沙苑子多糖的提取纯化与结构解析

通过水提醇沉法制备沙苑子精多糖(记为SACP),再通过乙醇分级沉淀法分离出纯度较高的主要多糖组分(SACP-25)。采用比色法测定各组分多糖的理化性质,再应用尺寸排阻色谱-多角度光散射联用仪和离子色谱分别测定多糖的分子质量分布、溶液构象和单糖组成,结果表明:SACP-25是高纯度的均一多糖组分,总糖含量为87.40%,主要由半乳糖(42.92%)和甘露糖(57.08%)组成,在0.1 mol/L NaNO_(3)溶液中呈无规则线团链。甲基化分析与核磁共振结果表明,SACP-25的主链由β-1,4-糖苷键连接的吡喃型甘露糖组成,末端吡喃型半乳糖通过α-1,6-糖苷键形成侧链。本研究发现沙苑子可以作为半乳甘露聚糖这一水溶性膳食纤维较好的天然来源,为多糖结构有序性理论提供数据支撑,同时也为沙苑子多糖在功能性食品和医药领域的开发和应用提供一定理论依据。

HPLC测定沙苑子中沙苑子苷A的含量

目的:建立沙苑子中沙苑子苷A的含量测定方法。方法:运用高效液相色谱法测定。色谱柱为ZOR BAXEXTEND C18(4. 6mm×2 5 0mm ,5 μm) ,流动相乙腈水 磷酸(2 0∶80∶0 .2 ) ,测定波长2 6 7nm。结果:沙苑子苷A在0 . 0 86～0 . 4 30 μg呈良好的线性关系,加样回收率为99 .8% ,RSD 1. 0 %。结论:本法灵敏、快速、准确,可用于测定沙苑子中沙苑子苷A的含量。

沙苑子提取物中多酚含量的测定

研究Folin-Ciocalteu比色法测定沙苑子中多酚含量的优化条件,并以优化的条件测定沙苑子不同溶剂提取物中多酚的含量。结果表明:Folin-Ciocalteu显色剂(经稀释10倍)用量1.00mL、7.5g/100mLNa2CO3用量3.00mL、反应温度25℃、反应时间120min、测定波长647nm为沙苑子中多酚含量测定的最佳条件,所用没食子酸标准品在10～100μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系(y=0.0081x-0.0249,R2=0.9996);沙苑子甲醇、乙醇和丙酮溶液提取物的质量浓度为1g/100mL左右时较适合测定其多酚的含量。

沙苑子黄酮抗肝癌生长作用及对免疫功能的影响

目的:探讨中药提取物沙苑子黄酮(flavonoids extracts fromsemen Astragali complanati,FAC)对小鼠肝癌H22细胞生长的影响及其机制。方法:建立H22荷瘤小鼠模型,观察FAC对H22肝癌移植瘤生长的抑制作用及其对荷瘤小鼠免疫器官、巨噬细胞吞噬功能、淋巴细胞转化功能及生存期的影响。结果:高、中、低剂量组FAC对荷瘤小鼠肝癌细胞生长具有显著抑制作用,与正常对照模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05);其中环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对照组的抑瘤率与FAC高剂量组相近(P>0.05)。FAC可以明显延长荷瘤小鼠的存活期,高、中、低剂量组的生命延长率分别为64.9%、56.7%和28.1%,与CTX对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。另外,高、中、低剂量组FAC明显提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数,与正常对照模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05);且高、中剂量组能显著提高巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞转化能力,与正常对照模型组比较差异具有统计学意义(P<0.01);而CTX的作用方向相反,与正常对照模型组比较差异也具有统计学意义(P<0.01)。结论:FAC可抑制肝癌H22细胞生长,延长荷瘤小鼠存活期,并能提高荷瘤小鼠的非特异性免疫功能。FAC可能通过调节机体免疫功能来发挥抗肿瘤作用。

沙苑子酚类提取物的抗氧化能力研究

为有效开发利用沙苑子,探究其抗氧化特性为深加工提供理论依据和经验参数,本文主要从沙苑子酚类提取物的总还原能力,对超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除能力,及对Fe2+诱导的脂质过氧化的抑制作用等四个方面进行了研究并比较了三种不同沙苑子酚类提取物的抗氧化性能。结果表明沙苑子酚类提取物均具有一定的抗氧化能力,在实验浓度范围内呈现一定的量效关系。

