5-羟色胺4受体调节剂对肝部分切除大鼠胃肠5-羟色胺分泌和肝再生的影响

目的探讨5-羟色胺4(5-HT4)受体调节剂(激动剂和抑制剂)对肝部分切除(PH)后大鼠胃肠道5-羟色胺(5-HT)和肝再生的影响。方法 60只成年SD大鼠PH后分为对照组、西沙必利(激动剂)组和GR113808(抑制剂)组3组;西沙必利组PH后每12h按10mg/kg体重的西沙必利灌胃,GR113808组PH后每12h按3mg/kg体重的GR113808腹腔注射;分别于PH后0h、24h、48h、72h计算肝/体重比,并取血液、胃、小肠和肝组织;用免疫组织化学技术显示胃肠中5-HT免疫阳性(5-HTIR)细胞,用图像分析系统测定胃肠5-HTIR细胞平均灰度,用酶联免疫吸附法(ELESA)检测血液中的5-HT,用银染技术显示肝细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)。结果与对照组比,1.西沙必利组胃肠中5-HTIR细胞数于PH后48～72h显著下降(P<0.05)、细胞的灰度于PH后24～72h显著上升(P<0.05),血中5-HT的含量于PH后24～72h显著上升(P<0.05),肝/体重比和肝组织AgNORs颗粒数在PH后48～72h显著增加(P<0.05);2.GR113808组在PH后24～72h期间,5-HTIR细胞数较对照组无显著性差异,但细胞的灰度显著下降(P<0.05或P<0.01),血中5-HT的含量显著下降(P<0.05或P<0.01),肝/体重比于48～72h显著下降(P<0.05或P<0.01),肝中AgNORs颗粒数于24～72h显著减少(P<0.05或P<0.01)。结论用5-HT4受体调节剂改变胃肠道5-HT的分泌量,可导致肝/体重比和肝细胞的转录活性发生相应的改变;胃肠道分泌的5-HT具有促进肝细胞增殖的作用。

戊己丸不同配伍方对结肠平滑肌细胞5-HT3,4受体及下游信号传导通路主要元件的影响

目的:观察戊己丸不同配伍方对平滑肌细胞5-羟色胺3,4受体及其下游信号通路的影响。方法:采用Bitar的方法分离培养大鼠结肠平滑肌细胞,α-actin免疫组化鉴定。应用免疫荧光法和钙离子探针检测5-羟色胺3,4受体表达及Ca2+浓度;应用ELISA试剂盒检测cAMP,PKA的浓度。结果:1号方和2号方对大鼠结肠平滑肌细胞5-羟色胺3,4受体的表达及Ca2+浓度均具有抑制作用(P<0.05);可显著下调平滑肌细胞的cAMP和PKA水平(P<0.05);2号方作用效果优于1号方。结论:戊己丸可抑制5-羟色胺3,4受体表达及下调Ca2+,cAMP,PKA水平。

威柏膏外敷治疗大鼠急性痛风性关节炎的实验研究

目的:探讨威柏膏外敷治疗急性痛风性关节炎模型大鼠的药效及可能的作用机制。方法:雄性Wist-ar大鼠随机分为正常对照组(A)、模型组(B)、秋水仙碱组(C)、威柏膏外敷组(D)、秋水仙碱加威柏膏组(E)。观察大鼠足功能变化,检测其受试关节周径、滑膜病理改变,以及关节滑膜组织中白介素1-β(IL-1β)、5-羟色胺(5-HT)和TLR-4(Toll-like receptor 4)的相对表达量。结果:与模型组比较,各治疗组均可减少炎性细胞浸润,并能显著降低IL-1β、TLR-4的表达。E组较D组降低IL-1β的表达更为显著;E组能显著降低5-HT的相对表达含量。结论:威柏膏外敷能下调大鼠急性痛风性关节炎的炎性反应,止痛消炎,其机制可能是降低了滑膜组织中IL-1β、TLR-4及5-HT的表达;威柏膏联合秋水仙碱比单用两者之一的效果更好。

痛泻要方对内脏高敏性肠易激综合征大鼠模型作用及机制

目的探讨痛泻要方对内脏高敏性肠易激综合征(IBS)大鼠模型外周神经调控作用及机制。方法选取无特定病原体级Wistar大鼠60只,性别不限,将大鼠随机分为正常组(n=15)与模型组[模空组(n=15)、阳性对照组(n=15)及治疗组(n=15)]。内脏高敏性IBS大鼠模型采用直肠扩张刺激法联合乳鼠与母鼠短暂分离法建立,造模结束第2周及第4周进行肠道敏感性评价。正常组、模空组给予0.9%氯化钠溶液10 ml/kg灌胃,1次/d;阳性对照组给予匹维溴铵混悬液13.5×10^(-3) g/kg灌胃,1次/d;治疗组给予痛泻要方水煎液2.03 g/kg灌胃,1次/d。各组均给药2周。给药2周后,禁食24 h,开腹取结肠,采用HE染色法观察结肠组织病理学改变;实时荧光定量聚合酶链反应检测结肠5-羟色胺4(5-HT_4)受体、细胞癌基因fos(c-fos)的mRNA表达;酶联免疫吸附法测定5-HT_4受体、c-fos的蛋白表达情况。结果与正常组比较,模空组黏膜间质中出现少量炎性浸润,浆膜层可见轻度水肿,炎性细胞增多;与模空组比较,治疗组大鼠结肠黏膜间质内炎性细胞浸润减少,而浆膜层中未见明显水肿,炎性细胞减少。与正常组比较,模空组、阳性对照组及治疗组结肠组织5-HT_4受体mRNA表达明显下降,c-fos mRNA表达明显上升,差异有统计学意义(P<0.05);与模空组比较,阳性对照组、治疗组结肠组织5-HT_4受体mRNA表达明显上升,c-fos mRNA表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,模空组、阳性对照组及治疗组结肠组织5-HT_4受体蛋白活性表达明显下降,c-fos蛋白活性表达明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)。与模空组比较,阳性对照组、治疗组结肠中5-HT_4受体蛋白表达明显上升,c-fos蛋白的表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论痛泻要方可能通过调节外周神经元敏感性,发挥其抑制IBS内脏高敏性的作用,进而起到治疗的作用。

