Identification and determination of (+)-sesamin in Semen Cuscutae by capillary GC and GC-MS

(+)-Sesamin was found in Semen Cuscutae for the first time. A rapid and simple approach for the analysis of(+)-sesamin in different sources of Semen Cuscutae is proposed, which used GC-FID for the determination of(+)-sesamin and CC-MS for its identification. The result suggested that this approach could be used to identify Semen Cuscutae from various sources based on the different content of(+)-sesamin in them.

Research Progress on Chemical Constituents and Pharmacological Effect of Semen Cuscutae

In this paper,by summarizing the literature in recent years,it is considered that the chemical constituents of S.cuscutae are mainly flavonoids.The main pharmacological effects include improving osteoporosis,improving ovarian function,improving drug-induced reproductive toxicity,regulating spermatogenic cell apoptosis,resisting liver fibrosis,resisting inflammation,improving cardiovascular function,protecting fetus,protecting synapses and so on.By summarizing the chemical constituents and pharmacological effects of S.cuscutae,this study aims to better study the mechanism of anti-osteoporosis based on the fact that S.cuscutae has the function of tonifying liver and kidney.

A Textual Research on Materia Medica of Origin of Orthonym and Synonym of Cuscutae Semen

A textual research on materia medica of origin of orthonym and synonym of Cuscutae Semen and synonym of Nu Luo was conducted in this study,and the trade name,regional synonym and nickname of Cuscutae Semen were reviewed.The records of orthonym and synonym of Cuscutae Semen in the past dynasties,and the first published literature and writing date of orthodox and synonym were summarized.The textual research showed that Nu Luo and Cuscutae Semen were not the same plant,which had positive significance for the identification of the origin and modern application of Cuscutae Semen.

基于网络药理学与分子对接探讨山茱萸-菟丝子治疗认知障碍的作用机制

目的 利用网络药理学和分子对接方法探讨山茱萸-菟丝子治疗认知障碍的潜在作用机制。方法 利用TCMSP筛选山茱萸、菟丝子活性成分,并预测潜在靶点,从UniProt数据库获得药物成分对应靶点,通过TTD、GeneCards和OMIM数据库获取认知障碍相关靶点,利用R4.2.2软件获取山茱萸-菟丝子与认知障碍的共同靶点。利用Cytoscape3.7.2软件构建“药物-活性成分-靶点”网络,通过STRING11.5数据库构建共有靶点蛋白相互作用网络,利用R4.2.2软件进行GO功能及KEGG通路富集分析,利用AutoDock1.5.6、PyMoL2.4.0软件进行分子对接验证。结果 经过筛选共得到30个药物活性成分,184个药物-疾病交集靶点,通过GO功能和KEGG通路富集分析得到2 678个GO条目和179条信号通路。共同靶点的通路富集分析显示主要与PI3K-Akt、HIF-1α/VEGF等信号通路相关,分子对接结果显示,认知障碍核心靶点与山茱萸-菟丝子主要成分亲和力较好,可能有效自由结合。结论 山茱萸-菟丝子中槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、异鼠李素、豆甾醇、四氢鸭脚木碱等成分可能通过抗氧化应激、抗炎及免疫调节、糖脂调节等作用治疗认知障碍。

