不同交联方法对离体猪巩膜交联效果的比较

背景研究表明化学交联剂可加强巩膜胶原的强度，但交联效果受不同交联方法的影响。目的研究不同交联方法对猪巩膜化学交联效果的影响。方法离体4h以内的新鲜猪眼球70只分为5个组，分别用全眼球交联法和巩膜条带交联法在质量分数1％京尼平溶液、体积分数1％戊二醛溶液或PBS中37℃水浴40rain。交联后每组取10个10ram^4ITlm的颞侧巩膜条带于Instron5848型微力测试仪下进行拉伸实验，测定巩膜组织的弹性模量和拉伸应力；每组其他的4个样本于水浴箱内测试巩膜组织的最大热收缩温度。结果机械力学实验结果表明，1％京尼平溶液处理后，全眼球交联法巩膜条带的弹性模量值为（8．98±1．81）MPa，而巩膜条带交联后的值是（10．85±1．83）MPa，前者约为后者的82．8％，两种交联方法的巩膜弹性模量值间的差异有统计学意义（￡=3．375，P=0．003）；1％戊二醛溶液处理后，全眼球交联法巩膜条带的弹性模量值是（12．78±2．91）MPa，巩膜条带交联后的值是（18．25±5．16）MPa，前者约为后者的70．0％，两种交联方法间的差异有统计学意义（t=4．007，P=0．001）。在5％、10％、15％和20％的应变条件下，全眼球交联法巩膜组织的拉伸应力分别为巩膜条带交联法的54．9％～90．1％，均明显弱于巩膜条带交联法，差异均有统计学意义（P〈O．05）。热力学实验表明，1％京尼平处理后全眼球交联法巩膜的热收缩温度为（68．8±O．9）℃，巩膜条带交联法为（74．8-＋1．3）℃，两种交联方法间的差异有统计学意义（f=11．129，P=0．000）。1％戊二醛处理后全眼球交联法巩膜的热收缩温度为（73．3±O．9）℃，巩膜条带交联法为（79．3±1．3）℃，两种交联方法间的差异有统计学意义（t=11．112，P=0．000）。结论不同交联方法对猪巩膜化学交联后的力学效果存在影响，巩膜条带交联后巩膜的交联强度略好于全眼球交联。

骨形态发生蛋白在形觉剥夺性近视眼后巩膜中表达的变化

背景眼球伸长过程伴随着巩膜的广泛重塑，而这种重塑受多种生长因子的调控。以往的研究证实转化生长因子-β（TGF-β）在近视形成和发展过程中发挥作用。骨形态发生蛋白（BMPs）属于TGF-β超家族，其在近视的发生中是否发挥作用及如何发挥作用尚不清楚。目的观察豚鼠形觉剥夺性近视（FDM）眼后巩膜中BMPs的表达变化，探讨其在近视后巩膜重塑中的作用。方法1～2周龄花色豚鼠30只，以随机数字表法随机分为实验组和正常对照组，每组15只。任意选择实验组豚鼠的一侧眼作为实验眼，应用半透明眼罩连续遮盖14d以建立FDM动物模型，另一侧眼作为对照眼。形觉剥夺前后所有动物眼经检影验光获得屈光度，用A型超声法测量眼轴长度。造模后第15天取豚鼠后巩膜组织，分别用逆转录PCR（RT—PCR）和Westernblot法检测各组豚鼠后巩膜中BMPsmRNA及其蛋白的表达。结果实验14d后，豚鼠遮盖眼的屈光度为（一0．48±0．51）D，与对侧眼的（3．22±0．34）D比较，差异有统计学意义（t=-12．814，P=0．000），与正常对照眼的（2．97±0．70）D比较，差异有统计学意义（t=-11．878，P=0．000）。豚鼠遮盖眼的眼轴长度为（8．30±0．05）mm，明显长于对侧眼的（8．11±0．06）mm和正常对照组（8．06±0．06）mm，差异均有统计学意义（t=7．230、9．084，均P=0．000）。正常豚鼠后巩膜可表达BMP-2、BMP-4、BMP-5mRNA，豚鼠遮盖眼后巩膜中BMP-2mRNA和BMP-5mRNA的相对表达值分别为0．41-±0．11和0．65±0．06，较对侧眼的0．62-±0．07和0．84±0．03分别下降了34．48％和23．67％，差异均有统计学意义（t=2．838，P=0．017；t=2．524，P=0．028）；豚鼠遮盖眼后巩膜中BMP-2和BMP-5蛋白表达的相对值分别为0．44±0．06和0．70-±0．05，较对侧眼的0．61±0．05和0．824-0．03分别下降了23．42％和15．21％，差异均有统计学意义（t=2．465，P=0．030；t=2．445，P=0．031），而形觉剥夺眼与对侧眼后巩膜中BMP-4mRNA及其蛋白相对表达量的差异均无统计学意义（mRNA：t=0．704，P=0．460；蛋白：t=0．987，P=0．365）。结论FDM眼后巩膜中BMP-2和BMP-5的表达下调，提示BMPs在实验性近视后巩膜重塑中可能发挥作用。

