口腔黏膜癌变过程中丝氨酸/苏氨酸激酶15的表达及意义

目的了解丝氨酸/苏氨酸激酶15(STK15)在口腔黏膜癌变过程中的表达变化,探讨P53/STK15转激活-非依赖通路在口腔鳞癌(OSCC)发生发展中的作用及意义。方法正常口腔黏膜8例,上皮异常增生患者27例,OSCC患者43例,石蜡包埋组织,采用免疫组化SABC法了解STK15及P53蛋白表达情况,分析二者的相关性及其临床病理学意义。结果STK15在正常口腔黏膜无表达,在上皮异常增生及OSCC中阳性率分别为40.74%(11/27)和67.44%(29/43),各组间差异均有统计学意义(P<0.05);口腔鳞癌中STK15阳性率在P53阳性组高于P53阴性组,在OSCC有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论STK15过表达是口腔黏膜癌变过程的早期事件,口腔鳞癌STK15过表达可能与p53突变有关并与OSCC淋巴结转移密切相关,P53/STK15转激活-非依赖通路在OSCC发生发展中可能起重要作用。

丝氨酸/苏氨酸激酶15和信号转导转录激活因子3在结肠癌中的表达及相关性研究

目的探讨结肠癌中丝氨酸/苏氨酸激酶15和信号转导转录激活因子3表达及其相关性研究。方法结肠癌病例样本共计48例,采用逆转录实时定量聚合酶链反应RT-PCR的方法,检测其中丝氨酸/苏氨酸激酶15和信号转导转录激活因子3的相对表达量,同时分析结肠癌与其表达量的关系。结果结肠癌中丝氨酸/苏氨酸激酶15和信号转导转录激活因子3的相对表达量与结肠癌存在相关性(P<0.05);丝氨酸/苏氨酸激酶15和信号转导转录激活因子3与结肠癌转移显著相关(P<0.05);丝氨酸/苏氨酸激酶15表达信号转导转录激活因子3表达与结肠癌发病及淋巴转移的具有相关性。结论丝氨酸/苏氨酸激酶15与信号转导转录激活因子3表达量在结肠癌中具有相关性,丝氨酸/苏氨酸激酶15和信号转导转录激活因子3相对表达量与结肠癌的预后显著相关。

分化型甲状腺癌与STK15关系的研究

目的探讨分化型甲状腺癌组织中丝氨酸/苏氨酸激酶15(STK15)的表达及其作用。方法采用免疫组织化学法检测71例分化型甲状腺癌组织及其癌旁组织、45例结节性甲状腺肿组织中STK15基因的表达。结果 71例甲状腺乳头状癌组织中STK15基因的阳性表达率均为100.0%,癌旁组织STK15阳性表达率8.45%,结节性甲状腺肿组织中STK15阳性表达率24.4%。在分化型甲状腺癌组织中STK15的表达具有相关性(p<0.01)。结论 STK15基因在分化型甲状腺癌组织中均为高表达,检测它可提高分化型甲状腺癌的诊断率,对良恶性甲状腺疾病鉴别诊断有重要意义。

STK15 mRNA、STAT3-siRNA对胃癌细胞株表达实验研究

目的:研究中心体扩增激酶STK15以及信号传导与转录激活因子3(STAT3)小干扰RNA(siRNA)在胃癌中的表达。方法:采用Real-time荧光定量PCR技术对7例胃癌新鲜组织和2例正常胃粘膜组织中STK15的mRNA表达水平进行检测。采用体外转染实验以及荷瘤裸鼠体内实验评价STAT3-siRNA的体内外抗肿瘤效果。结果:STK15在胃癌组织的表达量明显高于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.01)。另外,STAT3-siRNA能够显著降低胃癌细胞的体外增殖能力。结论:中心体扩增是细胞癌变过程的重要事件,中心体的异常扩增是细胞恶性克隆的关键环节。STAT3-siRNA显著降低胃癌细胞的体内外增殖能力和克隆形成能力。

Aurora-A/STK15在上皮性卵巢癌组织中的表达及其与预后的关系

目的探讨Aurora-A/STK15在上皮性卵巢癌组织中的表达变化及其与预后的关系。方法应用显微切割法从石蜡切片上提取总RNA,实时定量PCR和免疫组化方法检测80例原发性卵巢上皮性癌和29例正常卵巢组织中Aurora-A/STK15mRNA及蛋白水平的表达,分析其作为卵巢癌标志物的可行性以及与预后的相关性。结果上皮性卵巢癌组织中Aurora-A/STK15mRNA的表达明显高于正常卵巢组织[(60.5±74.2)对(2.19±1.4),P<0.01],但mRNA的表达水平与卵巢癌的分期和分级以及生存时间无关,P>0.05;上皮性卵巢癌Aurora-A/STK15蛋白的阳性表达率也明显高于正常卵巢组织(87.3%对6.9%,P<0.05),蛋白表达水平随病理分级和手术分期增加而增加,与病理分级密切相关(P<0.05),而与手术分期的相关性无统计学意义(P>0.05);在行理想肿瘤细胞减灭术并行术后辅助泰素化疗的病例组,Aurora-A/STK15蛋白高表达预后好,总的生存时间较低表达病例生存时间长(P<0.05);在除泰素以外的铂类药物化疗组,Aurora-A/STK15蛋白高表达则与不良预后相关,高表达者总的生存时间短(P<0.05)。结论Aurora-A/STK15在上皮性卵巢癌中存在异常表达,且与卵巢癌的分化程度以及手术联合辅助化疗的预后密切相关,有望成为卵巢癌个体化治疗疗效的预测因子。