菟丝子盐炙前后对肾阳虚模型大鼠精子活力的影响

本文旨在研究菟丝子盐炙前后对肾阳虚大鼠精子活力的影响。本研究采用肌注氢化可的松的方法建立大鼠肾阳虚模型,分别用菟丝子生品、盐炙品、市售盐菟丝子的水提液以及金匮肾气丸对肾阳虚大鼠灌胃14 d,记录大鼠睾丸、附睾等脏器指数,精子密度及精子活力,观察睾丸组织病理切片,测定血清睾酮(T)水平及睾丸匀浆中酸性磷酸酯酶(ACP)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平。结果表明,与模型组比较,菟丝子盐炙品、市售品和生品水提液均可提高模型大鼠的精子活力,降低睾丸、附睾指数,改善生精小管稀少、各级生精细胞的病理症状,盐炙组睾酮、ACP、SDH、T-T-SOD、GSH平均值高于市售组和生品组,MDA低于市售组和生品组。菟丝子生品及盐炙品水提液可通过影响精子生成的酶以及抗氧化应激反应,改善氢化可的松致肾阳虚大鼠的精子活力,其中盐炙品效果更好。本研究初步探讨了盐菟丝子的炮制机理,为炮制的科学性提供了进一步的理论支撑。

菟丝子治疗骨关节炎:网络药理学分析及实验验证

背景:菟丝子具有补肝肾、益精髓的功效,而骨关节炎的主要病机为肝肾亏虚,推测菟丝子与骨关节炎之间有一定的联系。目的:基于网络药理学和分子对接的分析手段挖掘骨关节炎和菟丝子之间的潜在联系,对中药本草菟丝子的作用机制进行合理的推测与验证。方法:先在中草药数据库TCMSP中筛选菟丝子的有效活性成分和作用靶点,另在疾病数据库GeneCards、OMIM、TTD中收集骨关节炎的相关基因;取交集后进行一系列分析,并筛选出核心基因;通过对核心基因的富集分析选择菟丝子作用于骨关节炎的通路,通过分子对接验证核心基因的作用,并依此选择合适的有效活性成分进行实验验证。结果与结论:①筛选出11种菟丝子的有效活性成分,菟丝子和骨关节炎有66个交集靶点基因,后续筛选出12个核心基因,包括肿瘤坏死因子、白细胞介素1B、TP53、RACα丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、血管内皮生长因子A、基质金属蛋白酶9、前列腺素过氧合酶2、胱天蛋白酶3、表皮生长因子、过氧化物酶体增生激活受体γ、白细胞介素10、血管细胞黏附因子1;②对核心基因进行富集分析后,选择经典炎症通路核因子κB信号通路进行后续菟丝子缓解骨关节炎炎症的分析验证;根据各活性成分和通路核心基因前列腺素过氧合酶2进行分子对接后得到的结果,选择亲和力最高的芝麻素进行后续细胞实验验证,结果证实了菟丝子的有效成分芝麻素可以通过抑制白细胞介素1β诱导的核因子κB信号通路降低环氧合酶2的表达;③结果表明,菟丝子的活性有效成分芝麻素通过抑制白细胞介素1β诱导的核因子κB信号通路降低环氧合酶2的表达,达到改善骨关节炎炎症的作用,证实了菟丝子在骨关节炎方面的治疗效果。

菟丝子乙醇提取物灌胃对大鼠绝经后骨质疏松症的改善作用及其机制

目的观察菟丝子乙醇提取物灌胃对大鼠绝经后骨质疏松症的改善作用并探讨其机制。方法雌性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组,每组10只。除正常组、假手术组外,各组均采用双侧去卵巢手术建立大鼠绝经后骨质疏松症模型;假手术组在暴露卵巢后切除卵巢周围脂肪组织,不切除卵巢;正常组正常喂养不做任何处理。于建模后两周起开始给药,菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组分别按0.7 g/kg、1.4 g/kg给予菟丝子乙醇提取物灌胃,雌激素对照组给予非甾体雌激素己烯雌酚灌胃,正常组、假手术组及模型组给予等容积生理盐水灌胃,连续给药12周。采用双能X线检测大鼠股骨骨密度,HE染色观察股骨组织病理形态,RT-PCR法检测股骨组织miR-21-5p,Western blotting法检测股骨组织Fas配体(FasL)蛋白。结果模型组股骨骨密度小于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组股骨骨密度大于模型组(P均<0.05)。正常组及假手术组骨皮质骨膜及骨内膜光滑,骨小梁形态粗细基本一致,皮质区仅出现轻微的松质骨改变;模型组骨小梁明显变薄,间隔增宽,互不相连,排列不齐,皮质区出现严重的松质骨改变;雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组骨小梁间距较模型组均有不同程度的减小,且皮质区松质骨改变变轻。模型组股骨组织miR-21-5p表达高于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组miR-21-5p表达低于模型组(P均<0.05)。模型组股骨组织FasL蛋白表达低于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组FasL蛋白表达高于模型组(P均<0.05)。结论菟丝子乙醇提取物灌胃对大鼠绝经后骨质疏松症具有改善作用,其机制可能与调控miR-21-5p及其下游蛋白FasL有关。