带和不带巩膜壳羟基磷灰石义眼台植入临床观察

目的比较不带巩膜壳和带巩膜壳羟基磷灰石义眼台植入术的疗效。方法30例不带巩膜壳羟基磷灰石义眼台植入者、30例带自体巩膜壳义眼台植入者、10例改良带自体巩膜壳义跟台植入者,术后随访1～10 a,对其疗效进行比较,以评价手术效果。结果30例带自体巩膜壳义眼台植入者,术后有5例发生肉芽肿形成,其中4例行义眼台取出术,1例经保守治疗痊愈。30例不带巩膜壳义眼台植入者有1例出现义眼台暴露。10例改良带自体巩膜壳义眼台植入者,无一例出现并发症。结论肉芽肿形成是带自体巩膜壳义眼台植入术后常见并发症,包裹的巩膜壳会影响义眼台血管纤维化,并发生融解和异物反应。改良带自体巩膜壳义眼台植入术可避免这一并发症,又可获得较好的美容效果。

严重后巩膜破裂伤手术治疗

目的研究严重后巩膜破裂伤的手术治疗。方法回顾性分析2004年1月-2005年10月眼后段严重破裂伤患者19例19眼，伤口长度10mm以上，眼内容物部分脱出或嵌顿。均清创缝合，一期或二期玻璃体切除及硅油填充术。随访3个月-2年。结果眼部伴随病变包括眼内积血、视网膜下出血、脉络膜出血性脱离、视网膜脱离、眼内容脱出、视网膜血管闭塞、视神经损伤、虹膜缺失或根部断离、晶状体脱位等。术前8眼视力光感可疑，11眼无光感。术后视力4眼无光感；2眼光感；〈0．01者2眼；0．01≤最佳矫正视力〈0．05者5眼；0．05≤最佳矫正视力〈0．3者3眼；最佳矫正视力〉0．3者3眼。结论严重后巩膜破裂伤经过及时修复，避免盲目摘除眼球，有望重建视功能。

自体板层巩膜置换并结膜移植术治疗复发性胬肉

设计一种自体板层巩膜置换并结膜移植术,治疗17例复发性胬肉,仅2例复发(11.11%)。本法能重建新的角膜缘后缘,以防再发。

烙闭上巩膜静脉建立大鼠慢性高眼压模型

目的烙闭大鼠不同数量上巩膜静脉,探索建立理想的慢性高眼压模型。方法采用完全随机设计方法将45只健康SD雄性大鼠分为3组,分别烙闭大鼠右眼2支、3支、4支上巩膜静脉,建立大鼠慢性高眼压模型,左眼作为对照眼。测量术前及术后、术后1d、1周、2周、1月、2月眼压。结果各组术后眼压与对照眼比较均有升高,差别具有显著性意义(P<0.01),提示烙闭2、3、4支上巩膜静脉均可以建立慢性高眼压模型;进一步进行组间比较,3组间的右眼眼压在术后、术后1d、1周、2周、1月存在显著性差异,具有统计学意义(P<0.05);术后2月,3组右眼眼压差别无统计学意义(P>0.05)。结合线图和术后并发症的统计结果,烙闭3支上巩膜静脉组的眼压更加稳定,术后并发症少。结论烙闭3支上巩膜静脉可以建立一个更加稳定、持久、眼压相对高。

