六月雪对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用研究

目的:研究六月雪对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法:将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组及六月雪组,每组10只,通过腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病肾病大鼠模型。干预6周后,比较各组大鼠的空腹血糖(FBG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)及24 h尿蛋白定量(24 h-UP);HE染色及PAS染色观察肾脏组织病理的变化,计算并比较各组病理评分;ELISA法检测各组大鼠肾脏组织中TGF-β1及IL-6的表达水平并进行比较。结果:六月雪组大鼠的FBG、BUN、Scr及24 h-UP较模型组降低(P<0.01);与模型组比较,六月雪组大鼠的肾脏病理改变有所减轻,病理评分降低(P<0.01);与模型组比较,六月雪组大鼠TGF-β1及IL-6表达有所下降(P<0.05)。结论:六月雪能够改善肾功能,减少尿蛋白,减轻肾脏损伤,其肾脏保护作用可能与TGF-β1及IL-6的表达下调有关。

六月雪-葎草药对指纹图谱研究及其多指标成分的定量分析

目的建立六月雪-葎草(以下简称“雪葎”)药对共煎液HPLC指纹图谱,并进行多成分定量分析,用于评价“雪葎”药对的质量。方法采用Agilent EC-C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,4μm)进行检测;以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速为0~30 min:1.0 mL·min^(-1),30~65 min:0.6 mL·min^(-1);检测波长为350,240 nm;柱温为30℃。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012.1版)》对“雪葎”药对共煎液进行相似度评价,并对其中4个指标成分进行定量分析,并将配伍前指标性成分的含量与配伍后相比。结果在特征指纹图谱研究中,共标定12个共有峰,以4号峰为参照峰,10批“雪律”药对共煎液与共有模式对照图谱之间有良好的相似性,相似度均在0.9以上;在建立的色谱条件下,4个成分具有良好的线性关系,平均加样回收率在98.7%~99.6%之间,RSD均小于3%(n=6)。10份“雪葎”药对共煎液中车叶草苷酸、木犀草苷、芦丁和大波斯菊苷含量范围分别为0.2494~0.4028 mg·g^(-1),0.1091~0.2389 mg·g^(-1),0.0459~0.0768 mg·g^(-1),0.0914~0.1737 mg·g^(-1)。雪葎药对配伍后,共煎液中木犀草苷、芦丁和大波斯菊苷含量均降低,降低幅度分别为296.40%,47.86%和25.02%,而车叶草苷酸的含量增加,增长幅度为8.81%,其中大波斯菊苷的含量降低具有统计学意义(P<0.05),木犀草苷和芦丁的含量降低具有显著统计学差异(P<0.01)结论所建立的“雪葎”药对共煎液HPLC指纹图谱和含量测定方法灵敏度高、专属性强,可以用于该药对的质量控制,该方法也为其配伍机制和药理研究奠定了基础。

不同季节山地六月雪挥发油成分比较研究

目的 :分析不同季节山地六月雪挥发油成分 ,为其合理采收提供实验依据 ;方法 :水蒸气蒸馏法提取山地六月雪地上部分挥发油。用气相色谱 质谱法对化学成分进行分离鉴定 ,并用面积归一化计算各成分相对含量。结果 :从深秋季节的山地六月雪鉴定出 43个组分 ,占挥发油总量的 78.91% ;含量在 3 %以上的组分有甲基亚麻酸酯 (4.14 % ) ;库贝醇 (5.97% ) ;1b ,5,5,6a tetramethyl octahydro 1 oxa cyclopropa[a]inden 6 one (7.3 2 % ) ;2 甲氧 4 乙烯基苯酚 (10 .87% ) ;δ 9(10 ) 四氢广木香内酯 1 酮 (3 5.51% ) ;夏季的山地六月雪鉴定出 72个组分 ,占挥发油总量的 79.88% ;含量在 3 %以上的组分有石竹烯 (3 .3 2 % ) ;乙苯 (3 .52 % ) ;3 己烯 1 醇 (4.54% ) ;2 甲氧 4 乙烯基苯酚 (6.52 % ) ;5 丙酰基 2 氯 苯乙酸甲酯 (8.54% ) ;大根香叶酮D(12 .3 1% )。结论 :2 ,2 二甲基 6 亚甲基 环己烷基丙醇、2 甲氧基 4 乙烯基苯酚、3 ,7 二甲基 1,6 辛二炔 3 醇、库贝醇、二十二烷、二十碳烷等相同成分可以作为该植物的指纹性成分 ;不同季节采集的生药材 。

