钠氢交换蛋白1抑制剂对脓毒症大鼠心脏损伤保护作用的实验研究

目的:观察钠氢交换蛋白1(NHE1)抑制剂对脓毒症大鼠心脏损伤的保护作用,并探讨其可能的机制。方法:常规方法建立大鼠脓毒症模型诱导心脏损伤。将SD大鼠随机分为对照组、脓毒症组和脓毒症治疗组,脓毒症治疗组大鼠注射钠氢交换蛋白1抑制剂卡立泊来德,于伤后12h检测左心室射血分数(LVEF)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和丙二醛(MDA)水平。结果:脓毒症组大鼠心脏损伤高于对照组,表现为LVEF值的降低和LDH、CK、CK-MB值的升高;脓毒症治疗组大鼠较脓毒症组大鼠心脏损伤显著减轻,表现为LVEF值的升高、LDH、CK和CK-MB值的降低。脓毒症组大鼠TNF-α、IL-6、MPO、MDA水平高于对照组,差异有统计学意义;SOD、CAT和GPx水平低于对照组,差异有统计学意义;治疗组大鼠上述指标显著改善。结论:NHE1抑制显著减轻脓毒症诱导的心脏损伤,其部分机制可能是抑制了炎症反应和氧化应激。

钠氢交换蛋白1抑制剂对烧伤脓毒症大鼠肠道损伤的作用及其机制

目的观察钠氢交换蛋白1（NHE1）抑制剂对烧伤脓毒症大鼠肠道损伤的作用，并初步探讨其可能机制。方法取SD大鼠90只，按照随机数字表法分为对照组、单纯脓毒症组和NHE1抑制剂组，每组30只。单纯脓毒症组和NHE1抑制剂组大鼠背部建立20％TBSAⅢ度烫伤（下称烧伤）模型后，背部创面中心注射2×10^5CFU／mL的铜绿假单胞菌ATCC27853菌液50μL。烧伤脓毒症模型建立成功后，NHE1抑制剂组大鼠迅速腹腔注射0．1mmol／LNHE1抑制剂卡立泊来德0．4mg／kg，单纯脓毒症组大鼠注射同体积的生理盐水。对照组大鼠除不制作烧伤创面和接种细菌外，其余操作与单纯脓毒症组大鼠相同。烧伤脓毒症大鼠在伤后12h剖腹，于回肠远端注射0．1mol／L异硫氰酸荧光素（FITC）-葡聚糖200mL，30min后左心室采血，切取回肠末端组织。荧光分光光度计检测大鼠血清FITC-葡聚糖含量（样本数为10），HE染色观察肠道组织形态（样本数为10），ELISA法检测血清和肠道组织IL-6和TNF—α含量（样本数均为20），比色法检测血清和肠道组织髓过氧化物酶（MPO）活性（样本数均为20），蛋白质印迹法检测肠道组织NF-κB-p65蛋白表达及MAPK信号通路相关蛋白p38MAPK、细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）以及c—Jun氨基末端激酶1／2（JNK1／2）磷酸化水平（样本数为4）。对照组大鼠于相同时相点同前采集标本进行相关检测。对数据行单因素方差分析、SNK检验。结果（1）单纯脓毒症组大鼠血清FITC-葡聚糖含量较对照组明显升高（P〈0．01），NHE1抑制剂组大鼠血清FITC-葡聚糖含量则较单纯脓毒症组显著降低（P〈0．01）。与对照组比较，单纯脓毒症组大鼠肠黏膜可见大量炎性细胞浸润、黏膜溃疡以及黏膜坏死；NHE1抑制剂组大鼠肠道损伤情况较单纯脓毒症组有显著好转。（2）单纯脓毒症组大鼠血清IL-6、TNF-α、MPO含量分别为（387±42）、（164．7±10．1）ng／mL及（7．5±1．5）U／mL，显著高于对照组的（75±17）、（13．1±6．5）ng／mL和（2．3±0．7）U／mL（P值均小于0．01）；NHE1抑制剂组大鼠血清IL-6、TNF—α、MPO含量分别为（176±37）、（64．9±9．3）ng／mL和（5．9±0．8）U／mL，均显著低于单纯脓毒症组（P值均小于0．01）。（3）单纯脓毒症组大鼠肠道组织IL-6、TNF—α、MPO含量分别为（190±13）、（172．8±29．7）ng／mL及（8．7±1．5）U／mL，显著高于对照组的（20±3）、（11．9±2．3）ng／mL和（2．9±0．3）U／mL（P值均小于0．01）；NHE1抑制剂组大鼠肠道组织IL-6、TNF-α、MPO含量分别为（35±6）、（45．2±6．1）ng／mL和（5．3±0．6）U／mL，均显著低于单纯脓毒症组（P值均小于0．01）。（4）单纯脓毒症组大鼠肠道组织NF—κB—p65蛋白表达量和p38MAPK、ERK1／2磷酸化水平显著高于对照组（P值均小于0．01），NHEI抑制剂组大鼠肠道组织NF-κB—p65蛋白表达量和p38MAPK磷酸化水平明显低于单纯脓毒症组（P值均小于0．01），3组大鼠肠道组织JNKl／2磷酸化水平无明显差异（P值均大于0．05）。结论抑制NHE1可显著减轻烧伤脓毒症诱导的大鼠肠道损伤，其机制可能为通过调控NF—κB及p38MAPK信号通路，抑制肠道炎症反应。