Gengnianchun recipe inhibits apoptosis of pheochromocytoma cells from beta-amyloid 25-35 insult, better than monotherapies and their compounds

This study aims to determine and compare the protective effects of Gengnianchun recipe drug serum and compounds of its representative drug monotherapies against sympathetic nerve pheochromocytoma cell line PC12 cells damaged by beta-amyloid 25-35 at the cellular apoptosis and related signal pathway levels. PC12 cells cultured with medicated rat serum showed enhanced cell viability and reduced cellular apoptosis rates compared with those of monotherapies and their compounds. Furthermore, Gengnianchun recipe up-regulated expressions of anti-apoptotic protein Bcl-2, estrogen receptor-beta and phosphorylated extracellular-signal-regulated kinase 1/2; and down-regulated expressions of pro-apoptotic proteins Bax and caspase-3. Gengnianchun recipe was superior to representative drug monotherapies, such as paeoniflorin, berberine, timosaponin A-III, icariine and their compounds in protecting PC12 cells. Mitogen-activated protein kinase blocker and estrogen receptor antagonist were found to reverse the above effects of Gengnianchun recipe. The experimental findings indicate that, Gengnianchun recipe protects PC12 cells from beta-amyloid 25-35 insult; its inhibitory effect on apoptosis may be achieved through the mitogen-activated protein kinase and estrogen receptor pathways.

加味五子衍宗颗粒对轻度认知障碍患者记忆功能及血清β淀粉样蛋白的影响

目的观察加味五子衍宗颗粒对轻度认知障碍(MCI)患者记忆功能及血清β淀粉样蛋白(Aβ1-28)的影响。方法筛选36例MCI患者,采用随机双盲分组,分为加味五子衍宗颗粒治疗组(18例)和安慰剂对照组(18例),服药3个月,观察用药前后记忆功能及血清β淀粉样蛋白(Aβ1-28)的变化。另设20例正常人对照组。结果MCI的记忆商(MQ)较正常对照组明显降低(P<0.01),血清β淀粉样蛋白的含量较正常对照组明显升高(P<0.05)。用药后加味五子衍宗颗粒治疗组的MQ较其用药前明显提高(P<0.01),且较安慰剂对照组治疗前后MQ的差值有明显提高(P<0.05),治疗组较安慰剂组血清β淀粉样蛋白的含量明显降低(P<0.05)。结论加味五子衍宗颗粒能改善MCI患者记忆功能及血清β淀粉样蛋白的代谢功能,对延缓MCI的发展具有一定的临床意义。

含去痴灵水提物血清抑制M146L细胞分泌Aβ

目的研究含去痴灵水提物血清对M146L细胞分泌的β淀粉样蛋白(βamyloidprotein)的影响,探讨去痴灵治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)的可能性及作用机制。方法采用血清药理学方法,制备含去痴灵水提物血清。体外培养稳定转染人类阿尔茨海默病β淀粉样前体蛋白(betaamyloidproteinprecursor,APP)和突变型早老素1(prsenilin1,PS1)基因的中华仓鼠卵巢上皮细胞系(M146L),使之高效产生β淀粉样蛋白42(Aβ42),建立Aβ42过度表达的细胞模型。加入含去痴灵水提物血清,用MTT法检测不同浓度(12%、6%、3%)的含药血清对M146L细胞毒作用,用ELISA法测定其对M146L细胞分泌Aβ42的影响。结果3个浓度的含药血清对M146L存活均无影响,对细胞分泌的Aβ42有抑制作用,并呈现一定的量效关系。结论一定剂量(12%、6%、3%)的含去痴灵水提物血清对M146L细胞分泌的Aβ42有明显的抑制作用,其机制尚待进一步研究。

枸杞多糖含药血清对Aβ激活星形胶质细胞分泌炎症因子和α7nAChR表达的影响

目的研究枸杞多糖(LBP)含药血清对Aβ1-40激活的海马星形胶质细胞(astrocyte,AC)分泌炎性因子TNF-α、IL-6和α7nAChR表达的影响。方法 4月龄SD大鼠分别灌胃给予LBP和等量蒸馏水,常规制备含药血清;原代培养SD大鼠海马AC,经纯化鉴定后随机分为对照组、Aβ1-40组、药物组。各药物组为在加入Aβ1-40前12h预先分别加入:尼古丁、甲基牛扁亭(MLA)、LBP血清和空白血清,各组加Aβ1-40后继续培养24、48和72h。MTS法检测细胞的增殖活性;ELISA检测TNF-α和IL-6的浓度;免疫荧光染色和Western Blot检测α7nAChR的表达。结果 1原代培养的AC纯度达到95%以上,达到实验要求;2与对照组相比,Aβ1-40激活后的AC增殖活性和TNF-α、IL-6的浓度均升高(P均<0.05),α7nAChR的表达明显增多(P<0.05);3与Aβ1-40组比较:给予尼古丁和MLA后,AC增殖活性和TNF-α、IL-6的浓度以及α7nAChR的表达均降低(P均<0.05),给予LBP血清后,TNF-α、IL-6的浓度和α7nAChR的表达明显减少(P均<0.05),但AC增殖活性仍显著升高(P<0.05);LBP血清组与尼古丁组在Aβ1-40激活24和72h时α7nAChR的表达接近,与MLA组在Aβ1-40激活24h时接近。结论 LBP含药血清能降低Aβ1-40诱导的海马AC升高的TNF-α、IL-6水平和α7nAChR的高表达。

