基于TGF-β_(1)/Smads信号通路探讨大蒜素对2型糖尿病大鼠肾纤维化的影响

目的:探讨大蒜素对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠肾纤维化和TGF-β_(1)/Smads信号通路的影响以及大蒜素对T2DM所致肾纤维化的作用机制。方法:将50只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和大蒜素低剂量组(5 mg/kg)、大蒜素中剂量组(10 mg/kg)、大蒜素高剂量组(20 mg/kg),每组10只。正常对照组大鼠常规饲养,其余各组采用高糖高脂饲料喂养加腹腔注射链尿佐菌素的方法复制T2DM大鼠模型。造模完成后,大蒜素各剂量组大鼠腹腔注射相应剂量大蒜素溶液,正常对照组及模型组腹腔注射等剂量生理盐水,每天1次,共4周。干预4周后,测定各组大鼠空腹血糖水平,称量体质量;生化分析法测定24h尿蛋白(24 hour urine protein,24h UP)、血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)表达水平;苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)进行肾组织病理学检查;Masson染色进行肾组织纤维化检查并计算胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF);免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)法检测肾组织中转化生长因子β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))、磷酸化Smad2(phospho-Smad2,p-Smad2)、p-Smad3蛋白表达以及Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ,ColⅢ)表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肾小球增大、系膜基质增厚、肾小管上皮细胞空泡变性、炎性细胞浸润,大鼠空腹血糖、24h UP、BUN、SCr、CVF、TGF-β_(1)、p-Smad2、p-Smad3、Col I、ColⅢ均升高,体质量下降;与模型组比较,大蒜素中、高剂量组大鼠空腹血糖水平降低、体质量升高(P<0.05),24h UP和血清BUN、SCr水平降低(P<0.01),病理学改变改善;与模型组比较,大蒜素低、中、高剂量组大鼠肾组织纤维化改善,肾组织CVF降低(P<0.01);与模型组比较,大蒜素中、高剂量组大鼠肾组织TGF-β_(1)、p-Smad2、p-Smad3、Col I、ColⅢ蛋白表达下调(P<0.01)。结论:大蒜素对T2DM大鼠肾纤维化具有抑制作用,其机制可能与大蒜素调控TGF-β_(1)/Smads信号通路进而抑制细胞外基质生成有关。

补肾活血方对复发性流产患者血清VEGF、HIF-1α、TGF-β_(1)、sflt-1影响研究

目的 研究补肾活血方对APL阳性RSA患者外周血VEGF、HIF-1α、TGF-β_(1)、sflt-1、miR-423-5p蛋白表达量影响。方法 选取APL阳性RSA患者60例,分别于孕前给予药物调理。其中观察组服用补肾活血方,对照组服用肠溶阿司匹林,均治疗3个月。两组治疗前后分别检测血清VEGF、HIF-1α、TGF-β_(1)、sflt-1、miR-423-5p蛋白表达及中医证候积分。结果 两组治疗后VEGF蛋白表达均显著升高;与对照组比较,观察组VEGF蛋白表达量显著高于对照组;两组治疗前后,HIF-1α蛋白表达量均无显著性差异;治疗后两组TGF-β1蛋白表达显著升高,与对照组比较,观察组TGF-β1蛋白表达显著升高;治疗后两组sflt-1蛋白表达显著降低;与对照组比较,观察组sflt-1蛋白表达显著降低。两组治疗后miR-423-5p相对表达量均降低,观察组优于对照组(P<0.05)。观察组中医证候疗效比较,治疗组优于对照组(P<0.05)。结论 补肾活血方应用于RSA患者孕前调理,可以通过上调VEGF、TGF-β_(1)蛋白表达,下调sflt-1、miR-423-5p蛋白表达等途径,改善APL对子宫内膜的不良影响;同时可有效降低中医证候积分,从而降低再次妊娠后流产的发生率。

基于TGF-β_(1)/Smads信号通路的中药防治支气管哮喘研究进展

基于TGF-β_(1)/Smads信号通路对支气管哮喘的影响及中药干预作用研究进展进行综述,指出转化生长因子β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))对哮喘发病过程中气道炎症与气道重塑的病理基础发挥作用,TGF-β_(1)对气道炎症具有双重作用,既可通过刺激嗜酸性粒细胞促进气道炎症发生,又可通过刺激肥大细胞产生白细胞介素6,抑制气道炎症;此外,因TGF-β_(1)具有超强的致纤维化作用,可促进成纤维细胞生长,引起气道重塑,中药可通过调控TGF-β_(1)/Smads信号通路,从而干预哮喘发作,缓解哮喘临床症状。