白马骨的化学成分

目的：研究白马骨（Serissa serissoides）的化学成分．方法：应用硅胶枉层析和Sephadex LH-20枉层析等进行分离纯化，通过波谱解析和理化鉴别进行结构鉴定.结果：分离得到10个化合物，分别为：乌苏酸（ursolic acid，Ⅰ）、左旋丁香树脂酚（（-）-syringaresinol，Ⅱ）、右旋杜仲树脂酚（（＋）-medioresinol，Ⅲ）、左旋丁香树脂酚葡萄糖苷（（-）-syringaresinol-4-O-β-D-glucopyranoside，Ⅳ）、去乙酰车叶草酸（10-deacetylasperulosidic acid，Ⅴ）、鸡屎藤苷酸（paederosidic acid，Ⅵ）、牡荆素（vitexin，Ⅶ）、胡萝卜苷（daucosterol，Ⅷ）和D-甘露醇（D—mannitol，Ⅸ）、阻谷甾醇（β-sitosterol，X）。结论：化合物Ⅰ～Ⅸ均为首次从该植物中分得。

六月雪全草化学成分研究

目的：研究六月雪全草的化学成分。方法：采用硅胶柱层析、反相中压柱色谱和制备液相色谱等方法进行分离纯化,运用波谱数据并结合文献鉴定化学结构。结果：从六月雪全草中分离得到了11个化合物,分别鉴定为：3-羟基-1,2-二甲氧基蒽醌（1）、1,2,4-三甲氧基-3-羟基-6-甲基蒽醌（2）、大黄素（3）、松脂素（4）、杜仲树脂酚（5）、（7S,8R）-苯并二氢呋喃新木脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷（6）、羽扇豆醇（7）、淫羊藿次苷F2（8）、没食子酸（9）、咖啡酸甲酯（10）、4-羟基-3-甲氧基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷（11）。结论：其中,化合物1～3、6～11为首次从该属植物中分离得到,化合物4、5为首次从该植物中分离得到。

白马骨化学成分研究

目的:研究白马骨的化学成分。方法:采用硅胶和凝胶柱色谱等技术分离,根据波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。结果:得到8个单体化合物:棕榈酸(1),科罗索酸(2),胡萝卜苷(3),乌索烷-12-烯-28-醇(4),齐墩果酸(5),乌索酸(6),对羟基间甲氧基苯甲酸(7)和2,6-二甲氧基-对苯醌(8)。结论:除化合物5外,其余化合物皆为首次从该属植物中分离得到。

二味中草药对实验性胃黏膜损伤的保护作用

目的:研究二味中草药(六月雪、黄花倒水莲)对小鼠胃黏膜损伤的作用。方法:无水乙醇法、阿司匹林法、水浸应激法和利血平法制备小鼠胃黏膜损伤模型,测定药后胃黏膜损伤面积。结果:二味中草药对四种胃黏膜损伤均有非常显著的抑制作用。结论:二味中草药对实验性胃黏膜损伤具有保护作用。

黄花倒水莲与六月雪中6种金属元素的测定

本文采用火焰原子吸收光谱法对中草药黄花倒水莲、六月雪中茎部的Ca、Zn、Mn、Mg、Fe、Cu的含量进行了测定,方法简单、精密度好,回收率在93%—100%之间,结果令人满意。