基于《中华医典》的驻景丸文献学分析

目的整理《中华医典》中驻景丸的组成、主治和功效。方法纳入《中华医典》收录的医学古籍中含驻景丸及其相关内容的条文,对中药名称进行规范化处理后,将处方名称、药物组成、主治、功效和出处录入Excel 2016软件建立数据库,而后进行分析。结果(1)一般情况:共检索出古籍24部,涉及条文30条,其中含驻景丸26条,驻景圆2条,驻京丸、车前子丸各1条。(2)药物组成:共得到15个驻景丸处方,均以菟丝子和车前子为核心药物。(3)主治功效:主治病症主要有肝肾俱虚、眼常昏暗、多见黑花、视物不明、迎风有泪等;功效主要为补肝肾、明目。结论不同古籍文献中驻景丸的药物组成及剂量各异,菟丝子、车前子药物组合是驻景丸方核心药对,熟地黄是重要组成药物,主要治疗以肝肾不足为主的目昏暗等内障眼病。

基于正交试验设计-组合赋权TOPSIS法的菟丝子酒炙工艺优化

目的:优选菟丝子酒炙炮制工艺,为规范酒菟丝子炮制工艺提供参考。方法:基于L9(34)正交试验设计,以饮片外观性状、金丝桃苷含量、总黄酮含量、醇溶性浸出物含量为指标,以加酒量(A)、闷润时间(B)、炒制温度(C)、炒制时间(D)为考察因素,采用层次分析法(AHP)结合熵权法的组合赋权方式计算综合评分,利用逼近理想解排序(TOPSIS)模型筛选出酒菟丝子炮制的最佳工艺参数并进行工艺验证。结果:筛选出最优炮制工艺为生药材加10%黄酒,闷润6 h,炒炙温度为300℃,炒炙10 min。结论:运用正交试验设计-组合赋权TOPSIS法优选菟丝子酒炙工艺,结果简便、准确、可行。

基于文献计量学的菟丝子研究现状及热点分析

目的 了解菟丝子的研究现状及热点,展望其发展趋势。方法 采用文献计量学研究方法,结合EndNote X9.1、VOSviewer软件对2001年—2021年万方数据知识服务平台、中国知网(CNKI)中菟丝子相关中文文献进行分析。结果 菟丝子中文文献发文量在2008年—2014年有增长,其中菟丝子的防治与栽培、混伪品的鉴别、有效成分的测定、黄酮类和多糖类成分的药理活性研究以及提取物抗衰老、抗细胞凋亡、生殖影响等研究为热点聚类。近几年研究热点为菟丝子多成分的指纹图谱或特征图谱的研究、网络药理学的分析等。结论 作为传统中药的菟丝子仍具有巨大的探索空间。