STK15过表达对人食管癌细胞株KYSE150生长的影响

目的:探讨丝氨酸/苏氨酸激酶15(serine/threonine kinase 15,STK15)过表达对人食管癌细胞株KYSE150生长的影响。方法:采用脂质体法将pEGFP-C1-STK15真核表达载体转染人食管鳞癌细胞株KYSE150,构建STK15过表达的稳定细胞系(GFP-STK15),通过荧光显微镜和Western blotting检测STK15的表达。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察STK15过表达对体外肿瘤细胞生长的影响。通过流式细胞术分析STK15过表达对细胞周期和凋亡的影响。采用裸鼠致瘤实验观察STK15过表达对体内肿瘤细胞生长的影响。结果:pEGFP-C1-STK15质粒转染细胞后筛选得到稳定克隆,荧光显微镜显示GFP-STK15融合蛋白定位于细胞的中心体以及纺锤体,Western blotting可检测到GFP-STK15融合蛋白的表达。与对照细胞相比,GFP-STK15细胞系的体外生长能力明显增加;G0/G1期细胞百分率降低,细胞凋亡率减少;GFP-STK15细胞系接种组裸鼠肿瘤明显增大,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:STK15过表达能促进人食管癌KYSE150细胞的生长,提示STK15将可能成为治疗食管癌的新靶点。

丝氨酸/苏氨酸激酶15在甲状腺乳头状癌诊治中的意义

目的:探讨甲状腺乳头状癌组织中丝氨酸/苏氨酸激酶15(STK15)的表达及其作用。方法:采用免疫组织化学法检测71例甲状腺乳头状癌组织及其癌旁组织和45例结节性甲状腺肿组织中STK15基因的表达。结果:71例甲状腺乳头状癌组织中STK15基因的阳性表达率均为100.0%,癌旁组织STK15阳性表达率8.45%,结节性甲状腺肿组织中STK15阳性表达率为24.4%。在甲状腺乳头状癌组织中STK15的表达具有相关性(P<0.01)。结论:STK15基因在甲状腺乳头状癌组织中均为高表达,通过检测STK15可提高甲状腺乳头状癌的诊断率,对发现具有恶性潜能的结节性甲状腺肿有重要意义。

丝氨酸/苏氨酸激酶15在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的探讨丝氨酸/苏氨酸激酶(STK)15在人脑星形细胞瘤中表达及其意义。方法应用S-P免疫组化法对60例人脑星形细胞瘤患者(肿瘤组)和10例脑外伤手术患者(对照组)的脑组织标本中STK15的表达进行检测。结果对照组正常脑组织中未见STK15阳性表达,而肿瘤组脑组织标本中STK15阳性表达率为55%。星形细胞瘤低级别亚组STK15阳性表达率为10%,中级别亚组为52.6%,高级别亚组为100%,三亚组间差异均有统计学意义(均P<0.01)。Spearman等级相关分析显示,STK15的表达强度和星形细胞瘤病理分级程度呈正相(r=1.000,P<0.05)。结论人脑星形细胞瘤中STK15的表达明显增高,且病理分级越高,STK15的表达水平越高。STK15可能成为脑星形细胞瘤治疗的新靶点。

GDF-15治疗对肝癌化疗敏感性影响的分析

目的探讨生长分化因子-15（GDF～15）治疗对于肝癌化疗敏感性的影响。方法通过采用免疫组织化学方法SP分别检测行GDF-15治疗与未行GDF-15治疗的肝癌组织中丝氨酸，苏氨酸蛋白激酶受体（RSK）及多药耐药相关蛋白（NRPI）的表达情况，从而探讨GDF-15对于肝癌化疗敏感性的影响。结果在20例行GDF-15治疗组，其丝氨酸，苏氨酸蛋白激酶受体（RSK）表达强度为：0．4358±0．01246，15例未行GDF-15治疗组，其丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶受体（RSK）表达强度为：0．3012±0．01278，前者表达强度明显高于后者（P〈0．05），因此GDF-15治疗组，其疗效好于非GDF-15治疗组；在20例行GDF-15治疗组，其多药耐药相关蛋白（MRPI）表达强度为：0．3574±0．02159，15例未行GDF-15治疗组，其多药耐药相关蛋白（MRPI）表达强度为：0．3101±0．01108，前者表达强度明显高于后者（P〈0．05），因此GDF-15治疗组，其可增加肝癌对药物的耐药性。结论在行肝癌化疗时，加用GDF-15的治疗可增强机体抗肿瘤免疫，但是另一方面可以增加肝癌对化疗药物的耐药性，减低其敏感性，因此，对于肝癌的化疗，加用CDF-15的治疗可降低其效果。