六月雪木脂素成分的研究

目的研究六月雪Serissa japonica(Thunb.)Thunb.木脂素成分。方法六月雪70%乙醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶、反相中压和制备液相色谱进行分离纯化,所得化合物结构经波谱数据和相关文献鉴定。结果从中分离得到12个化合物,分别鉴定为(+)-异落叶松脂素(1)、(+)-环橄榄树脂素(2)、(-)-vladinol D(3)、(-)-(7'S,8S,8'R)-4,4'-二羟基-3,3',5,5'-四甲氧基-7',9-环氧木脂烷-9'-醇-7-酮(4)、(-)-wikstrone(5)、(+)-8-羟基松脂酚(6)、(+)-8-羟基杜仲树脂酚(7)、(+)-表丁香树脂酚(8)、(+)-表松脂醇(9)、(-)-丁香树脂酚(10)、(-)-(7R,7'R,7″R,8S,8'S,8″S)-4',4″-二羟基-3,3',3″,5-四甲氧基-7,9':7',9-双氧环-4,8″-氧-8,8'-倍半新木脂烷-7″,9″-二醇(11)、(-)-(7R,7'R,7″R,8S,8'S,8″S)-4',4″-二羟基-3,3',3″,5,5'-五甲氧基-7,9':7',9-双氧环-4,8″-氧-8,8'-倍半新木脂烷-7″,9″-二醇(12)。结论化合物10为首次从该植物中分离得到,其他均为首次从白马骨属植物中发现。

六月雪水提取物对实验性胃黏膜损伤的修复作用

目的研究六月雪水提取物对实验性胃黏膜损伤的修复作用。方法采用无水乙醇胃饲诱发急性胃黏膜损伤大鼠模型并于伤后给药2 d处死大鼠,测定给药后胃黏膜损伤面积,病理组织学观察其修复情况。结果六月雪水提取物对大鼠乙醇诱发的胃黏膜损伤有明显的修复作用。结论六月雪水提取物对实验性胃黏膜损伤有明显的修复作用。

六月雪化学成分研究

从六月雪中分离得到5个化合物,利用波谱等方法鉴定为5-乙酰基-6-羟基-2-异丙烯苯并呋喃(5-Acetyl-6-hydroxy-2-isopropenylbenzofuran,1);5-乙酰基-6-羟基-2-丙酮苯并呋喃(5-Acetyl-6-hydroxy-2-acetonepenylbenzofuran,2);邻苯二甲酸二乙酯(Diethyl Phthalate,3);β-谷甾醇(β-sitosterol,4);豆甾醇(Stigmasterol,5),其中化合物(1),(2),(3)为首次从该植物中分得.

4味中药乙醇提取物祛黄褐斑作用的比较研究

目的比较白附子、银花、白芨、六月雪4味中药乙醇提取物祛黄褐斑作用的差异,选出作用最强的药材。方法以MTT法测定小鼠B16黑素瘤细胞增殖抑制率、酪氨酸酶活性、黑素含量变化;采用多重比较法进行统计分析。结果银花的浓度为62.5μg.mL-1,白芨、白附子各浓度(500、250、125、62.5μg.mL-1)均对B16鼠黑素瘤细胞增殖抑制作用较强。白附子的浓度为250μg.mL-1或银花的浓度为62.5μg.mL-1对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性抑制作用最佳。白附子的浓度为125μg.mL-1对黑素合成抑制作用最好。结论白芨与白附子可作为祛黄褐斑有效成分的候选药材。

