基于Sema3A/NRP-1/PlexinA体系探讨温阳通络方拮抗类风湿关节炎嗜神经侵袭的机制

目的:本研究拟通过复制胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,探讨温阳通络方干预类风湿关节炎(rheumatoid athritis,RA)关节病变进程中Sema3A/NRP-1/PlexinA体系相关的嗜神经侵袭病理机制,旨在寻找一个全新的RA治疗靶点。方法:将DBA小鼠随机分为空白组,模型组,甲氨蝶呤组(10 mg·kg^-1),温阳通络方低、中、高剂量(2.0 g·kg^-1、4.0 g·kg^-1、8.0 g·kg^-1)组,每组5只。采用Western Blot、RT-PCR法检测滑膜组织中信号素(Sema3A)/神经纤毛蛋白-1(NRP-1)/神经丛素(PlexinA)体系的蛋白及其mRNA的表达情况。体外培养滑膜细胞,将细胞分为空白组、脂多糖(lipoposaccharide,LPS)组、温阳通络方组、LPS加温阳通络方组,用流式细胞术检测各组滑膜细胞凋亡情况。结果:温阳通络方可明显升高PlexinA、Sema3A、NRP-1的蛋白及其基因表达水平,同时可抑制滑膜细胞增殖,实现细胞凋亡的发生。结论:温阳通络方可有效增强Sema3A/NRP-1/PlexinA体系的表达,抑制滑膜增殖。

SEMA 3A及其受体NRP-1及Plexin A1在口腔癌中的表达及其可能的作用

目的研究Semaphorin3A(SEMA3A)及其受体Neuropilin1(NRP1)和PlexinA1在口腔癌组织和细胞(ACC2,ACCM和TCa)中的表达情况,并推测其在口腔癌生成中的可能意义。方法应用RT-PCR和Western bloting以及免疫组织化学方法检测SEMA3A、NRP-1及Plexin A1在口腔癌(ACC2,ACCM和TCa)组织和细胞中的表达情况。结果在所有口腔癌组织和癌细胞中均可检测到NRP-1和Plexin A1的表达,但SEMA3A相对表达较弱。Western bloting、RT-PCR提示NRP-1,Plexin A1呈高表达,而SEMA3A表达较低。在免疫组织化学中显示癌及癌周组织中NRP-1均呈高表达,且癌巢中的表达明显高于癌间隙组织,SEMA3A呈较弱表达。结论三种不同头颈肿瘤及细胞系中NRP-1,Plexin A1表达均较高,提示在肿瘤的发展进程中,Plexin A1可能对肿瘤本身的发生,增殖及肿瘤的血管生成均可能起到了重要的作用,这种作用通过其它的Semaphorin家族成员实现。

SEMA 3A及其受体NRP-1在大鼠切牙中的表达和意义

目的:研究脑信号蛋白3A(Semaphorin3A,SEMA3A)及其受体神经毡蛋白-1(Neuropilin-1,NRP-1)在大鼠切牙的成釉细胞、成牙本质细胞及牙周膜中的定位表达,并探究其在大鼠牙齿发育中的可能意义。方法:取6周龄Wistar大鼠的下颌骨常规脱钙、梯度乙醇脱水、石蜡包埋,沿颊舌向切片后分别进行HE和免疫组化染色;显微镜下观察Sema3a、Nrp-1在各组成细胞中的表达、分布。结果:在分泌期成釉细胞和成牙本质细胞中Sema3a、Nrp-1均呈阳性表达;在牙周膜细胞中Sema3a呈阳性表达,而Nrp-1的表达为阴性。结论:SEMA3A、NRP-1可能在牙齿硬组织发育中具有重要的意义。

强化训练对局灶性脑缺血大鼠信号素3a及其受体神经纤毛蛋白-1 mRNA表达的影响

目的:观察不同强度的游泳训练对局灶性脑缺血大鼠Sema3a及其受体神经纤毛蛋白(NRP-1)mRNA表达的影响;探讨强化游泳训练对局灶性脑缺血大鼠的神经保护机制。方法:采用线栓法建立左侧大脑中动脉阻塞2h再灌注动物模型。60只造模成功的雄性SD大鼠随机分为训练1组、训练2组、训练3组和对照组,每组15只。训练1组大鼠每天游泳1次,每次5min;训练2组大鼠每天游泳1次,每次10min;训练3组大鼠每天游泳2次,每次10min;对照组大鼠不做任何训练。另取15只大鼠为假手术组,不阻塞大脑中动脉血流,不做任何训练。以上5组大鼠又随机分为术后3d、7d、14d3个时相点,每个时相点5只大鼠。采用Za-usinger评分法评价神经功能缺损情况。应用RT-PCR测定缺血侧大脑皮质Sema3a和NRP-1的mRNA表达量。结果:假手术组神经功能正常。对照组各时相点的神经功能评分与假手术组同时相点相比,差异均有显著性意义(P<0.05);各训练组训练3d、7d、14d后的神经功能改善情况优于同时相点对照组(P<0.05),训练3组受损神经功能改善最明显,其训练3、7、14d后Zausinger神经功能评分分别为(2.40±0.55)、(3.40±0.55)和(4.20±0.84)。训练1、2、3组各时相点Sema3a和NRP-1的mRNA表达量明显低于对照组同时相点(P<0.05),且训练3组Sema3a和NRP-1的mRNA表达量降低较其他各训练组更明显,其训练3、7、14d后,Sema3a与GAPDH的mRNA表达水平之比分别为(0.62±0.06)、(0.53±0.10)和(0.42±0.06),NRP-1与GAPDH的mRNA表达水平之比分别为(0.64±0.13)、(0.53±0.08)和(0.38±0.10)。结论:运动训练可以减少脑缺血再灌注大鼠Sema3a和NRP-1的mRNA表达量,从而恢复受损神经功能;强化运动训练能够取得更好的效果。

Sema 3A及其受体在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的检测Sema 3A及其受体在子宫内膜异位症中的表达,探讨Sema 3A及其受体在子宫内膜异位症的发生和发展中的意义。方法收集2013年1月1日至12月31日在中山大学附属第一医院妇科住院并行手术治疗的腹膜子宫内膜异位症(PEM)患者24例、卵巢子宫内膜异位囊肿(OEM)患者24例和结直肠子宫内膜异位症(CREM)患者20例,采用免疫组化SP法检测异位病灶腺上皮细胞中Sema 3A、Plexin A1和NRP-1的表达,并与26例非子宫内膜异位症患者在位内膜(Eu E-NEM)、22例子宫内膜异位症患者在位内膜(Eu E-EM)中的表达进行比较。结果Sema 3A在Eu E-EM组腺上皮细胞中的表达比Eu E-NEM组腺上皮细胞中的表达高(309.09±66.61、207.69±56.02),差异有统计学意义(P<0.01)。PEM、OEM、CREM的异位病灶腺上皮细胞之间的Sema 3A、Plexin A1、NRP-1的免疫组织化学HSCORE评分差异均无统计学意义(P>0.05)。PEM组、OEM组、CREM组中异位病灶腺上皮细胞中的Sema3A、Plexin A1、NRP-1的表达均比内膜异位症患者组的在位内膜和非内膜异位症患者组的在位内膜腺上皮细胞中的表达高(P值均<0.05)。结论 Sema 3A及其受体在不同类型内膜异位症病灶腺上皮细胞中的表达增高,提示其高表达可能参与了子宫内膜异位症的发生发展。