牛膝-菟丝子药对防治高血压肾损伤网络药理学机制研究

目的:通过使用网络药理学方法探讨怀牛膝-菟丝子药治疗高血压肾损伤的潜在作用机制。方法:使用TCMSP、Uniprot数据库分别获取怀牛膝、菟丝子的活性成分和靶点基因,高血压肾损伤的疾病相关靶点是通过GenenCards、Omim数据库获取。在Venny在线工具中获取药物与疾病的交集基因,使用STRING数据库、Cytoscape 3.9.1软件构建蛋白质相互作用网络。通过Metascape数据库和微生信网站获取的数据构建GO和KEGG通路富集分析,建立活性成分-靶点-关键通路网络。结果:在TCMSP数据库中共筛选出怀牛膝、菟丝子符合条件的有24种活性药物成分,活性成分靶点及疾病靶点分别为206、1762个。Venny在线工具中获得了药物和疾病的113个共同基因。PPI网络显示怀牛膝、菟丝子药对发挥重要作用的靶点有:丝裂原活化蛋白激酶1、肿瘤抑制蛋白P53、蛋白激酶B1、肿瘤坏死因子、原癌基因、白细胞介素6等。从GO和KEGG通路富集分析结果中可得到,药物和疾病的交集基因与无机物、氧化应激、化学应激、活性氧、金属离子等分子生物进程关系密切,相关信号通路包括有:癌症的途径、脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE信号通路等。结论:怀牛膝-菟丝子治疗高血压肾损伤具有基本药理活性,可能通过AGE-RAGE信号通路、肿瘤坏死因子信号通路等作用于肿瘤抑制蛋白P53、蛋白激酶B1等靶点改善高血压肾损伤。

基于网络药理学和分子对接探讨菟丝子治疗胰岛素抵抗的作用机制

目的基于网络药理学和分子对接探讨菟丝子治疗胰岛素抵抗(IR)的分子机制。方法运用中药系统药理学技术平台(TCMSP)数据库,筛选菟丝子的化合物和有效靶点;使用GeneCards、OMIM和DisGeNET数据库预测IR的相关靶点,并利用Uniprot数据库转换成相应的基因名称;选取Cytoscape软件构建菟丝子—活性成分—靶点网络关系图、String数据库构建靶点蛋白质—蛋白质相互作用(PPI)网络;利用David数据库进行GO生物学功能富集分析和KEGG通路富集分析,并绘制柱状图和气泡图;使用Autodocktools软件对活性成分与核心靶点进行分子对接分析。结果获得菟丝子的关键化合物10个、药物靶点207个、疾病靶点1279个、交集靶点122个,得到JUN、AKT1、TP53、RELA、MAPK1和TNF 6个PPI网络核心分子,网络药理学结果提示菟丝子可能通过TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路和FoxO信号通路等121条信号通路参与调控IR。分子对接结果显示,菟丝子中活性成分槲皮素、苦参碱、β-谷甾醇与核心靶点JUN、TP53、MAPK1和RELA间存在结合位点。结论菟丝子具有多成分—多靶点—多途径协同治疗IR的作用,为后续的分子机制研究及临床应用奠定了理论基础。

基于DNA条形码和二级结构鉴定菟丝子及其易混伪品

目的:利用DNA条形码ITS2碱基序列及其二级结构对菟丝子及其混伪品金灯藤进行鉴定。方法:从安徽亳州药材市场收集10份菟丝子、5份南方菟丝子、5份金灯藤样品,提取基因组DNA后,利用ITS2序列扩增引物进行PCR及测序,并从GenBank下载菟丝子、南方菟丝子、金灯藤ITS2序列。利用MEGA 11.0对序列进行比对分析,计算种内、种间遗传距离,利用邻接法(NJ)构建系统聚类树,通过数据库预测ITS2二级结构。结果:菟丝子、南方菟丝子、金灯藤构建的NJ树分别聚为一支,基于ITS2碱基序列的种间遗传距离能准确鉴别菟丝子、南方菟丝子、金灯藤;菟丝子、南方菟丝子、金灯藤的二级结构在整体上有较大区别,能够明显区分。结论:基于ITS2序列可以准确地鉴别菟丝子及其混伪品。

