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大肠杆菌丝氨酸羟甲基转移酶基因(glyA)的克隆和表达
被引量:
1
1
作者
沈天翔
那淑敏
+2 位作者
喻国策
谢家仪
贾盘兴
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997年第6期423-428,共6页
利用插入失活及营养缺陷型互补法将大肠杆菌K12 13kb的glyA基因克隆到质粒pBR329中。将重组质粒酶切,亚克隆,确定2.6kb PstI-EcoRI亚克隆片段带有完整的glyA基因。共获得12株glyA基因重组菌,对重组质粒进行了酶切鉴定。不同重组菌丝氨...
利用插入失活及营养缺陷型互补法将大肠杆菌K12 13kb的glyA基因克隆到质粒pBR329中。将重组质粒酶切,亚克隆,确定2.6kb PstI-EcoRI亚克隆片段带有完整的glyA基因。共获得12株glyA基因重组菌,对重组质粒进行了酶切鉴定。不同重组菌丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)活性及其酶表达量均不相同。受体菌未检测到丝氨酸的产生。重组菌株JM109(pSM13)、K12(pSM13)、K12(pSM14)和K12(pSM15)SHMT酶表达量分别占全菌可溶性蛋白的15.7%、15.4%、11.8%和9.48%。
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关键词
大肠杆菌
丝氨酸
羟甲基转移酶
glya
基因
克隆
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职称材料
glyA基因及其编码的丝氨酸羟甲基转移酶
被引量:
7
2
作者
刘万红
刘爱福
《氨基酸和生物资源》
CAS
2001年第2期13-16,21,共5页
glyA基因广泛存在于生物体中 ,其编码的丝氨酸羟甲基转移酶 (serinehydroxymethyltransferase,SHMT)催化丝氨酸和甘氨酸之间的相互转化 ,转化反应产生的 5,1 0 亚甲基四氢叶酸 (M THF)提供细胞新陈代谢—碳单位 ,此反应在细胞新陈代谢...
glyA基因广泛存在于生物体中 ,其编码的丝氨酸羟甲基转移酶 (serinehydroxymethyltransferase,SHMT)催化丝氨酸和甘氨酸之间的相互转化 ,转化反应产生的 5,1 0 亚甲基四氢叶酸 (M THF)提供细胞新陈代谢—碳单位 ,此反应在细胞新陈代谢中处于重要地位。因此 ,研究 glyA基因及其编码的丝氨酸羟甲基转移酶具有重要的意义。介绍了 glyA基因的克隆、序列分析、调控组分和丝氨酸羟甲基转移酶的部分性质。
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关键词
glya
基因
丝氨酸羟甲基转移酶
调控序列
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职称材料
GlyA基因的克隆及检验
被引量:
2
3
作者
蔡宇
吴梧桐
史燕东
《药物生物技术》
CAS
CSCD
1995年第1期1-4,共4页
用PCR法从大肠杆菌中调出长1.9kb的DNA片断,插入质粒pT77,核酸电泳和DNA测序分析结果证明该片段是GlyA目的基因。
关键词
glya
丝氨酸羟甲基转移酶
shmt
PCR
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职称材料
一株高产丝氨酸羟甲基转移酶基因工程菌的构建及发酵产酶条件优化
被引量:
1
4
作者
喻放
左振宇
+1 位作者
杨忠华
周卫
《武汉科技大学学报》
CAS
2013年第3期219-224,共6页
以E.coli AB90054基因组中DNA为模板,采用PCR方法扩增得到glyA基因,将该基因克隆到表达载体pET28a(+)中,转化表达菌株BL21(DE3)后筛选阳性重组子,并对筛选所得高表达基因工程菌G16进行培养条件和表达条件的优化。结果表明,当培养条件为3...