苗药紫金牛、铁扫帚组方干预慢性阻塞性肺疾病大鼠气道Wnt通路RhoA基因与TGF-β_(1)、MMP-9的相关性研究

目的研究苗药紫金牛、铁扫帚组方干预COPD大鼠气道Wnt通路RhoA基因与TGF-β_(1)、MMP-9的相关性,从而探讨苗药紫金牛、铁扫帚配方干预COPD大鼠气道重塑的调控机制。方法构建COPD大鼠模型,进行气道成纤维细胞的培养,采用ELISA检测气道成纤维细胞上清液中TGF-β_(1)、MMP-9细胞因子的含量,并运用Westernblot方法检测气道成纤维细胞中RhoA基因蛋白的表达,从而研究RhoA基因表达与TGF-β_(1)、MMP-9细胞因子的相关性及苗药紫金牛、铁扫帚的影响。结果与正常组相比,COPD大鼠模型组气道成纤维细胞上清液中TGF-β_(1)、MMP-9的含量升高,同时RhoA基因在也是表达增高。经苗药紫金牛、铁扫帚治疗后,细胞因子TGF-β_(1)、MMP-9与RhoA基因的表达则降低,从而得出TGF-β_(1)、MMP-9细胞因子与RhoA基因呈正相关。结论COPD大鼠气道成纤维细胞上清液中TGF-β_(1)、MMP-9细胞因子是COPD大鼠气道重建中成纤维细胞增殖的关键因子。而RhoA基因对组织纤维化有关,且能调控细胞因子TGF-β_(1)、MMP-9。苗药紫金牛、铁扫帚能够抑制炎性因子TGF-β_(1)、MMP-9的表达及WNT通路的RhoA基因的增殖,从而寻求苗药紫金牛、铁扫帚配方干预COPD气道重塑的机制。

中医药调控TGF-β_(1)/Smads通路治疗咳嗽变异性哮喘的研究进展

咳嗽变异性哮喘(CVA)是支气管哮喘的一种特殊类型,以咳嗽为主要临床表现。TGF-β_(1)/Smads信号通路被证实可以调控气道高反应性、气道重塑与气道纤维化,参与CVA的发生和发展。中医药治疗CVA具有显著优势,其作用机制亦多涉及TGF-β_(1)/Smads信号通路,但内容分散、缺乏梳理。

针刺联合穴位贴敷治疗中晚期食管癌疗效观察及对楔状组织中TGF-β_(1)/Smad信号通路的影响

目的:观察针刺联合穴位贴敷治疗中晚期食管癌的临床疗效及对楔状组织中转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))/胰腺癌缺失因子(Smad)信号通路的影响。方法:将90例中晚期食管癌患者随机分为对照组与治疗组各45例。对照组给予常规放化疗治疗,治疗组在对照组基础上给予针刺联合穴位贴敷。观察2组治疗后临床疗效,不良反应及随访3年生存率;以及治疗前后简体中文版生活质量评估表(QLQ-C30)、SF-36健康调查量表[躯体功能(PCS)、社会功能(PSS)和情绪角色(MCS)]评分,血清肿瘤标志物[糖类抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、糖类抗原125(CA125)]、血清胃肠激素[血管活性肠(VIP)、生长抑素(SOM)、胃动素(MTL)、5-羟色胺(5-HT)]、楔状组织上清液中TGF-β_(1)/Smad信号通路(TGF-β_(1)RⅠ型受体、TGF-β_(1)RⅡ型受体、Smad4、Smad7)水平。结果:治疗后,治疗组疾病控制率为95.24%,对照组为73.17%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗1、2个疗程,2组PCS、PSS、MCS评分均较治疗前升高(P<0.05),且治疗组相同时间点PCS、PSS、MCS评分均高于对照组(P<0.05)。治疗1、2个疗程,治疗组相同时间点QLQ-C30评分均低于对照组(P<0.05),但对照组QLQ-C30评分治疗前后比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗1、2个疗程,2组CA19-9、CEA(对照组第1疗程CEA指标除外)、CYFRA21-1、CA125水平均较治疗前降低(P<0.05),且治疗组相同时间点4项指标均低于对照组(P<0.05)。治疗1、2个疗程,2组VIP、SOM、5-HT水平均较治疗前降低(P<0.05),MTL水平均较治疗前升高(P<0.05);且治疗组相同时间点VIP、SOM、5-HT水平均低于对照组(P<0.05),MTL水平均高于对照组(P<0.05)。治疗1、2个疗程,治疗组TGF-β_(1)RⅠ型受体、TGF-β_(1)RⅡ型受体、Smad4和Smad7水平均较治疗前降低(P<0.05),且相同时间点均低于对照组(P<0.05);对照组TGF-β_(1)RⅠ型受体、TGF-β_(1)RⅡ型受体、Smad7水平治疗前后差异均无统计学意义(P>0.05);对照组仅有Smad4水平于治疗2个疗程后明显低于治疗前(P<0.05)。随访3年,治疗组生存率为78.57%,对照组为56.10%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,治疗组骨髓抑制、皮肤毒性反应、消化道反应发生率低于对照组(P<0.05);2组膀胱、肾、心功能损伤发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:针刺联合穴位贴敷可明显提高中晚期食管癌放化疗患者的生存时间和生活质量,改善血清肿瘤标志物和胃肠激素水平,且安全性较高,其作用机制可能与调节TGF-β_(1)/Smad信号通路有关。

