大孔树脂联合Sephadex LH-20葡聚糖凝胶分离纯化芦荟大黄素

目的对芦荟药材中芦荟大黄素进行分离纯化及含量测定。方法以DM301、X5、DM1303种大孔树脂的静态吸附率,动态吸附率为指标,分离芦荟大黄素,用Sephadex LH-20葡聚糖凝胶纯化芦荟大黄素,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定芦荟大黄素的含量。结果芦荟大黄素线性回归方程为Y=41131X-44.34(r^2=0.9993),DM301大孔树脂联合Sephadex LH-20葡聚糖凝胶分离纯化芦荟大黄素效果好。结论该方法快速、简便,为芦荟中有效成分大黄素分离和测定提供了依据,为大黄素的纯化提供了参考。

高速逆流色谱法分离纯化茶黄素

首次应用高速逆流色谱法分离纯化茶黄素单体成分 ,溶剂系统为乙酸乙酯 -正己烷 -甲醇 -水 ( 3∶ 1∶ 1∶ 6) ,优化了分离茶黄素的条件。同时与 Sephadex L H- 2 0柱色谱法梯度洗脱对比 ,结果表明 ,高速逆流色谱法分离时间相对较短 ,可进行较大量的分离制备。高速逆流色谱法较之 Sephadex LH- 2 0柱色谱法还有一个突出的优点 ,即无不可逆吸附污染及不会导致样品化学变性。

葡聚糖凝胶柱层析富集黑果枸杞总花色苷工艺及其抗氧化性研究

以黑果枸杞花色苷提取物为原料,研究Sephadex LH-20葡聚糖凝胶富集纯化花色苷工艺条件,分别考察不同上样液浓度、p H值和上样流速对花色苷的吸附率影响,同时考察不同洗脱液浓度、p H值和洗脱流速对花色苷的解吸效果,并比较不同产物的总花色苷含量和抗氧化性。通过单因素与正交试验确定最佳富集纯化工艺条件为:质量浓度25 mg/L、p H值为3.5的样品溶液,以1.0 mL/min流速上样至Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱后,采用85%、p H值为3.5的乙醇溶液,以1.0 mL/min流速洗脱,对总花色苷的吸附率和解吸率分别为90.9%、85.3%。通过定量分析可知,凝胶柱层析富集后产物的总花色苷含量高于树脂纯化物,同时抗氧化性试验结果表明,对两种自由基的清除能力顺序依次为凝胶纯化>树脂纯化>提取物。

金黄色葡萄球菌拮抗菌株的筛选鉴定及其抗菌物质分析

【背景】植物内生菌的次生代谢产物是新型天然活性物质的重要来源。【目的】从芍药内生细菌中筛选对金黄色葡萄球菌有抑菌活性的菌株和次生代谢产物。【方法】采用平板对峙法筛选拮抗菌株,根据形态学特征和分子生物学的方法鉴定菌株,PCR扩增检测合成脂肽类物质的功能基因;运用牛津杯法依次测定内生细菌发酵液和脂肽类粗提物的抑菌活性,利用Sephadex LH-20凝胶层析分离脂肽类物质,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析具有抑菌作用的分离组分。【结果】共筛选出13株对金黄色葡萄球菌具有不同程度抑制作用的内生菌株,其中菌株SY11的抑菌作用最为显著,其发酵液和脂肽类粗提物均具有较强的抑制作用。结合形态学鉴定以及16S r RNA基因序列分析,鉴定其为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)。PCR扩增检测表明菌株SY11含有3个合成脂肽类物质的功能基因fenA、ituD和srfkn,推测该菌株可能具有合成脂肽类物质的能力。根据具有抑菌活性分离组分的质谱分析结果,推测其有效物质的主要成分为Bacillomycin D。【结论】解淀粉芽孢杆菌SY11对金黄色葡萄球菌有良好抑制效果,其脂肽类粗提物也具有较强的体外抑菌活性。本研究为芍药内生细菌的开发应用奠定了基础。