硫酸镁与干扰素α-1b雾化吸入联合NCPAP对重度毛细支气管炎患儿血清Eotaxin及PN表达的影响

目的:探讨硫酸镁与干扰素α-1b雾化吸入联合NCPAP对重度毛细支气管炎患儿血清Eotaxin及血清骨膜蛋白(Periostin,PN)表达的影响。方法:选取2018年1月~2020年9月收治的114例重度毛细支气管炎患儿,随机分为观察组和对照组,各57例。对照组患者予以经鼻持续气道正压通气(NCPAP)进行治疗,观察组患者在对照组的基础上给予硫酸镁和干扰素α-1b雾化吸入治疗,分析比较两组患儿临床疗效和治疗前后炎性因子、症状改善时间、血清Eotaxin及PN表达及肺功能情况。结果:治疗后,观察组临床治疗总有效率为92.98%显著高于对照组的73.68%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组喘憋、气促、咳嗽、肺部啰音、哮鸣音等症状改善时间显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患儿RR较治疗前显著降低,而VT、TPTEF/TE、TPEF/VE水平较治疗前显著升高,且观察组RR(50.31±5.25)次/min较对照组(56.44±5.42)次/min更低,VT(8.35±2.27)ml/kg、TPTEF/TE(36.48±4.52)%、TPEF/VE(34.38±4.25)%水平较对照组(7.42±2.18)ml/kg、(27.32±4.46)%、(25.49±4.15)%更高,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-4、IL-8、TNF-α水平较治疗前显著下降,且观察组IL-4(4.29±1.02)ng/L、IL-8(39.42±7.56)ng/L、TNF-α(70.22±18.54)ng/L水较对照组(5.36±1.43)ng/L、(47.35±7.82)ng/L、(80.15±19.32)ng/L下降更显著,差异有统计学意义(P<0.05)。两组血清Eotaxin及PN表达水平较治疗前显著下降,且观察组血清Eotaxin(14.32±3.16)ng/L及PN(238.14±20.45)ng/L水平较对照组(22.38±3.25)ng/L、(264.26±20.38)ng/L比较下降更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:硫酸镁与干扰素α-1b雾化吸入联合NCPAP可有效改善重度毛细支气管炎患儿喘憋、咳嗽等临床症状,缩短临床症状改善时间,提高治疗效果,降低机体炎性因子水平,改善气道炎性反应,促进肺功能恢复,阻止病情进展。

三七总苷对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞TGF-β_1、CTGF基因表达和蛋白分泌的影响

目的探讨三七总苷(PNS)对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)基因表达和蛋白分泌的影响,为临床上应用PNS延缓肾衰竭的进展提供理论依据.方法无菌条件下收集40份尿毒症病人血清和20例正常人血清.应用相差显微镜、扫描电镜结合细胞角蛋白18(CK-18)免疫组化鉴定人肾小管上皮细胞株(HK-2).应用ELISA方法检测HK-2细胞培养上清液TGF-β1蛋白分泌量;Western Blot方法检测CTGF的蛋白表达;RT-PCR方法检测TGF-β1、CTGFmRNA表达.结果 10%尿毒血清组与正常对照组相比,TGF-β1、CTGF基因表达和蛋白分泌量均增高(P<0.01),而PNS 400～800 mg·L-1可恢复尿毒血清所诱导的TGF-β1基因表达(P<0.01),200～800 mg·L-1可恢复尿毒血清诱导的TGF-β1蛋白分泌(P<0.01);200～800 mg·L-1可恢复尿毒血清所诱导的CTGF基因表达和蛋白分泌(P<0.01).结论在体外实验中,PNS可在一定程度上降低尿毒血清诱导的HK-2细胞TGF-β1、CTGF基因表达和蛋白分泌量,减少细胞外基质聚集,从而延缓人肾小管-间质纤维化的进展,有望成为一种能有效延缓肾纤维化进展的中药.

三七总苷对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞外基质分泌及降解的影响

目的探讨三七总苷(PN S)对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞外基质(ECM)分泌及降解的影响,为临床上应用PN S延缓慢性肾衰竭(CRF)的进展提供理论依据。方法无菌条件下收集40份尿毒症病人血清和20例正常人血清,用相差显微镜、扫描电镜结合细胞角蛋白18(CK-18)免疫组化鉴定人肾小管上皮细胞株HK-2。应用消化法检测HK-2细胞培养上清液中羟脯氨酸水平,EL ISA方法检测HK-2细胞培养上清液中纤连蛋白(FN)、金属蛋白酶-1(MM P-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(T IM P-1)蛋白分泌量,RT-PCR方法检测MM P-1和T IM P-1 mRNA表达。结果10%尿毒血清组与正常对照组相比,HK-2细胞培养上清液中胶原蛋白和FN分泌量显著增高,MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值降低,而PN S 400、600、800 m g/L可使尿毒血清增加的HK-2培养上清液胶原蛋白分泌量回降;200、400、600、800 m g/L可使FN分泌量回降;100、200、400、600、800m g/L可使尿毒血清降低的MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值回升。结论在体外实验中,PN S可降低尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞胶原蛋白及FN的分泌,升高MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值,促进ECM降解,从而有效延缓人肾小管-间质纤维化的进展。

抗肾小球基底膜抗体肾炎动物模型的建立及应用研究

目的:建立稳定的抗小鼠肾小球基底膜(GBM)抗体诱导的小鼠肾炎模型,用于相关药物药效学及机制的研究。方法:1制备含抗小鼠GBM抗体的兔血清。分离获得小鼠GBM组分,制备成冻干粉免疫家兔,得到含抗小鼠GBM抗体的兔血清。2建立抗小鼠GBM抗体诱导的小鼠肾炎模型。将兔Ig G与弗氏完全佐剂(CFA)充分乳化,于C57BL/6小鼠右脚脚掌注射进行致敏,3 d后尾静脉注射兔血清进行再次免疫。3肾炎小鼠口服肾上腺皮质激素类药物醋酸泼尼松龙(PNS)进行干预治疗,口服给药14 d,2 mg·kg-1·d-1,观察小鼠蛋白尿、蛋白肌酐比、血生化的变化。结果:注射含抗小鼠GBM抗体的兔血清(200μl,300μl,500μl),成功建立小鼠肾炎模型,模型小鼠蛋白尿及血清尿素氮(BUN)水平显著升高,血清白蛋白(ALB)水平明显降低,具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);PNS治疗后,能明显降低肾炎小鼠蛋白尿水平、蛋白肌酐比及BUN水平(P<0.05,P<0.01),缓解小鼠肾炎症状。结论:含抗小鼠GBM抗体的兔血清能够成功诱导小鼠肾炎模型,醋酸泼尼松龙能够有效发挥治疗作用,证实该模型可用于相关药物药效学及机制的研究。