白芍总苷通过Wnt/β-catenin和TGF-β_(1)/Smad3信号串联干预高尿酸血症肾损害大鼠的作用机制

目的:观察白芍总苷(TGP)对高尿酸血症肾损害(HN)大鼠肾脏的保护作用及其对Wnt/β-catenin和TGF-β_(1)/Smad3信号通路的影响。方法:50只雄性SPF级SD大鼠,随机分为正常组、模型组、TGP低剂量组(100 mg/kg)、TGP高剂量组(300 mg/kg)、别嘌醇组(27.0 mg/kg),每组10只。每天7∶00和20∶00,采用腺嘌呤+氧嗪酸钾诱导HN模型,持续3周。每天中午12∶00按剂量给予相应药物,持续5周。检测各组大鼠体质量、右肾质量、血清尿酸、肌酐、尿素氮水平;HE染色观察大鼠肾小管病理改变情况;Masson染色观察肾脏胶原纤维沉积情况;尿酸盐染色观察肾小管尿酸盐沉积情况;免疫荧光法测定大鼠肾小管DKK1、β-catenin、TGF-β_(1)和Smad3蛋白的表达;实时荧光定量PCR测定大鼠肾脏DKK1、β-catenin、GSK3β、TGF-β_(1)和Smad3 mRNA的表达水平。结果:高剂量TGP能降低HN模型大鼠血清中的尿酸、肌酐和尿素氮水平(P<0.05),改善肾小管病理损伤和纤维化程度,减少尿酸盐沉积,降低肾小管DKK1、β-catenin、TGF-β_(1)和Smad3蛋白的荧光表达(P<0.05,P<0.01),降低肾脏DKK1、GSK3β和TGF-β1 mRNA的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:TGP可改善HN模型大鼠的肾脏损伤程度,其机制与抑制Wnt/β-catenin和TGF-β1/Smad3信号通路串联相关。

血清TNF-α、TGF-β_(1)、IL-6水平与乳腺癌患者临床分期及淋巴结转移的关系研究

目的研究血清炎性因子与乳腺癌患者临床分期及淋巴结转移的关系。方法本研究采用前瞻性研究方法,以我院2022年1月~2023年6月诊断并进行治疗的80例乳腺癌患者作为研究对象,另选取同期在我院进行体检的无肿瘤疾病人群80例作为对照组,比较两组研究对象的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))、白细胞介素-6(IL-6)水平,分析不同特征乳腺癌患者的TNF-α、TGF-β_(1)、IL-6水平差异,研究TNF-α、TGF-β_(1)、IL-6与乳腺癌患者临床分期及淋巴结转移的相关性。结果观察组的TNF-α、IL-6水平显著高于对照组(P=0.000),TGF-β_(1)水平显著低于对照组(P=0.000);不同年龄患者的TNF-α、TGF-β_(1)、IL-6水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),不同肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移、分化程度及分子亚型患者的TNF-α、TGF-β_(1)、IL-6水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,乳腺癌患者的分化程度、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤大小及分子亚型与TNF-α、IL-6水平呈正相关,与TGF-β_(1)水平呈负相关。TNF-α、TGF-β_(1)、IL-6联合诊断对乳腺癌的诊断准确度(91.88%)显著高于单独诊断(均<70%);联合检测的ROC曲线下面积显著高于单独检测,TNF-α、TGF-β_(1)、IL-6对于乳腺癌的诊断截断值分别为42.11ng/L、299.36mg/L、22.36ng/L。结论血清TNF-α、TGF-β_(1)、IL-6与乳腺癌患者临床分期及淋巴结转移显著相关,可作为临床诊断乳腺癌的重要依据。

