SerpinH1对小鼠肿瘤细胞增殖的影响

目的研究SerpinH1基因对肿瘤细胞增殖的影响。方法克隆SerpinH1基因,建立相关稳定转染细胞系,分为5组,分别为空白对照组,pcDNA3.1/V5-SerpinH1实验组,pcDNA3.1/V5对照组,pNKRY-SerpinH1-siRNA实验组,pNKRY-GFP对照组。应用BrdU渗入法,流式细胞术检测,WST-1方法分别测定细胞增殖情况,并建立肿瘤细胞模型,用体内试验验证SerpinH1对肿瘤细胞生长情况的影响。结果过表达基因的pcDNA3.1/V5-SerpinH1组肿瘤生长有抑制作用,而用siRNA干扰技术沉默基因表达的pNKRY-SerpinH1-siRNA组肿瘤生长有促进作用。结论SerpinH1基因能够抑制肿瘤细胞生长,提示SerpinH1具有抑制肿瘤的功能。

微小RNA-29a-3p靶向Serpinh1调控人胃癌细胞系BGC823增殖和侵袭的分子机制

目的探讨微小RNA(miR)-29a-3p影响Serpinh1对胃癌细胞的增殖与侵袭,并分析其相关的分子机制。方法检测miR-29a-3p在胃癌BGC823细胞中的表达水平,并评估miR-29a-3p在胃癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。通过Western blotting和荧光素酶分析证明,miR-29a-3p与Serpinh13’UTR直接结合。此外,采用MTT法、集落形成法和Transwell法在体外检测miR-29a-3p/Serpinh1轴对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果转染后miR-29a-3p模拟物(mimic)组中miR-29a-3p的表达明显高于miR-29a-3p阴性对照和空白组,转染miR-29a-3p mimic后BGC823细胞增殖能力显著降低。荧光素酶分析显示,miR-29a-3p通过靶向Serpinh13’-非翻译区(3’UTR)抑制Serpinh1的表达。此外,miR-29a-3p的过表达通过靶向Serpinh1显著抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移。结论MiR-29a-3p可靶向作用于Serpinh1,从而调控胃癌细胞的增殖与侵袭。

胎膜早破与SERPINH1基因多态性的相关性

目的探讨SERPINH1基因启动子区-656位点的单核苷酸多态性与胎膜早破的相关性。方法选择2010年1月—2012年10月在上海市第八人民医院明确诊断为早产胎膜早破(PPROM)患者56例(PPROM组,孕期<37周)、足月胎膜早破(TPROM)患者74例(TPROM组)、自然分娩的早产产妇67名(自然早产组,孕期<37周,未发生胎膜早破)和足月自然分娩的产妇134名(对照组)。抽取各组产妇外周血提取DNA,以聚合酶链反应扩增带有目的单核苷酸多态性的基因片段,并对产物进行测序。采用Taqman-MGB技术检测各组中SERPINH1基因-656位点单核苷酸多态性分布-656T和-656C基因型频率,采用相对荧光素酶活性测定检测热休克蛋白47(HSP47)mRNA在各组胎膜组织中的表达,采用Western印迹法检测HSP47蛋白在各组胎膜组织中表达,采用苏木精-伊红染色观察各组胎膜病理学变化情况。结果自然早产组、PPROM组和TPROM组中-656T基因型频率均显著高于对照组(P值均<0.05),而-656C基因型频率均显著低于对照组(P值均<0.05);HSP47mRNA、HSP47蛋白的表达水平均显著低于对照组(P值分别<0.05、0.01)。与对照组比较,自然早产组、PTPROM组和PPROM组的胎膜结构均发生了明显的改变,具体表现为胎膜连接层变宽,羊膜层纤维蛋白减少,部分滋养细胞发生凋亡,以及核碎裂等。结论 SERPINH1基因-656位点的单核苷酸多态性与TPROM的发生有关。

胃癌组织SERPINH1基因表达水平与其病理及预后关系研究

目的探讨胃癌组织SERPINH1基因表达水平与其病理及预后的关系;探讨SERPINH1在胃癌中的作用机制。方法收集TCGA和GEO公共数据库的胃癌数据,对胃癌组织样本的SERPINH1基因表达数据及其对应的临床信息进行病理指标的回顾性分析和生存分析;利用基因集富集分析(GSEA)方法分析与SERPINH1表达相关的功能性基因集合,探究SERPINH1的作用机制。结果 421例胃癌样本中,SERPINH1高表达组与低表达组之间肿瘤分级、N分期、转移无显著性差异(P>0.05),但SERPINH1高表达与肿瘤浸润深度(T分期)显著相关(P=0.049),表达水平越高,浸润深度越大。生存分析中,SERPINH1高表达患者的预后明显差于低表达患者[P<0.001,HR(95%CI):1.97(1.61~2.41)]。基因集富集分析发现,SERPINH1高表达的样本中富集了肿瘤信号通路、肿瘤微环境等相关基因集。69例胃癌及癌旁组织的基因表达芯片数据也提示,SERPINH1在胃癌组织中的表达明显升高(P<0.000 1),且具有较大诊断价值(AUC=0.988 1)。结论 SERPINH1基因高表达与胃癌的发生、发展相关,具有较大的临床意义。

丝氨酸蛋白酶抑制剂(SERPIN)家族在脑胶质瘤中的免疫相关性及预后价值的生物信息学分析

目的 分析丝氨酸蛋白酶抑制剂(SERPIN)基因家族在胶质瘤中的表达、免疫浸润情况及其与预后的相关性。方法通过利用R语言及多个生物信息学分析数据库,探究SERPIN家族35个基因在癌症基因组图谱(TCGA)胶质瘤肿瘤组织中的变化;选择差异显著的基因,在基因表达谱动态分析(GEPIA)数据库中分析各候选基因高、低表达肿瘤患者的总生存期(OS)和无病生存期(DFS)差异,并进一步筛选最具有预后评价价值的基因;通过肿瘤免疫评估资源2.0(TIMER2.0)数据库及肿瘤微环境单细胞转录组学(TISCH)数据库分析基因在泛癌水平表达、在肿瘤组织内细胞集群富集情况及巨噬细胞与胶质瘤内部SERPIN基因表达浸润的相关性,探究SERPIN与肿瘤免疫之间的关系。结果 SERPIN家族中多个基因的表达量均在胶质瘤中有不同程度的改变,且与胶质瘤分级,预后显著相关。其中丝氨酸蛋白酶抑制剂E2(SERPINE2)、丝氨酸蛋白酶抑制剂H1(SERPINH1)与高级别胶质瘤患者预后存在明显相关性,且二者可能通过对免疫细胞的不同交互途径参与肿瘤免疫微环境内部的免疫调控。结论 SERPIN基因家族的表达同胶质瘤患者的临床预后,肿瘤免疫活动存在密切联系,其中SERPINE2、 SERPINH1为效应显著的关键基因。