MCM5和STK15在甲状腺乳头状癌的表达及其意义

目的探讨甲状腺乳头状癌组织中微小染色体维持蛋白5(MCM5)和丝氨酸/苏氨酸激酶15(STK15)的表达及其作用。方法采用免疫组织化学法检测45例甲状腺乳头状癌组织及其相应的部分癌旁组织和32例甲状腺腺瘤组织中MCM5和STK15蛋白的表达。结果 45例甲状腺乳头状癌组织中MCM5和STK15蛋白的阳性表达率均为100.0%,其中MCM5高表达率占84.4%,STK15高表达率占60.0%。MCM5和STK15在甲状腺腺瘤组织中几乎均为低表达,表达率分别为31.3%和18.8%。在甲状腺乳头状癌癌旁组织中,MCM5和STK15几乎不表达。在甲状腺乳头状癌组织中,MCM5与STK15的表达具有相关性(r=0.577,P<0.01)。结论 MCM5和STK15蛋白在甲状腺乳头状癌组织中均为高表达,两者联合检测可提高甲状腺乳头状癌的诊断率,对发现具有恶性潜能的甲状腺腺瘤有重要意义。

PLK1及STK15基因在结肠癌细胞中的表达及其特异性抑制剂对结肠癌细胞增殖的影响

目的研究保罗样激酶1(polo-like kinase 1,PLK1)及丝氨酸/苏氨酸激酶15(serine/threonine kinase15,STK15)mRNA及其蛋白在结肠癌细胞中的表达,以及其特异性抑制剂对结肠癌细胞增殖的影响。方法选取人宫颈癌Hela细胞和人结肠癌HCT-116细胞、HT-29细胞及CACO-2细胞,以β-actin为内参照,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PLK1 mRNA和STK15 mRNA的表达水平;采用Western blot法检测PLK1蛋白和STK15蛋白的表达水平;采用偶氮唑盐(MTT)法检测Dulbecco改良细胞培养基(DMEM培养基)、二甲基亚砜(DMSO)、SBE13(PLK1蛋白特异性抑制剂)或VX-680(STK15蛋白特异性抑制剂)处理后4种癌细胞的增殖活性。结果与Hela细胞比较,HCT-116细胞、HT-29细胞及CACO-2细胞的PLK1和STK15 mRNA及其蛋白的表达水平均较高(P<0.05)。①Hela细胞:与DMEM组比较,SBE13组、VX-680组及SBE13+VX-680组的增殖能力无明显变化(P>0.05)。②HCT-116细胞和HT-29细胞:与DMEM组比较,VX-680组和SBE13+VX-680组的增殖能力均降低(P<0.05),但SBE13组的差异无统计学意义(P>0.05)。③CACO-2细胞:与DMEM组比较,SBE13组、VX-680组及SBE13+VX-680组的增殖能力均降低(P<0.05)。结论 HCT-116、HT-29及CACO-2结肠癌细胞的PLK1 mRNA和STK15 mRNA及其蛋白的表达水平均高于Hela细胞,应用其特异性抑制剂可抑制部分结肠癌细胞系的生长。

癌源外泌体的制备及其对胃癌细胞STK15表达的影响

目的探讨胃癌来源外泌体对胃癌细胞的增殖作用及其对丝氨酸/苏氨酸激酶15(STK15)表达的影响。方法采用超速梯度离心法从胃癌MGC803细胞培养上清液中提取外泌体,通过透射电镜技术对其超微结构进行鉴定,然后用不同浓度的外泌体(0.05、0.10、0.20、0.50μg/μL)处理胃癌细胞,利用甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测其对细胞增殖活性的影响。利用免疫细胞化学方法分析外泌体对胃癌细胞中心体扩增激酶STK15表达的影响。结果胃癌MGC803细胞来源的外泌体具有特征性的盘状结构,由双层膜构成,直径为50～130nm。外泌体具有促进胃癌细胞增殖活性的作用(P<0.05)。随着时间的延长增殖活性也增强,12h细胞增殖活性从0.213上升到0.534(F=44.21,P=0.000),24h细胞增殖活性从0.251上升到0.998(F=66.06,P=0.000),36h细胞增殖活性从0.273上升到1.057(F=435.37,P=0.000),48h细胞增殖活性从0.342上升到1.414(F=195.30,P=0.000),外泌体以剂量依赖性-时间依赖性促进胃癌细胞增殖,其可能通过负载抗原上调STK15表达来影响细胞增殖进程。结论胃癌来源外泌体可能通过调节细胞STK15表达促进胃癌细胞增殖。