丹参酮ⅡA磺酸钠调控Nox4/TGF-β_(1)/p-Smad通路对高糖诱导人肾小球系膜细胞损伤的保护作用

目的:研究丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对高糖诱导的人肾小球系膜细胞(HGMC)损伤的保护作用及机制。方法:利用培养的HGMC为研究对象,实验分组为NG组:正常糖组(5.5 mmol/L葡萄糖)、NG+Mnt组:渗透压调节组(5.5 mmol/L葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇)、HG组:高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、HG+低剂量STS组(2.5μg/ml)、HG+中剂量STS组(5μg/ml)、HG+高剂量STS组(10μg/ml)。各组HGMC培养48 h后,使用CCK-8法检测各组HGMC活力,EDU-488检测各组HGMC增殖水平;2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)检测各组HGMC内活性氧(ROS)含量,分别用WST-8法、比色法、ABTS快速法检测各组HGMC内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平及总抗氧化能力(T-AOC);ELISA法检测各组HGMC内纤维化指标转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原蛋白(Collagen Ⅳ)含量,Western blot法检测各组HGMC内VADPH氧化酶4(Nox4)、TGF-β_(1)、p-Smad 3、CollagenⅣ蛋白表达水平。结果:HG组HGMC细胞增殖率、ROS、MDA、TGF-β_(1)、Collagen Ⅳ、FN含量及Collagen Ⅳ、TGF-β_(1)、p-Smad3和Nox4蛋白表达水平明显高于NG组、NG+Mnt组、HG+各剂量STS组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);HG组HGMC内SOD水平和T-AOC低于NG组和NG+Mnt组、HG+各剂量STS组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与HG+低剂量STS组比较,HG+中剂量STS组Collagen Ⅳ水平明显降低,HG+高剂量STS组Collagen Ⅳ、FN、p-Smad3水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与HG+中剂量STS组比较,HG+高剂量STS组FN水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:STS通过Nox4/TGF-β_(1)/p-Smad通路改善高糖诱导的HGMC氧化应激和细胞外基质的沉积。

地塞米松对急性胰腺炎中TGF-β_(1)/Smad/ERK信号通路的影响

目的探讨地塞米松(DEX)对急性胰腺炎(AP)胰腺组织中转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))/Smad/细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)信号通路及miRNA-216a的影响。方法利用蛙皮素建立小鼠AP模型,实验分组为对照组、AP组和DEX组。检测3组小鼠血清中淀粉酶(AMY)与脂肪酶(LPS)的水平,利用RT-qPCR法检测胰腺组织中miRNA-216a mRNA的表达情况,利用Elisa法检测胰腺组织及血清中TGF-β_(1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL^(-1)β)的水平。利用Western Blot法检测各组胰腺组织中TGF-β_(1)、P-Smad3、Smad7与磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/细胞外信号调节蛋白激酶2(P-ERK1/ERK2)的蛋白表达情况。结果与对照组比较,AP组血清中AMY与LPS的水平显著升高,与AP组相比,DEX组血清中二者的水平均显著降低;酶联免疫吸附(Elisa)结果显示,与AP组相比,DEX组胰腺组织及血清中IL^(-1)β、TNF-α、TGF-β_(1)与IL-6的水平均显著降低;RT-qPCR结果显示,与对照组比较,AP组胰腺组织中miRNA-216a mRNA的表达显著升高,而与AP组比较,DEX组胰腺组织中miRNA-216a mRNA的表达显著降低;Western Blot结果显示,与对照组比较,AP组胰腺组织中TGF-β_(1)、P-Smad3及P-ERK1/ERK2的蛋白表达显著升高,而Smad7的蛋白表达显著降低,与AP组比较,DEX组胰腺组织中TGF-β_(1)、P-Smad3及P-ERK1/ERK2的蛋白表达显著降低,而Smad7的蛋白表达显著升高。结论DEX一方面可抑制TGF-β_(1)的表达,进而促进Smad7的表达,抑制Smad3和ERK1/ERK2蛋白磷酸化,从而抑制TGF-β_(1)/Smad/ERK信号通路的激活;另一方面可抑制miRNA-216a的表达,最终减少炎症因子的合成与释放,对胰腺腺泡细胞具有保护作用。