以E.coli AB90054基因组中DNA为模板,采用PCR方法扩增得到glyA基因,将该基因克隆到表达载体pET28a(+)中,转化表达菌株BL21(DE3)后筛选阳性重组子,并对筛选所得高表达基因工程菌G16进行培养条件和表达条件的优化。结果表明,当培养条件为38℃、pH为7.0、转速为150r/min时,基因工程菌的生长速度和菌液浓度最佳;当表达条件的诱导温度为30℃、诱导剂浓度为0.5mmol/L、诱导时间为5h时,基因工程菌诱导目的蛋白表达效果最好。通过SDS-PAGE分析和酶活测定后发现,在优化条件下基因工程菌G16发酵产丝氨酸羟甲基转移酶能力占菌体总蛋白的60%左右,且蛋白活性正常。
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关键词
glya
基因
丝氨酸羟甲基转移酶
基因工程
发酵产酶
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职称材料
题名
大肠杆菌丝氨酸羟甲基转移酶基因(glyA)的克隆和表达
被引量:
1
1
作者
沈天翔
那淑敏
喻国策
谢家仪
贾盘兴
机构
中国科学院微生物研究所
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997年第6期423-428,共6页
基金
国家"八五"攻关项目
文摘
利用插入失活及营养缺陷型互补法将大肠杆菌K12 13kb的glyA基因克隆到质粒pBR329中。将重组质粒酶切,亚克隆,确定2.6kb PstI-EcoRI亚克隆片段带有完整的glyA基因。共获得12株glyA基因重组菌,对重组质粒进行了酶切鉴定。不同重组菌丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)活性及其酶表达量均不相同。受体菌未检测到丝氨酸的产生。重组菌株JM109(pSM13)、K12(pSM13)、K12(pSM14)和K12(pSM15)SHMT酶表达量分别占全菌可溶性蛋白的15.7%、15.4%、11.8%和9.48%。
关键词
大肠杆菌
丝氨酸
羟甲基转移酶
glya
基因
克隆
Keywords
serine
hydroxymethyltransferase
(
shmt
),
glya gene
分类号
Q939.121 [生物学—微生物学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
glyA基因及其编码的丝氨酸羟甲基转移酶
被引量:
7
2
作者
刘万红
刘爱福
机构
武汉大学生命科学学院氨基酸研究所
出处
《氨基酸和生物资源》
CAS
2001年第2期13-16,21,共5页
文摘
glyA基因广泛存在于生物体中 ,其编码的丝氨酸羟甲基转移酶 (serinehydroxymethyltransferase,SHMT)催化丝氨酸和甘氨酸之间的相互转化 ,转化反应产生的 5,1 0 亚甲基四氢叶酸 (M THF)提供细胞新陈代谢—碳单位 ,此反应在细胞新陈代谢中处于重要地位。因此 ,研究 glyA基因及其编码的丝氨酸羟甲基转移酶具有重要的意义。介绍了 glyA基因的克隆、序列分析、调控组分和丝氨酸羟甲基转移酶的部分性质。
关键词
glya
基因
丝氨酸羟甲基转移酶
调控序列
Keywords
glya
gene
,
serine
hydroxymethyltransferase
分类号
Q753 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
GlyA基因的克隆及检验
被引量:
2
3
作者
蔡宇
吴梧桐
史燕东
机构
中国药科大学生物技术研究中心
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
1995年第1期1-4,共4页
文摘
用PCR法从大肠杆菌中调出长1.9kb的DNA片断,插入质粒pT77,核酸电泳和DNA测序分析结果证明该片段是GlyA目的基因。
关键词
glya
丝氨酸羟甲基转移酶
shmt
PCR
Keywords
glya
serine
hydroxymethyltransferase
(
shmt
)
PCR
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
一株高产丝氨酸羟甲基转移酶基因工程菌的构建及发酵产酶条件优化
被引量:
1
4
作者
喻放
左振宇
杨忠华
周卫
机构
武汉科技大学化学工程与技术学院
出处
《武汉科技大学学报》
CAS
2013年第3期219-224,共6页
文摘
以E.coli AB90054基因组中DNA为模板,采用PCR方法扩增得到glyA基因,将该基因克隆到表达载体pET28a(+)中,转化表达菌株BL21(DE3)后筛选阳性重组子,并对筛选所得高表达基因工程菌G16进行培养条件和表达条件的优化。结果表明,当培养条件为38℃、pH为7.0、转速为150r/min时,基因工程菌的生长速度和菌液浓度最佳;当表达条件的诱导温度为30℃、诱导剂浓度为0.5mmol/L、诱导时间为5h时,基因工程菌诱导目的蛋白表达效果最好。通过SDS-PAGE分析和酶活测定后发现,在优化条件下基因工程菌G16发酵产丝氨酸羟甲基转移酶能力占菌体总蛋白的60%左右,且蛋白活性正常。
关键词
glya
基因
丝氨酸羟甲基转移酶
基因工程
发酵产酶
Keywords
glya
gene
serine
hydroxymethyltransferase
gene
tic engineering
fermentative enzyme production
分类号
Q812 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大肠杆菌丝氨酸羟甲基转移酶基因(glyA)的克隆和表达
沈天翔
那淑敏
喻国策
谢家仪
贾盘兴
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997
1
下载PDF
职称材料
2
glyA基因及其编码的丝氨酸羟甲基转移酶
刘万红
刘爱福
《氨基酸和生物资源》
CAS
2001
7
下载PDF
职称材料
3
GlyA基因的克隆及检验
蔡宇
吴梧桐
史燕东
《药物生物技术》
CAS
CSCD
1995
2
下载PDF
职称材料
4
一株高产丝氨酸羟甲基转移酶基因工程菌的构建及发酵产酶条件优化
喻放
左振宇
杨忠华
周卫
《武汉科技大学学报》
CAS
2013
1
下载PDF
职称材料
已选择
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