BALF病原微生物mNGS检测在难治性肺炎中的应用研究

目的探讨支气管肺泡灌洗液(BALF)病原微生物宏基因组二代测序技术(mNGS)在难治性肺炎(RTP)患者中的应用效果。方法回顾分析2023年1月至2024年1月收治的60例行支气管镜BALF宏基因检测(mNGS组)和60例行传统培养(传统组)的RTP患者资料。对比mNGS组与传统组检出阳性率、病原菌、感染类型和治疗情况。结果mNGS组病原菌检出阳性率为95.00%(57/60)高于传统组的71.67%(43/60)(P<0.05)。mNGS组与传统组分别检出84株、57株病原菌。mNGS组革兰阴性菌、革兰阳性菌阳性检出率低于传统组,真菌、病毒、特殊病原体阳性检出率均高于传统组(P<0.05,P<001)。传统组单一感染检出率高于mNGS组(P<001),且以细菌感染为主。mNGS组混合感染检出率高于传统组(P<001),且以病毒-细菌感染、病毒-细菌-真菌感染为主。mNGS组抗菌药物使用时间、抗菌药物调整频次、住院时间、住院费用短于或低于传统组,总有效率高于传统组(P<0.05,P<001)。结论BALF病原微生物mNGS检测在RTP患者病原学诊断中有良好的应用效果,可以帮助临床医生早期识别病原体进而实施精准治疗,提高治疗总有效率,减少并发症。

低红外特征涡扇发动机加速控制及影响规律研究

为探究红外抑制措施对发动机加速性能的影响,提出并制定了针对发动机排气系统外涵引气冷却的普适性加速控制计划,开展了低红外特征涡扇发动机加速控制及其影响规律研究。首先,建立了带外涵道引气冷却中心锥、全遮挡导流支板和尾喷管扩张壁面的发动机部件级模型,并在此基础上发展了排气系统正后向红外辐射特征计算模型;其次采用可行序列二次规划算法,针对采用了不同排气系统红外抑制措施的涡扇发动机分别制定加速控制计划;最后通过硬件在回路仿真验证上述加速控制计划对带红外抑制措施的发动机从慢车到中间状态加速过程的有效性。结果表明,与常规涡扇发动机相比,采用了高温壁面冷却虽然能降低发动机近50%的红外辐射特征,提高战机的隐身性能,但会导致发动机推力降低近6%,油耗上升4%以上,加速时间延长20%左右。

混流轿车总装配线的动态规划与仿真优化研究

为设计合理的轿车总装线和提高生产效率,分析了其总装工艺流程及特点。建立装配线负荷平衡的数学模型及在3种不同阶段时的目标函数,确定了设计参数的上下界限并分析了各种启发式求解算法。采用最小生产循环来研究混流装配线的产品投产排序问题,建立了基于闭环工位时间移动窗口的最小化装配线空闲与超载时间和准时生产环境下零部件消耗速率均匀化的目标函数,并分析了3种优化算法。在数字化工厂软件eM-Power的平台上建立了轿车总装车间的底盘工段与分装工段部分工位的仿真对象模型及控制逻辑。最后,进行了生产评估并验证了所建模型的有效性。

猪源绿脓杆菌的分离鉴定及16S rRNA基因同源性分析

从解剖病变为心包炎、纤维素性肺炎、肺脓肿的病死仔猪体内分离到1株细菌,通过形态特征观察、生化试验,将分离菌株初步鉴定为绿脓杆菌。动物致病性试验结果显示,分离菌株对小鼠具有很强的致病性。药敏试验结果显示,分离菌株对氧氟沙星、恩诺沙星高度敏感,对头孢噻肟、庆大霉素中度敏感,对青霉素、氟苯尼考、氨苄西林、阿莫西林、强力霉素、卡那霉素等耐药。将分离菌株的16S rRNA基因序列与Gen Bank中发表的绿脓杆菌序列进行Blast比对,结果表明,分离菌株与绿脓杆菌不同菌株的同源性高达99%以上,进一步确定分离菌株为绿脓杆菌。基于16S rRNA基因序列,使用MEGA 5.05软件,构建系统进化树,结果表明,分离菌株与病人痰液和腹泻婴儿分离菌株的同源性最高,与未加工水果分离菌株同源性最低。