TGF-β_1及其受体在PCOS大鼠卵巢中的表达及作用(英文)

目的探讨TGF-β1及其受体TGF-β1受体-Ⅰ(TGF-beta typeⅠreceptors,TβRⅠ)和受体-Ⅱ(TGF-beta type II receptors,TβRⅡ)mRNA在PCOS大鼠卵巢中的表达及作用。方法采用皮下注射脱氢表雄酮的方法建立PCOS动物模型,运用免疫组化方法检测卵巢中TGF-β1蛋白表达,并进行图像分析;采用RT-PCR方法检测TGF-β1受体TβRⅠ和TβRⅡmRNA在卵巢中的表达。结果与对照组相比,TGF-β1在PCOS各阶段卵泡卵母细胞、颗粒细胞中的表达强度差异无统计学意义(P>0.05)。而在PCOS间质细胞、窦状卵泡膜细胞的表达显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。凝胶图像分析显示TβRⅠ和TβRⅡmRNA相对含量显著高于对照组(P<0.05)。结论PCOS组TGF-β1表达异常是导致卵巢间质纤维化、包膜增厚的主要原因;TGF-β1也参与PCOS卵泡发育、闭锁的调控。PCOS大鼠TGF-β1受体表达的上调,是使TGF-β1致纤维化功能增强的原因之一。

芍药苷通过抑制TGF-β_(1)/Smad3通路对急性心肌梗死后心室重塑的作用研究

目的基于抑制转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smad3通路探讨芍药苷对急性心肌梗死后心室重塑的影响。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、曲美他嗪组和芍药苷高、低剂量组,每组8只。除假手术组外,其余各组通过结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死大鼠模型。曲美他嗪组大鼠灌胃10mg/(kg·d)曲美他嗪,芍药苷高、低剂量组大鼠灌胃10 mg/(kg·d)和5 mg/(kg·d)芍药苷,假手术组和模型组灌胃生理盐水,均连续4周。超声心电图评估大鼠心功能,ELISA试剂盒检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,TTC染色检测大鼠心肌梗死面积,HE染色观察大鼠心肌结构变化,Masson染色观察大鼠心肌胶原沉积情况,Western blot法检测大鼠心肌Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β_(1)、p-Smad3和Smad3表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠射血分数(EF)、左室短轴缩短分数(FS)均显著降低(P均<0.05),左心室舒张末期内径(LVIDd)、左心室收缩末期内径(LVIDs)和血清TNF-α、IL-6水平均显著升高(P均<0.05);大鼠心肌排列紊乱,有明显炎性细胞浸润和间质水肿,胶原沉积面积和心肌组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β_(1)、p-Smad3表达水平均显著增高(P均<0.05)。与模型组比较,曲美他嗪组、芍药苷低剂量组和芍药苷高剂量组大鼠EF和FS均显著升高(P均<0.05),LVIDs、LVIDd,血清TNF-α、IL-6水平,心肌梗死面积、胶原沉积面积,心肌组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β_(1)、p-Smad3表达量均显著降低(P均<0.05),且芍药苷高剂量组改善情况均优于芍药苷低剂量组(P均<0.05)。结论芍药苷可通过抑制TGF-β_(1)/Smad3通路改善急性心肌梗死后心室重塑。