辅助切口与透明质酸钠在眼穿孔伤修复的应用

目的探讨在角巩膜穿孔伤修复手术中,采用角膜缘辅助切口加透明质酸钠的效果。方法138例(140眼)角巩膜穿孔伤修复手术中45例(45眼)伤口复杂及虹膜不易还纳者采用辅助切口加透明质酸钠的应用。结果45眼经此处理,大部分瞳孔圆形或接近圆形。4眼瞳孔撕裂散大,3眼虹膜部分缺损,所有患眼均未造成虹膜前粘连。结论此手术方法减少了虹膜恢复的困难及眼内组织损伤,增加了手术的安全性,减少了并发症。

隧道刀制作巩膜瓣的小梁咬切术临床观察

目的探讨改良的小梁切除术的优越性。方法应用隧道刀制作巩膜瓣并应用小梁咬切器对192眼青光眼施行小梁咬切术。结果本组每眼术程平均20分钟,较既往常规手术(平均34分钟)缩短43%,术后眼压控制良好。无术中、术后并发症。结论隧道刀及咬切器的使用可以安全、快速、有效地完成小梁切除术。

巩膜胶原交联术在近视中的研究进展

巩膜的扩张是近视发生、发展的中心环节。如果能对巩膜进行加固,就有望阻止巩膜的扩张,进而控制近视进展,并可能减少病理性近视相关并发症的发生,如后巩膜葡萄肿、脉络膜萎缩、视网膜裂孔及脱落、青光眼和眼内炎。巩膜的主要成分是胶原。胶原交联术可以改变胶原的变性温度、机械强度和抗蛋白降解能力等医学参数,从而增强巩膜抗扩张力。因此,胶原交联术在近视防控领域具有应用前景。本文对巩膜在近视中产生的变化特点,以及核黄素-紫外光、核黄素-蓝光和Tenon囊下注射化学剂交联巩膜胶原的技术干预近视的相关研究进展进行综述。

人眼巩膜成纤维细胞中视黄酸受体的分布及其对巩膜成纤维细胞的生长调控

目的研究正常人眼巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达，进一步研究视黄酸对人巩膜成纤维细胞的生长调控作用，从而阐明其和近视发生发展的关系。方法应用定点解剖及游走促进法分离培养人巩膜成纤维细胞，取3～5代生长良好的细胞，运用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测培养的巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达；在培养液中分别加入0．01、0．10、1．00、10．00和100．00nmol／L的视黄酸，6d后进行细胞计数。每株细胞重复3次，共用3株细胞，观察视黄酸对巩膜成纤维细胞的生长调控作用。结果培养的巩膜成纤维细胞呈双极型或纺锤型，平均分裂时间为2～3d左右，细胞生长旺盛，近融合时细胞成规则排列的纺锤型。RT—PCR提示体外培养的人巩膜成纤维细胞表达所有的视黄酸受体亚型。视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长，对细胞生长的抑制作用呈明显的剂量效应关系，RA浓度≥0．10nmol／L时，与无RA的对照组相比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论所有的视黄酸受体亚型在人巩膜成纤维细胞上均有分布，视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长。