鸡传染性支气管炎病毒核蛋白基因的克隆及在杆状病毒系统中的表达

利用反转录_聚合酶链式反应 (ReverseTranscription_polymeraseChainReaction ,PT_PCR)技术扩增鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)中国地方分离株的核蛋白基因 ,并对其序列进行了测定 ,结果表明该病毒株核蛋白基因长度为 12 3 0bp ,编码蛋白由4 0 9个氨基酸残基组成。与已发表的参考毒株进行核苷酸同源性比较 ,发现与澳大利亚群毒株的亲缘关系最为密切。在此基础上 ,本实验构建了杆状病毒重组转移载体pBlue_N ,将其与线性化的杆状病毒DNA共转染Sf9昆虫细胞 ,经过三轮蚀斑纯化和PCR鉴定 ,获得重组杆状病毒rBac_N。SDS_PAGE分析和Westernblot检测的结果表明核蛋白基因在重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞内获得表达 ,融合蛋白表达量占细胞蛋白总量的 19.4

小鼠不同肠道段内容物和粪便中微生物的宏基因组测序和比较分析

随着二代测序技术的迅速发展，从宏基因组角度了解环境微生物成为可能。目前，动物肠道微生物研究大多以粪便作为实验样品，对肠道内部微生物情况了解甚少。研究以小鼠为模型，分别对十二指肠、空回肠、盲肠、结肠4个部分内容物进行了宏基因组测序和分析。结果显示，（1）在门水平上，十二指肠比其他肠段厚壁菌门减少、变形菌门增多；（2）在属水平上，大肠的优势菌属为螺杆菌、真细菌等，小肠优势菌属为链球菌、大肠杆菌、梭菌、肠球菌等，而且粪便与大肠优势菌分布趋势类似；（3）大肠和小肠肠道微生物相似度为0．62～0．77，粪便与各肠段微生物相似度为0．7～o．9；（4）粪便和肠道内容物细菌功能差异同其生理功能有一定关联。研究表明，小肠内容物与大肠内容物和粪便中微生物有明显差异，尽营粪便微生物与大肠内容物微生物类似。这一结果暗示着粪便微生物不能完全代表动物宿主肠道微生物的真实情况。

甜菜坏死黄脉病毒内蒙分离物RNA3序列分析及编码25kD蛋白基因在大肠杆菌中的表达

以甜菜坏死黄脉病毒（ＢＮＹＶＶ）内蒙分离物的总ＲＮＡ为模板，通过反转录－ＰＣＲ扩增获得ＢＮＹＶＶＲＮＡ３全长ｃＤＮＡ。将其克隆到ｐＧＥＭ－７Ｚｆ（＋）上，得到重组质粒ｐＧＢＹ５６。序列分析结果表明，内蒙分离物ＲＮＡ３基因组全长为１７７５ｎｔ，其中包含３个开放阅读框架，分别编码２５ｋＤ蛋白、４．６ｋＤ蛋白和一种由５９个氨基酸组成的Ｎ蛋白。与法国Ｆ２分离物、德国Ｇ１分离物和日本Ｓ分离物相比，其核苷酸序列的同源性分别为９６．４％、９６．８％和９７．３％。将２５ｋＤ蛋白编码基因克隆到ｐＪＷ２上，构建了该基因的原核表达载体。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析结果表明，２５ｋＤ蛋白基因在Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中经温度（４２℃）诱导后。