补肾活血方联合补佳乐对宫腔粘连大鼠YAP1/TGF-β_(1)信号通路的影响

目的:探讨补肾活血方联合补佳乐对宫腔粘连大鼠的疗效及机制。方法:将40只SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组(补肾活血方)、西药组(补佳乐)、中药+西药组(补肾活血方+补佳乐),每组8只。应用双重感染建立宫腔粘连模型后,灌胃给药4周,HE染色观察子宫内膜病理变化;Masson染色观察子宫内膜纤维化;免疫组化检测子宫内膜Yes相关蛋白1(YAP1)及转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))蛋白表达。最后将每组剩余大鼠与雄鼠合笼,7 d后记录胚胎孕囊数。结果:与模型组相比,中药+西药组的内膜厚度和腺体数明显改善(P<0.05)。与模型组相比,中药组、西药组、中药+西药组纤维化明显减轻(P<0.05),而与西药组或中药组相比,中药+西药组纤维化程度显著降低(P<0.05)。与模型组相比,中药组、中药+西药组YAP1蛋白表达明显降低(P<0.05);同西药组或中药组相比,中药+西药组子宫内膜YAP1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组相比,中药+西药组TGF-β_(1)蛋白表达明显减少(P<0.05);同西药组相比,中药+西药组TGF-β_(1)蛋白表达量减少(P<0.05)。与模型组、中药组、西药组相比,中药+西药组子宫孕囊数明显增多(P<0.05)。结论:补肾活血方联合补佳乐能够有效抑制大鼠宫腔粘连,减轻子宫内膜纤维化,改善妊娠结局,其作用机制可能与调控YAP1/TGF-β_(1)信号通路有关。

中医药干预TGF-β_(1)/Smads信号通路治疗支气管哮喘的研究进展

支气管哮喘(简称哮喘)是临床上常见的呼吸系统疾病,常表现为反复发作的喘息、咳嗽、胸闷、气短等症状,其发病机制复杂,主要的病理特征为气道慢性炎症反应、气道高反应性和气道重塑,具有较高的发病率及病死率,已严重威胁全球人民的健康和生活。流行病学显示全球患病率达1%-18%,其中发达国家的哮喘发病率在10%-30%之间,而我国则为0.5%-5%[1-2]。西医治疗哮喘主要以糖皮质激素为主,由于长期使用会产生不良反应,患者普遍依从性较差。

实验性脑缺血再灌注中TGF-β_(1)免疫组化及分子生物学研究

目的 探讨脑缺血再灌注损伤中 TGF-β1 对神经细胞凋亡的调控。方法 在缺血及再灌注不同时间点用免疫组化及 RT- PCR方法观察缺血中心区及半影区 TGF-β1 蛋白及 m RNA表达的动态变化。结果 缺血中心区 TGF-β1 蛋白及 m RNA表达略有增强 ,而缺血半影区 TGF-β1蛋白及 m RNA表达明显增强 ,且在缺血再灌注 2 4 h及 48h达到高峰 ,与神经细胞凋亡趋势相符。结论 脑缺血时 ,TGF-β1 表达随梗塞区凋亡细胞的多少而变化 ,通过对神经细胞凋亡的调控 。

肾衰饮对肾纤维化大鼠TGF-β_1/Smad信号通路的作用研究

目的:探讨肾衰饮抗肾纤维化分子生物学机制。方法:采用腺嘌呤肾病模型,随机将60只SD大鼠分为空白组、模型组、肾衰饮组与尿毒清组,采用RT-PCR观察肾衰饮对CRF大鼠TGF-β1mRNA表达的影响;ELISA法检测Smad2、Smad3、Smad7蛋白表达;免疫组化法检测α-SMA蛋白表达。结果:模型组与正常组比较TGF-β1mRNA表达增强,Smad2、Smad3水平升高,Smad7下降,治疗后肾衰饮组TGF-β1mRNA表达明显减少,Smad2、Smad3水平下降,Smad7升高,同时肾组织α-SMA表达下降,明显优于尿毒清(P<0.05)。结论:肾衰饮抑制TGF-β1mRNA表达,提高Smad7水平,通过调节TGF-β1/Smad信号通路,以抑制肾纤维化的发生、发展。

积雪草苷对HSFB miR-564及其介导的TGF-β_(1)/Smad信号通路的影响

目的:探讨积雪草苷对人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)中miR-564及其介导的TGF-β_(1)/Smad信号通路中相关蛋白表达的影响。方法:HSFB分为对照组、0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.5mg/mL和1mg/mL组,其中对照组加入100μL的DMEM培养基进行培养,0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.5mg/mL和1mg/mL积雪草苷组分别加入含相应浓度AS的DMEM培养基继续培养。分别采用MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,酶联免疫吸附试验检测细胞MMP-2、COLⅠ和COLⅢ的表达水平,免疫荧光检测细胞α-SMA蛋白的表达,RT-PCR法检测细胞中miR-564的表达,Westernblot检测TGF-β_(1)/Smad信号通路中相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,积雪草苷干预后HSFB增殖水平显著降低,凋亡水平显著增加,细胞中MMP-2、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β_(1)、p-Smad2,p-Smad3蛋白的表达和miR-564的表达均明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),其中以1mg/mL组对HSFB作用最佳。结论:积雪草苷能够通过抑制HSFB中miR-564的表达,进而抑制TGF-β_(1)/Smad信号通路的激活,达到促进细胞凋亡、抑制细胞增殖和胶原分泌的作用。

