高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光光谱法测定富硒大豆中硒代氨基酸的含量

取0.1 g脱脂后富硒大豆样品于离心管中,用5 mL pH 7.5的130 mmol·L^(-1)三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸缓冲液超声振荡30 min,用15 mg链霉蛋白酶于37℃振荡酶解5 h,离心后取上清液,过0.22μm尼龙有机滤膜。滤液中的硒代半胱氨酸(SeCys)、硒代蛋氨酸(SeMet)、甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)在Agela MP-C_(18)色谱柱上分离,以含2%(体积分数)甲醇和0.5 mmol·L^(-1)四丁基溴化铵的40 mmol·L^(-1)磷酸氢二铵溶液(pH 7.0)进行等度洗脱,并采用氢化物发生-原子荧光光谱法测定3种硒代氨基酸的含量。结果表明,3种硒代氨基酸在7 min内可以实现基线分离,标准曲线的线性范围均为5~100μg·L^(-1),检出限依次为0.086,0.075,0.047 mg·kg^(-1)。按照标准加入法进行回收试验,回收率为85.5%~103%,测定值的相对标准偏差(n=7)不大于3.0%。方法用于分析富硒大豆中的硒代氨基酸,大豆中硒赋存形态多为SeMet,含量占总硒量的85.5%~94.5%。

超高效液相色谱-串联质谱法测定孜然中3种硒代氨基酸含量

目的采用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS),对新疆不同地区的孜然进行硒代氨基酸含量分析。方法样品采用水提取法进行提取,以0.1%的乙腈(A)和水(B)二元流动相体系、多反应监测模式进行监测,基质匹配外标法进行定量,对硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸和Se-(甲基)硒基-L-半胱氨酸等3种硒代氨基酸进行色谱分离、测定。结果全疆和东疆的3种硒代氨基酸总含量分布较为接近,且东疆总量均值2.635μg/kg与全疆2.705μg/kg接近,北疆总量均值最小,为2.396μg/kg,南疆总量均值最大,为3.003μg/kg,其中产自吐鲁番的孜然中3种硒代氨基酸含量较高。环节中硒代氨基酸总含量的大小顺序为批发环节>零售超市环节>农贸环节,3种硒代氨基酸中硒代胱氨酸含量最多,占比最大。结论本研究采用水提法以及UPLC-MS/MS分析3种硒代氨基酸测定结果准确且操作便捷。结果分析各含量显示同一区域内所产孜然中硒代氨基酸的含量和质量仍可能呈现较大差异,在不同环节下的各种物质含量有明显差异,其中批发环节保持了硒代氨基酸的稳定性,3种硒代氨基酸含量较高。以期对孜然中硒代氨基酸高效测定提供数据支持。

柱前衍生-反相高效液相色谱法检测富硒米曲霉中有机硒形态

建立高效液相色谱法测定富硒米曲霉中有机硒形态的分析方法。采用6 mol/L HCl溶液,50℃水解富硒米曲霉48 h,提取样品中的有机硒,4-氯-3,5-二硝基三氟甲苯柱前衍生,C18反相色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）分离,以乙腈-水（1∶1,V/V）和p H 6.8乙酸-乙酸钠缓冲液为流动相进行梯度洗脱,紫外检测波长：240 nm,测得富硒米曲霉中有机硒化合物主要是硒代胱氨酸,检出限（RSN=3）为0.680 mg/L,定量限（RSN=10）为2.244 mg/L,线性范围为5.0~100 mg/L,加标回收率为94.8%~105.8%,硒代胱氨酸的含量为1.25 mg/g。本方法简单、灵敏、重复性好,可适用于富硒米曲霉及相关产品中有机硒形态的检测分析。

酵母同化无机硒作用的研究

本文报道了酵母在同化无机硒为有机硒的过程中,培养基的种类、亚硒酸钠浓度以及蛋氨酸浓度与生成的硒酵母中的硒蛋氨酸量的某些规律。实验结果表明:硒酵母中硒蛋氨酸的量与培养基的种类有关,随培养基中亚硒酸钠浓度的增加而增加,而随蛋氨酸浓度的增加而减少。提出了一个准确测定生物物质中硒代氨基酸的分析方法。

氨基酸硒对桃设施栽培环境适应性的影响

探讨了硒提高桃适应设施栽培环境的效果,为提高设施桃的环境适应能力和改善果实品质调控技术提供依据。以4年生桃设施栽培的主栽品种中油4号油桃和春雪毛桃为试验材料,研究氨基酸硒对桃光合作用光响应曲线、二氧化碳响应曲线、温度响应曲线和蒸腾速率的影响。喷施氨基酸硒使设施桃的光补偿点和二氧化碳补偿点显著降低,表观量子效率和羧化效率显著提高,使设施桃净光合速率在高温条件下保持较高数值且呈平稳状态,显著促进了设施桃的蒸腾作用。喷施氨基酸硒显著增强了桃对设施弱光、二氧化碳浓度低、高温和高湿环境的适应能力,为设施桃品质的改善奠定了良好基础,因此,喷施氨基酸硒是一项切实可行的提高桃对设施环境适应能力的重要农艺措施。