菟丝子总黄酮对PCOS大鼠内分泌代谢的影响及机制

目的 探讨菟丝子总黄酮(total flavonoids from semen cuscutae,TFSC)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)大鼠内分泌的影响及可能的机制。方法 取80只大鼠,64只采用来曲唑溶液灌胃构建PCOS大鼠模型,将建模成功的大鼠随机分为模型组、TFSC低剂量组、TFSC中剂量组和TFSC高剂量组,每组16只,其余16只为正常组。建模成功后TFSC低剂量组、TFSC中剂量组和TFSC高剂量组按照5 mL·kg^(-1)体质量分别用35、70和140 mg·kg^(-1)的TFSC灌胃,正常组和模型组大鼠用等体积生理盐水灌胃,每日1次,连续14 d。比较各组大鼠体质量、卵巢指数、子宫指数、性激素和甲状腺激素水平,卵巢组织形态学差异、血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)水平以及卵巢组织中Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)和磷酸化核转录因子-κB(phosphorylated nuclear factor-κB P65,p-NF-κB P65)蛋白表达水平的差异。结果 与模型组相比,TFSC各剂量组大鼠体质量、卵巢指数、睾酮激素(testosterone, T)、促黄体生成激素(luteinizing hormone, LH)、抗谬勒管激素(anti-Müllerian hormone, AMH)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone, TSH)水平,TNF-α、IL-6水平以及TLR4、p-NF-κB P65蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);子宫指数、雌二醇(estradiol, E2)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone, FSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(free triiothyrogenine, FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine, FT4)、三碘甲腺原氨酸(triiodotyronine, T3)、甲状腺激素(thyroxine, T4)水平和黄体、成熟卵泡数均显著增加(P<0.05);大鼠体质量、卵巢指数,T、LH、AMH和TSH水平,TNF-α、IL-6水平,TLR4和p-NF-κB P65蛋白的表达水平与TFSC呈剂量依赖性降低,子宫指数、E2、FSH、FT3、FT4、T3、T4、黄体和成熟卵泡数与TFSC呈剂量依赖性增加(P<0.05)。结论 TFSC可有效改善PCOS大鼠内分泌代谢,改善排卵功能障碍,进而恢复卵巢形态和功能,可能与调控TLR4/NF-κB P65信号通路、降低炎症反应有关。

黄健玲治疗输卵管阻塞性不孕用药规律的数据挖掘分析

【目的】运用数据挖掘方法分析广东省名中医黄健玲教授治疗输卵管阻塞性不孕的组方用药规律。【方法】收集整理黄健玲教授在广东省中医院诊治的输卵管阻塞性不孕患者的有效病例的处方资料,基于中医传承辅助平台(V2.5版)系统,采用频次分析、关联规则分析、聚类分析等数据挖掘方法分析黄健玲教授治疗输卵管阻塞性不孕的组方用药规律。【结果】纳入的110例患者的231首处方中,涉及中药66味;用药频次居前10位的药物为桑寄生、白术、菟丝子、茯苓、丹参、赤芍、毛冬青、路路通、太子参、牡丹皮;药物功效分类以补虚药、清热药、活血祛瘀药为主;药性以平、寒为主,药味以苦、甘为主,多归肝、肾、脾经。关联规则分析结果得到核心药物组合为8个;聚类分析结果得到新方组合5个。【结论】黄健玲教授认为输卵管性不孕症病机特点为虚实夹杂,瘀阻胞络;治疗原则当活血化瘀通络,同时重视补肾健脾。