沙苑子提取物调脂和保肝作用的实验研究

目的 :观察沙苑子提取物A和B的调脂和保肝作用。方法 :将雄性大鼠给脂肪乳剂造成高脂模型 ,在连续给予沙苑子提取物 2 0d后 ,观察血清中TC、TG、LDL C、HDL C和肝重量系数的变化。雄性小鼠给沙苑子提取物 14d后腹腔注射 0 0 7%四氯化碳 0 1ml 10g ,然后观察血清中ALT和AST的变化。结果 :给予沙苑子提取物A和B后 ,均可降低高血脂大鼠血清TC、TG和LDL C ,升高LDL C ,四氯化碳肝损小鼠的血清ALT和AST也均明显下降。结论 :沙苑子提取物A和B均具有明显的调脂和保肝作用。

沙苑子黄酮类化合物的响应面法优化提取及其清除DPPH自由基能力

为了获得沙苑子黄酮类化合物的有效提取工艺参数,在单因素试验基础上选取液料比、提取温度、沙苑子粒度、提取时间作为试验因素,以提取物的吸光度为响应值,采用响应面法对提取工艺参数进行优化,并对优化条件下的提取物进行清除DPPH自由基能力研究。结果表明:60%甲醇是有效的提取剂;最佳工艺参数为粒度120目,温度42℃,提取时间47 min,液料比30∶1,该条件下沙苑子黄酮类物质的粗提率为10.66%;提取物具有一定的清除DPPH自由基效果,低浓度条件下呈现良好的量效关系,浓度为2%时清除率最高。

D301树脂对沙苑子酚类物质的吸附动力学研究

本文以D301树脂对沙苑子甲醇粗提物中酚类物质的吸附特性为研究内容,具体分析了D301树脂的静态吸附动力学、吸附等温线、吸附热力学性质和动态吸附参数,并用所优化的条件对沙苑子甲醇粗提物中酚类物质进行了纯化。结果表明,在静态吸附实验条件下,D301树脂对沙苑子酚类物质的吸附是吸热过程,等温线略向上凸起属具有物理吸附特性的优惠吸附类型,吸附参数能用Freundlich方程较好拟合,相关系数均大于0.99;动态吸附研究表明,用70%的乙醇作为洗脱剂即可获得较高的解吸率;提取物上样浓度在13.5 mg/mL、流速为2.0 mL/min时有利于吸附且能使吸附很快达到平衡;经D301树脂吸附纯化处理后,粗提物中总酚含量由10.2%提高到34.3%是原来的近3.4倍。本研究表明,可以用D301树脂对沙苑子酚类物质进行较好的纯化。

响应面法优化沙苑子中黄酮类化合物超声辅助提取工艺

为了获得沙苑子黄酮类化合物的最佳提取工艺参数,选取液料比、超声温度、沙苑子粒度、超声时间作为实验因素,以提取物的吸光度为响应值,采用响应面实验设计法对工艺参数进行优化。结果表明:沙苑子黄酮类丙酮提取物在323nm处有最大吸光值;60%丙酮为最佳提取剂;最佳工艺参数为粒度120目,超声温度50℃,超声时间60min,液料比40:1(mL/g),粗提率为16.19%。环境扫描电镜显示,超声处理后沙苑子粉的表面出现了蜂窝状形貌图,从而促使胞内物质溶出,提高了提取率。

高效液相色谱法测定沙苑子及其炮制品中沙苑子苷的含量

目的建立沙苑子中沙苑子苷的含量测定方法,考察沙苑子炮制前后沙苑子苷的含量变化。方法采用高效液相色谱法,Apollo-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(21∶79)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长为266nm。结果沙苑子苷在0.0416～0.6656μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为100.6%,RSD=0.73%。结论本法简便、准确、重复性好、专属性强,为沙苑子药材质量控制提供了方法。盐炙可导致沙苑子中沙苑子苷含量下降。

不同地区商品沙苑子中沙苑子苷A的含量比较

目的:以沙苑子苷 A 为指标,对不同地区商品沙苑子进行含量测定及质量评价。方法:运用高效液相色谱法,采用 Hy-persil ODS 2(5 μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,以乙腈-水-磷酸(20:80:0.2)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长为267 nm,测定不同地区市售沙苑子样品中沙苑子苷 A 的含量。结果:各地市售沙苑子的植物来源不同,沙苑子苷 A 的含量差异较大。结论:正品中以陕西渭南所售沙苑子中沙苑子苷 A 含量最高,与我国古代确认的道地药材相吻合;不同地区沙苑子中沙苑子苷 A 含量可作为药材质量评价的一项指标,该方法灵敏、准确。