不同波长单色光对豚鼠视网膜血管活性肠肽动态表达的影响

目的观察不同波长单色光对豚鼠眼球生长发育及视网膜血管活性肠肽(VIP)动态表达的影响,探讨可能的调节机制。设计实验性研究。研究对象1周龄英国种短毛三色雄性豚鼠36只。方法 36只豚鼠随机分为A、B、C三组,每组12只,A组饲养在红光环境中(610 nm),B组饲养在蓝光环境中(430 nm),C组为对照组饲养在混合白光中(光谱),光照度均为200 lux。分别在实验前和实验后3、6周测量豚鼠眼球屈光度(RX)和眼轴(AL)。并于各时点每组随机抽取4只摘取双侧眼球,获得巩膜干重,并制作视网膜连续切片10张,2张常规HE染色,2张用于对照,其余6张采用SP三步法进行免疫组织化学染色,在光学显微镜下摄像分析(高倍视野×400),计算每张切片高倍镜下阳性细胞数目,并采用北京航空航天大学的Cmias4.0病理图像分析系统软件对切片VIP阳性信号进行图像分析,表达强度用积分光密度(IOD)值表示。PBS缓冲液作为阴性对照,阳性对照取豚鼠小肠石蜡切片。主要指标屈光度、眼轴、巩膜干重、视网膜VIP阳性细胞计数以及VIP积分光密度值(IOD)。结果试验后6周,红光组、蓝光组及对照组豚鼠眼球屈光度分别为(2.696±0.171)D、(5.139±0.151)D和(3.161±0.122)D,(F=605.169,P=0.000);各组眼轴分别为(8.273±0.165)mm、(8.019±0.151)mm和(8.161±0.120)mm,(F=6.009,P=0.009);各组巩膜干重分别为(0.609±0.088)mg、(0.716±0.101)mg和(0.680±0.041)mg,(F=2.292,P=0.126),但红光组与蓝光组相比,差异有统计学意义(F=1.256,P=0.048)。VIP在豚鼠视网膜内丛状层、神经节细胞层及神经纤维层强表达,在内核层、光感受器细胞层散在表达。与对照组相比,红光组视网膜VIP表达最高,阳性细胞计数43.250±9.939,IOD值1.622±0.119;蓝光组视网膜VIP表达最低,阳性细胞计数27.500±4.928,IOD值1.273±0.127,三组差异有显著统计学意义(F=8.478,15.082;P=0.002,0.000)。结论长波长红光诱导近视形成,短波长蓝光起抑制作用。VIP可能通过影响巩膜形态功能参与单色光对眼球生长发育的调节,是长波长红光近视诱导过程中的调控分子,但具体的信号通路有待于进一步探讨。

核黄素/紫外线A诱导的胶原交联对兔和人巩膜生物力学性能的影响

目的 比较兔和人巩膜核黄素/紫外线A交联前后的生物力学性能.方法 实验研究.取8只成年新西兰大白兔和8只新鲜离体成人眼,沿矢状位方向平均分为两半,一半作为对照,一半作交联试件.交联的参数设置：0.1％核黄素溶液滴眼,每3 min 1次,共5次;紫外线波长365 nm;能量密度3 mW/cm2;照射时间40 min.生物力学测试指标：极限应力、8％应变条件下的应力和弹性模量.应用t检验对交联前后的生物力学指标进行统计分析.结果 8％应变时兔和人巩膜应力分别为（359±305）kPa和（1 079±646）kPa;极限应力分别为（3 830±2 870）kPa和（4450±1 120）kPa;弹性模量分别为（4 460±4090）kPa和（14 310±8 560）kPa.交联后兔巩膜在应力、极限应力和弹性模量上均有显著性提高（t=3.07、3.50、3.04,P＜0.05）;而人巩膜交联前后的生物力学指标差异均无统计学意义.结论 人巩膜生物力学性能高于兔;胶原交联可显著增加兔巩膜生物力学性能,而在相同条件下人巩膜交联前后生物力学强度无改变.

异体巩膜植入联合“Z”形皮瓣治疗陈旧性外伤性下睑退缩

目的探讨异体巩膜植入联合“Z”形皮瓣治疗陈旧性外伤性下睑退缩的临床疗效。方法伤后5—14个月用异体巩膜植入联合“Z”形皮瓣治疗12例（12眼）陈旧性外伤性下睑退缩，术后自静脉及滴眼途径给予抗感染抗炎治疗。结果术后随访8—12个月，9眼单次手术后获得良好的外观和功能恢复，1眼经2次手术后获得满意的外观和功能，另2眼（16．67％）单次手术后效果不佳但未再手术治疗。结论异体巩膜植入联合“Z”形皮瓣是治疗陈旧性外伤性下睑退缩的一种有效方法。

转位皮瓣联合异体巩膜植入治疗外伤性下睑缺损

目的探讨不同转位皮瓣联合异体巩膜植入在外伤性下睑缺损的临床效果。方法选择因外伤致下睑全层缺损程度大于1／2，导致眼睑闭合不全，下睑呈退缩状态〉2mm的8例，采用不同部位的转位皮瓣代替下睑前层，异体巩膜植入和分离的残留穹窿结膜代替下睑后层，从而矫正缺损的下睑。结果随访12～24个月，全部病例异体巩膜血管化，无溶解和排斥现象，皮肤活性好，下睑缘位于角膜下缘或稍高，无巩膜暴露，1例轻度下睑外翻，外观形态基本正常。结论对于外伤所致大于1／2的下睑全层缺损，异体巩膜植入联合转位皮瓣治疗是一种有效方法。