山羊副流感病毒3型感染MDBK细胞的miRNA表达谱变化分析

本研究旨在分析山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染MDBK细胞和正常MDBK细胞差异表达的miRNA,以探索miRNA在CPIV3感染过程中的作用及其调控机制。将CPIV3感染MDBK细胞,利用高通量测序技术检测分析MDBK细胞中miRNA表达谱,并筛选差异表达的miRNA。对靶基因进行GO注释和KEGG富集。结果显示,有37个miRNA显著差异表达(P<0.001),其中18个miRNA在病毒感染中上调,19个miRNA在病毒感染中下调。经RT-qPCR方法验证5个差异表达的候选miRNA,结果与高通量测序分析有很好的一致性。进一步GO功能注释表明:差异表达的miRNA靶基因生物学功能相对集中在免疫调节、细胞生物调控及细胞新陈代谢等生物过程。这些靶基因参与多种细胞的信号通路,包括细胞黏附分子、B细胞受体信号通路、MAPK信号通路、代谢通路、黏合斑、钙离子信号通路和趋化因子信号通路等。本研究为进一步探讨CPIV3致病机制奠定了基础。

考虑控制动作顺序的省网电压控制系统

目前以三级控制模式为基础的自动电压控制策略大都假定所有控制设备可以并行操作、且同时完成动作。作者首先以电厂自动电压控制系统为例,分析了实际设备动作速度不一致可能造成的监控节点电压或机组无功出力越限情况,然后以减少控制过程中的电压波动为目标建立了控制动作顺序优化模型,并给出了不同控制时序下设备整定值的修正算法,最后通过福建电网实际数据的仿真结果证明了模型和算法的有效性。

酪氨酸羟化酶基因新突变导致多巴反应性肌张力障碍家系分析

【目的】研究多巴反应性肌张力障碍(DRD)家系TH基因突变特点。【方法】提取先证者及其父母和两个姐姐外周血基因组DNA,使用高通量测序(NGS)的方法对已知肌张力及运动障碍相关的256个致病基因进行检测。【结果】家系中2例患者(先证者和其大姐)的酪氨酸羟化酶(TH)基因外显子14、9存在c.1481C>T(p.Thr494Met)、c.943G>A(p.Gly315Ser)复合杂合突变,父母分别携带一个杂合突变,其表型正常的二姐和50名正常对照者均未检测到该突变。【结论】TH基因c.1481C>T(p.Thr494Met)、c.943G>A(p.Gly315Ser)突变导致了该DRD家系的基因异常,并且发现了新的TH基因突变,扩展了DRD基因型与临床表型的关系谱,对DRD的早期精准诊断和治疗是改善预后的关键。

基于功率预测模型的并网逆变器直接功率控制

传统的直接功率控制(DPC)存在开关频率随采样时间、负载参数和系统状态变化而变化,产生分散的谐波成份的问题。本文提出了一种基于功率预测模型的三相并网逆变器直接功率控制策略。该控制策略将一定的预测算法与瞬时功率理论结合,以逆变器交流侧输出电压为控制对象,建立功率预测模型,得到参考输出电压,同时为了减小开关损耗,选择对称式电压空间矢量序列控制逆变器输出电压,从而控制瞬时功率有效跟踪参考功率值。仿真结果分析,该控制策略有较好的动静态性能,可实现恒定的开关频率,与直接功率控制相比体现出更好的谐波抑制效果。