5-HT_(2A)受体在延髓面神经后核内侧区偶联O_2^-的作用

目的探讨5-HT2A受体偶联O2-在延髓面神经后核内侧区(mNRF)对呼吸调控作用中的可能信号转导通路。方法制作新生大鼠体外延髓脑片标本,进一步参照Johnson方法制作mNRF“岛”,逐个移入mNRF“岛”于按预案加有试剂的带盖24孔板,24孔板置入5%CO2、37℃培养箱培养60min;取上清液100μl,用可见分光光度计(波长550nm)检测吸光度。分别观察5-HT、5-HT2A受体激动剂盐酸2,5-二甲氧基-4-碘苯基丙烷(DOI)对mNRF产生O2-的影响,及5-HT2A受体拮抗剂凯坦色林(Ketanserin)、抗氧化剂α-硫辛酸(α-LA)能否抑制5-HT及DOI在mNRF“岛”产生O2-的作用。结果5-HT的浓度曲线显示5-HT在1μmol/L时对mNRF作用达到峰值,随着浓度增加,O2-无显著增加;DOI浓度曲线显示DOI使mNRF产生的O2-达到峰值的浓度是20μmol/L;5-HT、DOI均可显著使mNRF产生的O2-增加(P<0.01),而5-HT、DOI之间无显著性差异,Ketanserin、α-LA可显著抑制5-HT、DOI在mNRF产生O2-。结论在mNRF通过激活5-HT2A受体,可显著产生O2-,提示5-HT2A受体对呼吸的调控可能与O2-相关。

Tetraethylammonium and 4-aminopyridine enhancement of 5-HT_3 receptor-mediated contraction of guinea pig ileum in vitro

目的：研究四乙铵（ＴＥＡ）、４氨基吡啶（４ＡＰ）对５ＨＴ３受体介导的豚鼠回肠收缩的影响．方法：等长换能器记录回肠收缩；［３Ｈ］ＧＲ６５６３０结合试验测定５ＨＴ３受体结合特性．结果：ＴＥＡ、４ＡＰ引起回肠收缩并增强自发活动，被阿托品或ＭＤＬ７２２２２阻断．ＴＥＡ、４ＡＰ增强２甲基５ＨＴ和５ＨＴ引起的收缩；逆转托烷司琼或Ｂｅｎｅｓｅｔｒｏｎ的抑制作用；不影响卡巴胆碱引起的收缩．ＴＥＡ、４ＡＰ不影响５ＨＴ３受体结合配体．结论：ＴＥＡ。

5-羟色胺_4受体在调节应激大鼠内脏敏感性中的作用

目的 研究束缚应激大鼠内脏敏感性及血浆 5 羟色胺 (5 HT)水平的改变 ,探讨 5 HT4受体激动剂和拮抗剂对束缚应激大鼠内脏高敏感性的影响及对血浆 5 HT水平的调节作用。方法 雄性Wistar大鼠 32只 ,分为对照组、应激组、5 HT4受体激动剂 (1mg/kg替加色罗 ,腹腔注射 )组和 5 HT4受体拮抗剂 (3mg/kgGR11380 8,腹腔注射 )组。以直肠内球囊扩张 (0 .4～ 1.2ml)时腹壁收缩情况代表其内脏敏感性 ,分别观察各组大鼠腹壁收缩情况 ;荧光法测定各组大鼠血浆 5 HT水平。结果 束缚应激2h后 ,应激组大鼠在各个容量直肠扩张时的腹壁收缩次数均较对照组显著增多 (0 .4ml:10 .0 0± 3.74比 6 .5 7± 1.4 0 ;0 .8ml:16 .75± 2 .92比 11.86± 3.4 4 ;1.2ml:19.5 0± 4 .2 4比 14 .86± 3.19;P <0 .0 5 ) ;应激组大鼠血浆 5 HT水平的增幅较对照组显著增高 (15 4 .6 0± 19.4 3比 97.75± 17.95 ,P <0 .0 0 1)。在 0 .4～ 1.2ml不同容量的直肠扩张时 ,5 HT4受体激动剂组的腹壁收缩次数依次为 5 .86± 2 .34、10 .5 7± 3.2 6、12 .14± 2 .91;5 HT4受体拮抗剂组依次为 3.80± 1.4 8、11.4 0± 3.2 9、12 .4 0± 2 .0 7,均较应激组显著减少 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。两者均明显降低了应激组大鼠血浆 5 HT水平的?