沙苑子的HPCE指纹图谱鉴别

目的建立沙苑子HPCE指纹图谱鉴别方法。方法用高效毛细管电泳法测定沙苑子的指纹图谱,并作相似度比较分析。结果沙苑子不同样品指纹图谱相似度较好,而沙苑子和草沙苑的指纹图谱有明显区别。结论HPCE指纹图谱具有重现性好,特征性强,方法简便等特点,可用于沙苑子类药材的鉴别。

脱脂沙苑子乙醇提取物的体外抗氧化活性研究

通过测定脱脂沙苑子乙醇提取物(ESA)对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH.)、超氧阴离子自由基(O2.-)和羟基自由基(.OH)的清除能力、对Fe2+诱导的脂质过氧化反应的抑制作用、还原力和总抗氧化力,评价ESA的体外抗氧化活性,并与公认的抗氧化剂维生素C作了对照.结果表明,ESA有一定的DPPH.清除能力(IC50=419.1μg/mL)、较强的超氧阴离子清除能力(IC50=117.9μg/mL)和羟基自由基清除能力(IC50=224.4μg/mL),能有效的抑制脂质过氧化(IC50=1.70 mg/mL),有良好的总抗氧化力,说明沙苑子具有明显的抗氧化活性.

沙苑子对运动性疲劳大鼠血清BCAA、AAA的影响

分析中药沙苑子对运动性疲劳模型大鼠血清支链氨基酸（branched-chain amino acid,BCAA）及芳香族氨基酸（aromatic amino acid,AAA）的影响,为沙苑子作为运动保健品的开发利用提供实验依据.选用SD（Sprague Dawley,SD）雄性大鼠24只,体重190-230 g,随机分为安静对照组、一般训练组、强化训练组、强化加药组（各6只）,进行7周递增负荷跑台运动建立运动性疲劳大鼠模型,于第8周始运动即刻后取材,运用氨基酸自动分析仪测定大鼠血清游离氨基酸含量.结果表明,长时间耐力跑台运动应激使大鼠血清BCAA含量有所下降,AAA尤其是游离色氨酸（free-tryptophan,f-Trp）含量上升,沙苑子可抑制BCAA下降、AAA上升趋势;长时间耐力跑台运动使实验大鼠血清f-Trp/BCAA、AAA/BCAA显著增加,运动过程中血中蛋白质代谢增强,BCAA大量分解供能,AAA相对增多,从而使f-Trp/BCAA、AAA/BCAA增高.沙苑子可以抑制f-Trp/BCAA、AAA/BCAA上升,且对强化训练引起的f-Trp/BCAA、AAA/BCAA升高有显著的降低作用.沙苑子可促进强化训练大鼠AAA的消除,利于脑中AAA与BCAA间的平衡,改善机体对运动疲劳的适应能力,有利于推迟疲劳的发生.

沙苑子苷A对脂肪变L02细胞中三酰甘油水解及炎症介质的影响

目的:研究沙苑子苷A对脂肪变L02细胞的降脂效果和作用机制。方法:采用游离脂肪酸(FFA)诱导肝L02细胞脂肪变性,分为对照组、模型组、沙苑子苷A低剂量、中剂量、高剂量组(1μmol/L、10μmol/L、50μmol/L),流式细胞仪检测细胞凋亡和脂肪堆积,按照试剂盒检测三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平,实时荧光定量PCR(qPCR)检测三酰甘油水解酶(ATGL)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA的表达,蛋白质印迹法(Western Blotting)检测ATGL、PPAR-α、PPARγ、TNF-α、IL-6蛋白的表达。结果:沙苑子苷A能显著减少脂肪堆积,降低TG、TC、MDA含量,增加SOD活性,降低细胞凋亡率,减轻脂毒性造成的肝细胞损伤,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);沙苑子苷A能升高ATGL、PPAR-α、PPARγmRNA和蛋白的表达,同时降低TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白的表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:沙苑子苷A可能通过上调PPARα、PPARγ的表达,使ATGL表达增加,促进肝脏TG的水解,减少肝脏脂肪的沉积,缓解氧化应激,抑制TNF-α和IL-6的分泌,减轻炎症反应,从而恢复肝细胞的正常功能。

沙苑子的生理功能评价研究进展

沙苑子是陕西正宗道地的中草药之一。目前,沙苑子良好的保健功能已引起研究人员的注意。沙苑子的化学成分与其药理作用有密切的关系。该研究对国内外沙苑子药理作用的研究工作尤其是与保健相关的功效如沙苑子的毒性评价、对心脑血管系统的影响抗炎作用等进行全面的归纳和总结,同时展望其研究方向。