六月雪提取物及其单体成分对LPS刺激RAW 264.7巨噬细胞分泌NO和IL-6的影响

目的研究六月雪提取物及单体对脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7巨噬细胞的抗炎作用,确定六月雪抗炎作用活性成分。方法体外细胞毒性试验建立调零组、对照组、给药组,采用噻唑蓝(MTT)法检测终浓度为10、20、40、80、100、200、300、400μg/mL的六月雪水提物,70%乙醇提取物及单体化合物对RAW 264.7细胞活性的影响;依据体外细胞毒性实验结果确定后续实验给药浓度,建立对照组、模型组、给药组,采用一氧化氮(NO)试剂盒法、酶联免疫吸附法(ELISA)检测六月雪提取物及其单体对LPS诱导RAW 264.7细胞分泌一氧化氮(NO)以及白细胞介素-6(IL-6)的影响。结果相较于对照组,模型组RAW 264.7细胞NO表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,六月雪70%乙醇提取物及lyx-1、lyx-4~5能抑制NO、IL-6的分泌(P<0.05)。结论六月雪抗炎活性成分主要存在于70%乙醇提取物中,主要抗炎成分是丁香树脂酚、(7′S,8S,8′R)-4,4′-二羟基-3,3′,5,5′-四甲氧基-7′,9-环氧木脂烷-9′-醇-7-酮、(7R,7′R,7′R,8S,8′S,8′S)-4′,4′-二羟基-3,3′,3′,5-四甲氧基-7,9′:7′,9-双氧环-4,8′-氧-8,8′-倍半新木脂烷-7′,9′-二醇。

白马骨挥发性化学成分研究

采用水蒸气蒸馏法从白马骨中提取其挥发性成分,再通过气-质联用(GC-MS)技术对所提取的挥发性成分进行分离鉴定,共测定了其中的43种成分。已成功鉴定的成分占样品总量的88.87%,其主要成分为脂肪酸,占挥发性成分总量的52.12%,其次为烯烃化合物12.66%,醇类化合物8.97%,酮类化合物5.90%,酯类化合物3.84%,烷烃化合物3.28%,醛类化合物2.10%。

白马骨根的化学成分研究

目的:研究白马骨(Serissa serissoides)根中的化学成分。方法:用80%乙醇回流提取,经反复硅胶、葡聚糖凝胶和聚酰胺柱层析分离纯化,通过理化性质测定以及核磁共振和红外波谱数据分析鉴定结构。结果:从该植物的叶中分离得到了7个化合物,分别鉴定为:(+)-松素脂(1)、(-)丁香脂素(2)、(+)-麦迪奥脂素(3)、(-)橄榄脂素(4)、β-谷甾醇(5)、齐墩果酸(6)、胡萝卜苷(7)。结论:化合物1、3、7为首次从白马骨植物的根部中分离得到,化合物2和4均是首次从该属植物中分离得到。

六月雪水提取物促凝血作用及机制的研究

目的研究六月雪水提取物促凝血的作用及机制。方法将清洁级SD大鼠60只随机分为生理盐水组、低剂量SSD组(1.5 g/kg六月雪水提取物组)、高低剂量SSD组(3.0 g/kg六月雪水提取物组)。采用体外血浆法测定体外凝血时间,采用凝血因子分析仪测定凝血酶时间、凝血酶原时间、优球蛋白溶解时间。结果与生理盐水对照组比较,低、高剂量SSD组的六月雪水提取物能明显缩短体外凝血时间(P<0.05,P<0.01)、血浆凝血酶时间(P<0.05,P<0.01)、凝血酶原时间(P<0.05,P<0.01),且明显延长优球蛋白溶解时间(P<0.05,P<0.01)。结论 1.5、3.0 g/kg的六月雪水提取物具有明显的促凝血作用,其作用机制可能与缩短血浆凝血酶时间、凝血酶原时间及升高优球蛋白溶解时间有关。

六月雪水提取物促凝血作用及机制的研究(Ⅱ)