微波水解-液相色谱-原子荧光光谱法测定硒蛋白中的硒代氨基酸

针对酶解法测定硒代氨基酸操作复杂,时间长,水解不完全且水解产物不稳定等问题,建立一种微波水解-液相色谱-原子荧光光谱仪测定硒蛋白中硒代氨基酸的方法。样品经HCl(6 mol/L)微波水解后,调节pH值至7.5,采用阴离子色谱柱,pH=6.0的(NH_(4))_(2)HPO_(4)(40 mmol/L)溶液为流动相,流速0.6 mL/min,等度洗脱12 min的条件对硒代胱氨酸(SeCys_(2))、甲基-硒代半胱氨酸(MeSeCys)和硒代蛋氨酸(SeMet)进行分离,用原子荧光光谱仪测定其含量。微波水解条件采用星点设计-响应面法进行优化,优选最佳水解条件为:称样量20 mg,水解温度150℃,水解时间40 min。SeCys_(2)、MeSeCys和SeMet均在0~100 ng浓度范围内呈线性关系,相关系数均大于0.999,检出限分别为0.07、0.03和0.14 mg/kg,RSD分别为5.6%、4.6%、3.7%(n=6)。用来测定硒代氨基酸,耗时短,成本低,水解完全,操作简单,水解产物稳定,能够科学评价硒蛋白中硒代氨基酸的组成,对硒蛋白产品的质量控制和溯源提供了科学方法,值得推广应用。

UPLC-Q-TOF-MS测定赣南脐橙中的硒代氨基酸

建立了测定赣南脐橙中硒代胱氨酸(SeCys_(2))、甲基-硒代半胱氨酸(MeSeCys)和硒代蛋氨酸(SeMet)的UPLC-Q-TOF-MS分析方法.样品通过超声水提取,选取AccQ·Tag^(TM)氨基酸色谱柱(3.9 mm×150 mm),以水-甲醇(90∶10)为流动相进行分离,经电喷雾离子源(ESI)正离子化后,采用多反应离子监测方式(MRM)和外标法定量.实验结果表明,SeCys_(2)、MeSeCys、SeMet在5 ng/mL~100 ng/mL范围线性良好,相关系数R^(2)≥0.997;3种硒代氨基酸的加标回收率在78.8%~92.2%之间,相对标准偏差在2.1%~7.5%之间;SeCys_(2)、MeSeCys、SeMet的检出限分别为6 ng/mL、10 ng/mL、1 ng/mL.因此,该方法可以用于富硒脐橙中3种硒代氨基酸的准确和高效检测.

外源硒肥对茶树叶中硒代氨基酸形态及含量影响的研究

通过土施和喷施不同浓度亚硒酸钠的盆栽及大田实验,研究不同浓度的外源硒肥对茶树叶中硒代氨基酸形态及含量的影响;采用离子色谱-积分脉冲安培检测法(HPAEC-IPAD)对茶树叶中硒代氨基酸进行定性和定量分析。结果显示:3种硒代氨基酸在其线性范围内的相关系数R2在0.9994～0.9999之间,相对标准偏差RSD(%)分别为2.47、3.17和3.77,具有很好的相关性;茶树叶中硒代甲基半胱氨酸(SeMeCys)是硒代氨基酸存在的主要形式,随着喷施和土施亚硒酸钠浓度的增加,其含量呈现先增加后降低的趋势,茶树叶中总的硒代氨基酸的含量变化与此变化相符;茶树叶中总的硒代氨基酸在喷施Se180μg ml-1、12天左右时采摘最为理想,所含硒代氨基酸总量为336.1μg g-1,但喷施浓度不宜高于Se 180μg ml-1,否则茶树叶面上会出现褐色的斑点及焦化,影响其外观和品质;土施亚硒酸钠时以Se 0.25～0.5 mg kg-1,施后6个月采摘较佳,茶树叶中总的硒代氨基酸的含量为293.9～471.7μg g-1,大田试验结果与盆栽试验结果相符。

含硒含硫氨基酸清除超氧阴离子自由基的研究

目的通过硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸和胱氨酸对超氧自由基(O_2·)的清除能力对比实验,研究含硒含硫氨基酸的抗氧化作用。方法采用核黄素-蛋氨酸光照法测定含硒含硫氨基酸清除超氧阴离子自由基的能力。结果清除O 2_·能力的强弱顺序为硒代胱氨酸>胱氨酸>硒代蛋氨酸。以硒代蛋氨酸代替核黄素-蛋氨酸光照体系中的蛋氨酸,发现两物质虽然结构相似,但是硒代蛋氨酸供电子能力不如蛋氨酸。结论硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸、胱氨酸均能直接清除VB2产生的O_2·。蛋氨酸作为电子供体,可促进VB2光分解产生O_2·,而硒代蛋氨酸则直接清除VB2光分解后产生的O·_2。

硒对十字花科作物营养品质的影响综述

十字花科作物是人们日常生活中经常食用的蔬菜,它们普遍具有较强的富硒能力,可以转化和利用硒,是膳食补硒的理想载体。不同的十字花科作物体内的硒代氨基酸有所差异,包括硒代半胱氨酸、硒代蛋氨酸等。硒对十字花科作物的芥子油苷含量会产生影响,同时可以合成一些硒代芥子油苷物质,对于十字花科作物营养品质形成具有重要意义。另外,硒对氨基酸、黄酮、酚酸等十字花科作物的重要品质指标也会产生影响。文章概述了近年来硒与十字花科作物品质的相关研究,可为十字花科作物的富硒栽培提供一定的理论基础。