益肾化瘀方含药血清对NRK52E转分化过程中TGF-β_1、BMP-7表达的影响

目的:采用体外培养的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)为研究对象,观察益肾化瘀方含药血清对NRK52E转分化过程中TGF-β_1、BMP-7 mRNA表达的影响。方法:以TGF-β_1诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)为研究对象,采用血清药理学方法和RT-PCR法,观察空白对照组、TGF-β_1刺激组、益肾化瘀方含药血清高、中、低剂量组、缬沙坦含药血清组6组细胞形态的变化,以及TGF-β_1mRNA、BMP-7mRNA的表达。结果:NRK52E细胞经TGF-β_1刺激48 h后,失去原有典型的铺路石样形态,拉长增大呈梭形,细胞间隙也增宽。而与益肾化瘀方含药血清共同作用后,细胞形态有所修复,梭形改变减轻,并随着含药血清浓度的增加在一定程度上渐趋向于正常形态。而同时加入不同浓度的益肾化瘀方含药血清与TGF-β_1共刺激48 h后,呈现剂量依赖方式上调BMP-7mRNA表达,而TGF-β_1mRNA的表达则有所下降,并表现出与缬沙坦对BMP-7和TGF-β_1相互调控的高度一致性。结论:益肾化瘀方含药血清通过在基因水平抑制TGF-β_1mRNA表达,并以剂量依赖方式上调BMP-7mRNA表达,而显示出对NRK52E细胞转分化过程的阻抑作用。

山楂总黄酮对糖尿病肾病大鼠TGF-β_1、CTGF表达的影响

目的观察山楂总黄酮(HLF)对2型糖尿病肾病大鼠TGF-β_1、CTGF表达量的影响,并探讨其对2型糖尿病肾病的保护作用及可能机制。方法常规复制2型糖尿病肾病大鼠模型,并随机分成四组:正常组、模型组、山楂总黄酮干预组和阳性对照药组。药物干预12周后测血糖及肾脏功能相关指标,并采用免疫组化方法检测大鼠肾脏TGF-β_1和CTGF表达情况。结果山楂总黄酮显著降低STZDN大鼠的血糖,改善肾功能并下调肾组织中TGF-β_1和CTGF的表达。结论山楂总黄酮可通过抑制肾组织TGF-β_1和CTGF的过度表达,从而对2型糖尿病肾病具有保护作用。

基于TGF-β_(1)/Smads信号通路探讨水蛭素治疗痛风性关节炎的机制研究

目的:探讨水蛭素治疗单钠尿酸盐(MSU)所致痛风性关节炎的作用机制。方法:用250μg/mL MSU诱导RA-HFLs细胞炎症模型,将细胞分为正常对照组、模型组、秋水仙碱(1μmol/L)组及水蛭素低(1 U/mL)、中(2 U/mL)、高(4 U/mL)浓度组。CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;ELISA检测各组细胞上清中炎症因子水平;Real-time PCR检测各组细胞中纤维化相关基因表达;Western Blot检测各组细胞中TGF-β_(1)/Smads信号通路相关蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组RA-HLFs细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、NF-κB水平显著升高,细胞活力显著降低,α-SMA、Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA及TGF-β_(1)蛋白表达和p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3水平显著升高(P<0.01或P<0.001)。与模型组比较,水蛭素各浓度组RA-HFLs细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、NF-κB水平显著降低,细胞活力显著升高,α-SMA、Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA及TGF-β_(1)蛋白表达和p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3水平显著降低(P<0.05~P<0.001)。水蛭素的作用呈浓度依赖性。结论:水蛭素能促进RA-HFLs细胞增殖,抑制细胞凋亡、炎症反应和纤维化,其作用机制可能与调节TGF-β_(1)/Smads信号通路有关。