大鼠、小鼠微生物学质量监测中的哨兵动物设置

建立并执行全面的实验动物质量监测,对于确保人员、动物健康和福利,以及实验研究结果的真实性、有效性和可重复性是非常重要的。在实验动物中设置相应的哨兵动物能有效监测实验动物质量。本文对实验动物微生物质量监测中哨兵鼠选择,哨兵鼠与被监测动物接触方式、时间,哨兵鼠放置位置,每笼哨兵鼠代表被监测群体的鼠笼数,以及检测数量、检测频率和项目做一综述。

荧光定量PCR用于日本血吸虫感染高危环境早期预警的研究

采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测感染早期哨鼠内脏组织日本血吸虫DNA,探索最佳检测时间,以达到早期监测预警血吸虫感染高危环境的目的。取20只阳性钉螺置于25℃温水中1 h逸出血吸虫尾蚴。将昆明小鼠随机分为自然感染组(6只)、定量感染组(36只)和阴性对照组(9只)。自然感染组小鼠转移至含有血吸虫尾蚴水体的笼内模拟野外现场自然感染1 h,定量感染组小鼠经腹部贴片法感染尾蚴(40±5)条/鼠,阴性对照组小鼠不作感染。自然感染组小鼠感染后第1、2、5天随机解剖2只,定量感染组小鼠感染后第1、2、3、5、7、14天随机解剖6只,阴性对照组小鼠同步随机剖检1只。取各组小鼠腹部皮肤和心、肺、肝组织,提取DNA后进行qRT-PCR检测血吸虫DNA,记录循环阈值(Ct值),判断各组小鼠血吸虫感染情况;定量感染组小鼠还需单独检测个体各时间段肺组织中血吸虫DNA的Ct值。qRT-PCR检测结果显示,自然感染组小鼠腹部皮肤组织中血吸虫DNA在感染后第1、2天检测结果为阳性,肺组织在感染后第1、2、5天检测结果均为阳性,肝组织和心脏组织在感染后第5天为阳性。定量感染组小鼠皮肤在感染后第1、2、3天检测结果为阳性,肺组织在感染后所有时间点均为阳性,肝组织在感染后第2~14天均为阳性,心脏组织在感染后第3天和第7天为阳性,血液样品在感染后第5天为阳性。定量感染组小鼠个体肺组织在感染后第2~5天检测结果为阳性。提示哨鼠感染早期对其肺组织进行qRT-PCR检测血吸虫DNA,具有早期预警血吸虫感染高危环境的价值。