菟丝子总黄酮中拟雌激素作用的活性成分筛选

目的筛选菟丝子总黄酮中拟雌激素作用的活性成分。方法以小鼠子宫系数和子宫内膜厚度为评价指标,评估10批菟丝子总黄酮的拟雌激素作用,并建立其指纹图谱,标定共有峰;采用双变量相关性分析和灰色关联度分析对共有峰和上述两种指标的谱效关系进行分析,筛选拟雌激素作用的活性成分,并采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对活性成分进行表征。结果10批菟丝子总黄酮的拟雌激素作用均较好。菟丝子总黄酮正、负离子模式下分别得到28、33个共有峰,其中正离子模式下的7、10、12~16、26号峰及负离子模式下2、5、8、9、12、16、19、22~26号峰所代表的成分与菟丝子总黄酮拟雌激素作用高度相关。进一步鉴定发现,菟丝子总黄酮拟雌激素作用的活性成分分别为5,7,3′,4′-四甲氧基黄酮、6-O-(反式)对香豆酰基-呋喃果糖-(2→1)-吡喃葡萄糖苷、芦丁、山柰酚-3,7-双葡萄糖苷、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、金丝桃苷、紫云英苷、槲皮苷、槲皮素、芹菜素、山柰酚、异鼠李素、杜鹃黄素、异槲皮苷、山柰酚-3-呋喃阿拉伯糖苷、2,6-十八碳二炔酸。结论本研究从菟丝子总黄酮中筛选出16种拟雌激素作用的化学成分,可为植物雌激素类药物的开发提供参考。

菟丝子和大菟丝子形态组织研究与分类学意义

以7批菟丝子和8批大菟丝子商品药材为材料,通过体视显微镜观测菟丝子和大菟丝子整体及种脐形状大小、四面观,分别将菟丝子和大菟丝子药材种皮进行组织解离制片,利用光学显微镜观测种皮栅状细胞断面观特征,用扫描电镜观测种脐特征,对菟丝子和大菟丝子药材进行形态组织研究并进行分类比较。结果表明,菟丝子以饱满为主,多为类球形,长与宽1~2 mm;四面观中腹面观略呈圆形,背面观略呈椭圆形,左面观和右面观略呈类圆形;种脐多为扁圆形。大菟丝子类圆球形或三棱形,长与宽2~3 mm;腹面观和右面观类椭圆形,背面观类半扇形,左面观类扇形,种脐圆形。显微鉴别发现,菟丝子种皮栅状细胞断面观有2层,内列细胞径向长为外列的1~2倍,而大菟丝子只有1层,径向长30.62~41.27μm。扫描电镜观测菟丝子脐孔呈唇形翻起状,长137.58~217.00μm,宽6.00~21.00μm;大菟丝子脐孔呈衣领状,长464.52~792.51μm,宽5.75~28.19μm。

基于R语言探讨古代中医文献中治疗骨质疏松症的中药用药规律

【目的】挖掘分析古代中医文献中采用中药治疗骨质疏松症的用药规律,为临床运用中药治疗骨质疏松症提供参考。【方法】以“骨痿”“骨枯”“肾痿”为关键词,计算机检索第5版《中华医典》中采用内服中药治疗骨质疏松症的方剂。采用Excel软件对方药信息进行提取,采用R语言对中药进行使用频次分析、关联规则分析及聚类分析。【结果】共筛选得到治疗骨质疏松症的方剂88首,中药183味,总频次为902次;高频中药(使用频次≥10次)有25味,使用频次居于前5位的依次为牛膝、熟地黄、菟丝子、肉苁蓉、杜仲。高频药物根据其功效进行分类,主要可分为补虚药、利水渗湿药、收涩药、清热药、温里药、祛风湿药。关联规则分析得到281条关联规则,其中关联度最高的前5个药对为熟地黄-牛膝、菟丝子-肉苁蓉、菟丝子-牛膝、肉苁蓉-牛膝、杜仲-牛膝。关联规则分析和聚类分析形成以牛膝、熟地黄、菟丝子、肉苁蓉、杜仲为基础的核心药物组合。【结论】古代医家采用中药治疗骨质疏松症以补肾为基本原则,酌情加入针对湿浊、血瘀、脾虚等病机的中药。挖掘得到的核心药物组合可为骨质疏松症的临床治疗提供一定的参考。