目的研究六月雪水提取物促凝血作用及机制的影响。方法将清洁级SD大鼠45只,随机分为生理盐水对照组、低剂量六月雪水提取物组(1.5 g/kg)、高剂量六月雪水提取物组(3.0 g/kg)。采用凝血因子分析仪测定血浆纤维蛋白原、活化部分凝血活酶时间和凝血酶原时间国际标准比值。结果与生理盐水对照组比较,低、高剂量六月雪水提取物能显著升高血浆纤维蛋白原水平(P<0.05,P<0.01),且显著缩短活化部分凝血活酶时间(P<0.05,P<0.01)和凝血酶原时间国际标准比值(P<0.05,P<0.01)。结论六月雪水提取物具有明显的促进血液凝固作用,其作用机制可能与血浆纤维蛋白原升高、活化部分凝血活酶时间降低和凝血酶原时间国际标准比值降低有关。

解毒泄浊Ι号颗粒的薄层色谱鉴别研究

目的建立解毒泄浊Ι号颗粒的薄层色谱鉴别方法。方法采用薄层色谱法对本制剂中的土茯苓、六月雪、大黄、槐花进行定性鉴别。结果薄层色谱可鉴别出土茯苓、六月雪、大黄、槐花,且阴性无干扰。结论薄层色谱专属性强,方法简便可靠,重现性好,可用于解毒泄浊Ι号颗粒的鉴别。

六月雪水提取物对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的:研究六月雪水提取物对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法:采用四氯化碳(CC l4)、硫代乙酰胺(TAA)、扑热息痛(AAP)致小鼠急性肝损伤模型,测定小鼠血清ALT、AST活性。结果:六月雪水提取物可明显降低四氯化碳、硫代乙酰胺、扑热息痛致小鼠急性肝损伤模型血清ALT、AST活性。结论:六月雪水提取物对四氯化碳、硫代乙酰胺、扑热息痛所致小鼠实验性肝损伤有明显保护作用。

六月雪水提取物对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用

前期研究发现六月雪[Serissa serissoides（DC.）Druce]对乙醇诱导的大鼠胃黏膜损伤有良好的保护作用,因此进一步在细胞水平上探讨六月雪水提取物对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用。采用体外细胞培养人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞,将GES-1细胞用0～10%的乙醇孵育4～6 h,建立胃黏膜损伤模型。将参试GES-1细胞分为正常组、模型组、荆花胃康胶丸组、六月雪水提取物剂量组,正常组不做任何处理培养24 h,其他组加入一定浓度的乙醇处理一段时间后,加入含荆花胃康胶丸、六月雪水提取物各浓度剂量的培养基,正常组、模型组不加入药物,继续培养24 h,利用MTT检测各组GES-1细胞的活性。将MTT筛选后效果最佳的六月雪3个浓度以及荆花胃康胶丸组1个浓度分别定为高、中、低剂量组和阳性药物组,运用吖啶橙荧光染色法检测各组细胞凋亡情况,采用Western-Blot法检测各试验组碱性成纤维细胞生长因子（b FGF）蛋白的表达情况。结果表明,5%的乙醇孵育GES-1细胞4 h是造成胃黏膜损伤的最佳细胞模型,对GES-1细胞的抑制率达到40%。六月雪水提取物组中,60、70、80μg/m L 3个浓度效果最佳,与该组其他浓度比较差异显著（P〈0.05）;荆花胃康胶丸组中,在浓度为160μg/m L时细胞增殖最明显;均高于其他浓度的荆花胃康胶丸组;吖啶橙染色后显微镜下观察正常GES-1细胞形态均一、生长良好,而模型组大量细胞明显出现衰老或凋亡,荆花胃康胶丸组、六月雪水提取物组GES-1细胞生长情况明显好于模型组;模型组b FGF的蛋白表达水平明显高于正常组,差异显著（P〈0.05）;与模型组比较,六月雪水提取物组的b FGF蛋白表达水平明显增加,差异极显著（P〈0.01）;六月雪水提取物组与荆花胃康胶丸组比较,b FGF的表达水平差异也达极显著水平（P〈0.01）。说明六月雪水提取物可以保护乙醇损伤的人胃黏膜上皮系GES-1细胞,可以增加b FGF的蛋白表达水平,提高溃疡愈合速度。