外抗肿瘤试验表明,硒酸壳聚糖(Seleno-Chitosan,CS)对96孔板和滚瓶培养HepG2细胞抑制作用IC_(50)值分别为169μg/m L和245μg/m L,表明细胞大量聚集可产生药物拮抗现象。该试验结果为抗肿瘤疫苗研发及肿瘤药物治疗提供理论依据。

饲料中添加硒化壳聚糖对大鳞副泥鳅抗氧化能力的影响

以体质量为4.9±0.2 g的泥鳅为实验对象,在基础饲料中添加了不同含量(0%、0.3%、0.6%、0.9%和1.2%)的硒化壳聚糖。经过为期60 d的养殖后,比较实验鳅肝脏中过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性,以及丙二醛含量和总抗氧化能力的变化。结果发现:硒化壳聚糖对泥鳅过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性有明显的促进作用,CAT活性随着硒化壳聚糖含量增加而增大,在添加量为1.2%时活性最大,各实验组的GPX活性均显著高于空白组;超氧化物歧化酶(SOD)的活性在硒化壳聚糖添加水平大于0.3%时显著高于对照组,并在1.2%添加水平达到最大;实验组泥鳅肝脏内丙二醛(MDA)含量相比于空白组明显下降,且随着硒化壳聚糖的浓度提升而下降,在1.2%时达到最低;实验组总抗氧化能力也有明显的上升,在0.9%时达到最大。整体上,饲料中添加硒化壳聚糖可以显著提升大鳞副泥鳅的抗氧化能力。

硒酸壳聚糖通过线粒体途径诱导A549细胞凋亡的初步研究

本文研究了硒酸壳聚糖(SC)对非小细胞肺癌A549增殖抑制及诱导凋亡作用,并进一步研究了SC对其凋亡前后蛋白差异表达。采用MTT法检测了SC对A549细胞的增殖抑制作用;并用激光共聚焦分别观察了Hoechst33342/PI染色后A549细胞形态的变化以及钙黄绿素染色后细胞线粒体MPTP的开放状况;流式细胞仪检测了SC对A549细胞线粒体跨膜电位的影响;利用2-DE结合MALDI-TOF质谱技术检测了细胞凋亡相关蛋白的差异表达。结果表明:SC对A549细胞具有显著的增殖抑制作用,并在一定范围内呈现时间和浓度依赖性;SC可使A549细胞发生形态改变,使细胞变得不规则,染色质固缩和边集;经SC处理后,细胞的线粒体膜通道逐渐开放;经MALDI-TOF鉴定发现了2个差异表达的蛋白,即抗增殖蛋白(prohibitin isoform 1),细胞内热休克蛋白(heat shock protein)。