陕西人群Rb1.20位点的VNTR多态性与食管癌遗传易感性相关

目的 探讨陕西人群 Rb1 .2 0位点 VNTR多态性是否与食管癌遗传易感性有关 .方法 应用 PCR方法对陕西正常个体外周血 (5 0例 )、食管癌组织 (36例 )、食管癌癌旁组织(2 7例 ) Rb基因 2 0内含子 VNTR区进行了检测 .结果 共检出 5个等位基因片段 :385 bp(A) ,370 bp(B) ,35 5 bp(C) ,330 bp(D)和 32 5 bp(E) .在正常人群中 ,其等位基因频率分别为 :A0 .31 ,B0 .1 5 ,C0 .0 7,D0 .0 5 ,E0 .42 ,杂合性为 72 % ,PIC为 0 .70 ;在食管癌癌组织中 ,其等位基因频率分别为 :A0 .1 5 ,B0 .1 7,C0 .1 7,D0 .36和 E0 .1 5 ,PIC为 0 .77;在食管癌癌旁组织中 ,其等位基因频率分别为 :A0 .1 1 ,B0 .30 ,C0 .1 1 ,D0 .43和 E0 .0 6 ,杂合性为 2 2 % ,PIC为 0 .70 .Rb1 .2 0位点 VNTR多态性在不同群体中有显著差异 .结论 推测Rb1 .2 0位点的

艰难梭菌细胞毒素B功能区的克隆及序列分析

目的克隆艰难梭菌(Clostridium difficile,C.d)细胞毒素B羧基末端功能区(CDB3)基因,并对其进行测序及生物信息学分析。方法利用PCR技术扩增CDB3基因,并将其定向插入pET-22b(+)载体中,以DNA自动分析仪进行序列测定,并以生物信息学软件分析其生物学特性。结果成功克隆了艰难梭菌CDB3基因,经测序表明与GenBank中分布的Clostridium difficile VPI10463的ToxinB3基因序列完全一致。DNAstar软件预测其蛋白质的相对分子量(Mr)约为71.3 kD,并显示出良好的抗原性。结论研究获得了序列正确的CDB3基因,为其重组表达及其相关研究奠定了良好基础。

一种基于模糊逻辑的MPEG压缩视频场景转换检测方法

镜头边界的自动检测是实现基于内容的视频检索必不可少的第一步 ,目前大多数的场景转换检测方法都是基于非压缩视频的 ,而越来越多的视频数据却以压缩形式存在。本文提出了一种新的针对MPEG压缩视频的场景转换检测算法 ,它利用DC序列和运动向量计算像素差、直方图差、统计差和具有“真实”运动向量的宏块所占的比例 ,然后用模糊逻辑对上述参量加以综合 ,隶属度用自适应的方法确定。实验表明这种镜头检测算法具有较高的检出率和检测精度 ,并且能适应不同类型的视频流。

三七的18SrRNA,matK基因序列和HPLC化学指纹图谱分析研究

目的分析中药三七Panaxnotoginseng的18SrRNA和matK基因的分子特征和三七的化学指纹特征,为三七的正品药材基原鉴定提供分子和化学依据。方法采用PCR直接测序技术测定三七及其7种伪品的18SrRNA和matK基因部分核苷酸序列以及不同产地三七的DNA分子特征。利用HPLC的化学分析技术,明确产地对三七化学成分的影响,以及三七不同部位的化学指纹特征。结果(1)三七及其7种常见伪品的核糖体18SrRNA基因序列存在很大的差异。(2)不同产地的三七的核糖体18SrRNA和叶绿体matK基因序列特征完全一致,分别与GenBank上已报道的R1型(D85171)和M1型(AB027526)序列吻合。(3)不同产地的三七HPLC指纹图谱相似。(4)三七不同部位均具有其相对稳定的HPLC指纹特征,其中花、叶具有特有的指纹区,根、须根、剪口、筋条等不同商品规格的HPLC指纹图谱比较相似。结论基因序列标记能从分子水平定性分辨三七及其伪品的遗传背景差异,为中药品种标准化提供了先进可行、稳定可靠的分子标准;HPLC指纹图谱分析可以直观地为三七的化学成分定性,三七不同商品规格的特征性指纹有望成为以其为原材料的各种产品的质控标准,而三七不同部位(尤其是花和叶)的HPLC指纹图谱将有望成为制定三七花、三七叶新药用资源质控标准的依据。