菟丝子黄酮对H2O2诱导的COV434人卵巢颗粒细胞氧化应激的影响

目的研究菟丝子黄酮(flavonoid from semen cuscutae,FSC)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人卵巢颗粒细胞氧化应激的影响以及可能相关的作用机制。方法使用不同浓度H_(2)O_(2)处理人卵巢颗粒细胞(COV434)2 h,用CCK-8检测法评估细胞增殖活力,以确定构建细胞外氧化应激模型的H_(2)O_(2)刺激浓度;检测不同浓度的FSC对细胞的毒性作用;使用25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL的FSC处理氧化应激模型组细胞,CCK-8法检测FSC对细胞增殖活力的影响。根据处理条件将细胞分为四组:Control组,FSC组,H_(2)O_(2)组,FSC+H_(2)O_(2)组,使用CCK-8检测细胞增殖率,活性氧(ROS)试剂盒测定细胞内ROS含量,采用Western blot测定AMPK、P-AMPK、Bax和P53蛋白的表达量。结果0.5 mmol/L的H_(2)O_(2)处理2 h为构建COV434细胞氧化应激模型最佳条件。同时,100μg/mL FSC处理24h为最佳预处理条件。H_(2)O_(2)处理后细胞增殖活力下降,ROS水平上升,FSC处理可以降低ROS水平。Western Blot结果表明,H_(2)O_(2)处理后P-AMPK蛋白表达下调,P53和Bax表达升高,而FSC可以逆转这一趋势。结论H_(2)O_(2)可能通过抑制AMPK通路进而影响下游P53、Bax的表达,FSC可逆转H_(2)O_(2)所致的COV434细胞氧化损伤这一作用。

菟丝子水提取物对骨质疏松骨折大鼠骨愈合的影响

目的:探讨菟丝子水提取物对骨质疏松骨折大鼠骨愈合的影响。方法:78只SPF级健康雄性SD大鼠为研究对象,其中15只常规饲养作为空白对照组,63只建立OPF模型,将OPF模型大鼠分为模型组、低剂量干预组、中剂量干预组、高剂量干预组,其中干预大鼠分别给予浓度分别为5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml菟丝子水提取物,余组则给予等量生理盐水。比较各组骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、转化生长因子-β(TGF-β)、胰岛素生长因子-1(IGF-1)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、骨钙素、Ⅰ型前胶原羧基端前肽、骨特异性碱性磷酸酶、骨密度和骨组织形态学参数[骨小梁面积百分数(TbAr%)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)]及骨折愈合评分。结果:61只大鼠成功建立OPF模型,16只为模型组,45只大鼠作为干预对象随机分为低剂量干预组、中剂量干预组、高剂量干预组各15只。模型组BMP-2、TGF-β、IGF-1、VEGF蛋白相对表达、全身、腰4~6椎骨、右股近端2cm骨密度和TbAr%、Tb.Th、Tb.N显著低于空白对照组(P<0.05),低剂量干预组、中剂量干预组、高剂量干预组BMP-2、TGF-β、IGF-1、VEGF蛋白相对表达、全身、腰4~6椎骨、右股近端2cm骨密度和TbAr%、Tb.Th、Tb.N依次明显升高,且均显著高于模型组(P<0.05)。模型组血清骨钙素、Ⅰ型前胶原羧基端前肽、骨特异性碱性磷酸酶、Tb.Sp水平显著高于空白对照组(P<0.05),低剂量干预组、中剂量干预组、高剂量干预组血清骨钙素、Ⅰ型前胶原羧基端前肽、骨特异性碱性磷酸酶水平、Tb.Sp依次明显降低,且均显著低于模型组(P<0.05)。低剂量干预组、中剂量干预组、高剂量干预组骨折愈合评分依次明显增高,组间两两比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:菟丝子水提取物治疗可明显促进OPF大鼠的骨折愈合,与其可明显调节骨生长相关因子、骨代谢及骨密度等有关,本研究或可为OPF菟丝子治疗提供参考。