沙苑子对耐力训练大鼠不同组织NO含量及血清酶活性影响的研究

目的探讨沙苑子对大强度耐力训练大鼠不同组织中NO含量和血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性的影响,为沙苑子作为运动补剂提供理论依据。方法选取24只大鼠,随机分为安静组、训练组和训练加沙苑子组。训练组与训练加沙苑子组按照训练模型进行为期6周的耐力训练,最后一次训练进行一次力竭性运动,力竭后取不同组织和血并进行样本处理。结果与安静组比较,训练力竭组大鼠不同组织NO含量较显著升高(P<0.01),血清ALT、AST、LDH和CK活性显著升高(P<0.01);与训练力竭组比较,沙苑子组大鼠不同组织NO含量较显著升高(P<0.05),血清ALT、AST、LDH和CK活性有较显著下降(P<0.05)。结论沙苑子可以使运动训练大鼠不同组织中NO的含量升高,有效保护NOS活性;显著降低运动训练和力竭运动造成的大鼠血清酶活性过度升高,从而提高大鼠的运动能力,延缓运动疲劳的产生。

HS-SPME-GC-MS联用分析沙苑子中挥发性成分

目的:分析沙苑子中挥发性成分的化学组成。方法:采用顶空固相微萃取法(HS-SPME)萃取沙苑子中挥发性成分,并用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对沙苑子的挥发性成分进行分析。结果:从沙苑子中共分离出51个色谱峰,鉴定出其中25种化合物,占总量的78.85%。其中主要成分为L-乙酸龙脑酯(14.10%)、樟脑(5.98%)、右旋龙脑(4.27%)等。结论:首次采用HS-SPME-GC-MS联用技术分析沙苑子挥发性成分,为沙苑子的进一步开发利用提供了科学依据。

沙苑子总黄酮和百草酸的体内外抗肿瘤作用

目的观察沙苑子总黄酮和百草酸的体内外的抗肿瘤作用。方法 110只接种S180肉瘤腹水昆明鼠随机分为模型组、环磷酰胺组、羟基喜树碱组、沙苑子总黄酮组和百草酸组,MTT法观察沙苑子总黄酮和熊果酸对S180肉瘤和人结肠癌细胞SW620的体外抑制作用,RT-PCR法测定百草酸对凋亡基因Bax、Bcl-2及P53的mRNA表达。结果沙苑子总黄酮和百草酸对S180肉瘤小鼠均有抑制作用,百草酸的抑制作用更加明显。两者对胸腺和脾脏均无明显抑制作用;沙苑子总黄酮对人结肠癌细胞SW620无明显抑制作用,而熊果酸却能明显的抑制该肿瘤细胞;熊果酸显著上调促凋亡基因P53和Bax的表达,下调抑凋亡基因Bcl-2的表达。结论百草酸在体内和体外均有抗肿瘤作用,沙苑子总黄酮的抗肿瘤作用尚需进一步研究。

中药沙苑子对运动性疲劳大鼠脑组织5-HT及其相关代谢物的影响

目的:通过观察中药沙苑子对运动性疲劳模型大鼠海马、间脑5-HT及其相关代谢物的影响,为沙苑子作为运动保健品的开发利用提供实验依据。方法:采用SD雄性大鼠24只,体重190g～230g,随机分为安静对照组6只、一般训练组6只、强化训练组6只、强化加药组6只,进行7周递增负荷跑台运动建立运动性疲劳大鼠模型,于第8周始运动后即刻取材,运用氨基酸自动分析仪测定大鼠脑组织Trp含量,运用高效液相色谱荧光检测海马、间脑5-HTP、5-HT、5-HIAA含量。结果:1)实验大鼠海马、间脑组织Trp、5-HTP、5-HT含量在耐力跑台运动后增加;随着强度的加大和时间的延长,Trp、5-HTP、5-HT含量增加更为明显,进而加重疲劳程度,沙苑子组大鼠Trp、5-HTP、5-HT含量均显著下降;2)长时间耐力跑台运动后,实验大鼠海马和间脑5-HIAA含量虽高于安静状态和一般训练状态,但未见显著性差异,沙苑子可增强5-HIAA含量的升高。结论:运动可使机体5-HT代谢显著加强,尤其是在长时间大强度运动刺激后,中药沙苑子可通过抑制其合成前体,有效加速5-HT的分解,减少5-HT的积聚,既可推迟运动疲劳的发生,又可及时消除疲劳。