猪血清白蛋白基因的克隆与序列分析

血清白蛋白融合技术是一种开发长效重组蛋白药物的新技术。为了获得猪血清白蛋白(PSA)基因,根据GenBank(登录号:AY663543)中PSA的基因序列,设计一对引物,采用RT-PCR从新鲜猪肝组织中扩增出PSA基因的全长cDNA,产物纯化后连接至pBS-T载体,转化大肠埃希菌TG1,采用PCR法及酶切鉴定法筛选出阳性菌株后进行测序。序列分析结果表明,成功克隆了PSA基因的1 821 bp全长cDNA,与GenBank中参照基因序列同源性为99.6%,氨基酸序列同源性为99.5%。本研究数据已提交至GenBank,并申请到一个登录号EF202601。

肝脏异维甲酸受体α调控脂代谢通路的基因组靶点分析

目的探讨肝脏异维甲酸受体α(RXRα)的基因组靶点特征及其下游通路与脂代谢的关系。方法将6只小鼠随机分为观察组和对照组各3只,分别给予维甲酸150 mg/(kg·d)和等量生理盐水灌胃,共7 d,测定血脂,并用染色体免疫沉淀测序和定量PCR比较RXRα靶基因谱和基因表达差异。结果观察组血清胆固醇和三酰甘油浓度较对照组显著降低(P<0.05),肝脏RXRα的基因组靶点和靶基因数均较对照组增加,以转录起始区靶点增幅最大(约58%)。RXRα的下游通路包括氧化还原、脂肪酸代谢和脂质转运等。观察组脂代谢相关靶基因中约48%(11/23)显著下调,22%(5/23)上调。结论肝脏RXRα及其下游通路是介导维甲酸调控脂代谢通路的重要因子。

基于灰色理论的畜禽粪便环境污染风险预测分析

本文运用灰色建模理论中的灰色数列预测方法,利用北京密云县10个乡镇的畜禽粪便实际负荷量和最大负荷量的确定,对未来年份的畜禽粪便负荷预警值进行预测。结果表明:该流域各乡镇未来十年所受畜禽粪便的污染威胁均呈现逐年加剧趋势,其中石城和番字牌预警值上升最快;冯家峪、大城子和新城子次之,高岭、太师屯和不老屯呈现缓慢上升态势。

CIBR处理模拟生活污水的效果及菌群分析

实验采用连续流一体化生物反应器(CIBR)处理模拟生活污水。考察CIBR对污水的处理效果,并采用高通量测序分析取自污水处理厂的接种污泥与驯化完后CIBR中活性污泥的菌群组成结构。结果表明,CIBR能高效处理模拟生活污水,COD、NH_4^+-N、TN和TP的去除率分别达到90.9%、94.9%、83.1%和71.2%;在门级菌群中,接种污泥和CIBR活性污泥中的优势菌种均为Proteobacteria和Bacteroidetes,但在属水平上,两个生物系统中好氧菌、兼性菌、反硝化菌、氨氧化菌、亚硝氮氧化菌和聚磷菌在种类和相对丰度上存在明显差异,这可能与运行工况和进水水质不同有关。

复杂信号环境下非合作突发通信信号的实时检测

现有未知突发信号检测算法是基于噪声加单一突发信号的简单假设的,在实际复杂信号环境会产生大量虚警而失效。针对实际非合作突发通信信号的检测环境除噪声外还包含多个连续信号和一些短突发干扰信号,建立了复杂信号环境模型,提出了适用于此环境的基于短时傅里叶变换(short time Fourier transform,STFT)的时序检测器。该检测器利用突发通信信号时间上短持续的特点剔除连续信号和短突发干扰造成的虚警。对该检测器的检测性能进行了分析和仿真,结果表明在复杂信号环境中当常规检测器由于虚警概率很高失效时,该检测器可以同时获得较低的虚警概率和较高的检测概率,因而适用于复杂信号环境中非合作突发信号检测。该检测器运算量小,易于实时实现。