体外循环术后认知功能障碍患者的血清tau蛋白、β-淀粉样蛋白的测定及临床意义

目的探讨心脏体外循环术后患者血清tau蛋白、β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein, Aβ)含量与认知功能障碍(postoperative cognitive dysfunction, POCD)的相关性。方法筛选择期行心脏体外循环手术患者于术前1天、术后第7天全套量表法评估精神神经功能。分别于手术前5分钟、体外循环术后1、6、24小时以及术后第3天、第7天定时采取静脉血4 ml,酶联免疫吸附测定法检测血清Aβ1-40、Aβ1-42蛋白、tau蛋白水平。术后根据认知功能评估结果将所有患者分为POCD组以及非POCD组,应用统计学分析两组在每一种蛋白血清水平的差异,验证血清中三种蛋白对心脏低温体外循环术后认知功能障碍检测的准确性和可靠性。结果总计108例患者纳入统计,按量表评估结果,其中POCD 39例,非POCD 69例,POCD发生率为36.1%,围术期资料分析,年龄是POCD的危险因素(t=2.760,P=0.007 <0.05),与术前相比,术后患者POCD组血清tau蛋白、Aβ蛋白均有升高,但两组比较仅血清tau蛋白差异有统计学意义(P <0.05)。结论①年龄为术后认知功能障碍发生的重要高危因素;②心脏手术后POCD组患者血清tau蛋白明显高于非POCD组;③tau蛋白与术后认知功能障碍密切相关,其早期明显升高对于POCD的诊断有重要意义。

滋补脾阴方药含药血清对β淀粉样蛋白损伤原代培养大鼠海马神经元的保护作用及机制研究(英文)

目的:观察β淀粉样蛋白(amyloid β-peptide,Aβ)神经毒性、血清诱导激酶(serum-inducible kinase,SNK)-树突棘相关Rap特异性GTP酶活化蛋白(spine-associated Rap guanosine triphosphatase activating protein,SPAR)途径、N-甲基-D-门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)三者的关系,探讨滋补脾阴方药保护Aβ损伤原代培养大鼠海马神经元的作用机制。方法:将干粉Aβ1-40配制成溶液,在37℃恒温箱中孵育72h,获得聚集态纤维状Aβ1-40。原代培养大鼠海马神经元,以血清药理学方法制备滋补脾阴方药含药血清,建立Aβ1-40(5μmol/L)损伤神经元模型,滋补脾阴方药含药血清为干预组,采用逆转录聚合酶链式反应方法观察SNK、SPAR及NMDAR亚基NR1、NR2A、NR2B mRNA表达。结果:与对照组相比,神经元暴露于Aβ1-40(5μmol/L)2h后,SNKmRNA表达上调,SPAR、NR1、NR2A和NR2B mRNA表达下调,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与Aβ1-40(5μmol/L)组比较,各浓度滋补脾阴方药含药血清组SNKmRNA表达下调,SPAR、NR1、NR2A和NR2B mRNA表达上调,以2%滋补脾阴方药含药血清效果最显著(P<0.05)。结论:Aβ引起神经元损伤的过程与SNK-SPAR途径和NMDAR相关;滋补脾阴方药对Aβ损伤神经元有保护作用,其保护机制可能与调节NMDAR表达,阻断SNK-SPAR途径有关。

血清α-syn、Aβ1-42、SSA在帕金森病患者中的表达及与认知功能损害的关系

目的:探讨血清α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)、β淀粉样蛋白1-42(β-amyloid 1-42,Aβ1-42)、淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SSA)在帕金森病患者中的表达及与认知功能损害的关系。方法:收集本院2018年7月2020年11月收治的136例帕金森病患者为病例组,依据Hoehn-Yahr(H-Y)分级分为早期组(n=76)与中晚期组(n=60);依据蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment Scale,Mo CA)分为认知功能正常组(n=94)与认知功能损害组(n=42)。另选同期本院体检正常者105例纳入对照组。对比各组血清α-syn、SSA、Aβ1-42水平及Mo CA,并用Pearson相关系数分析病例组患者血清α-syn、SSA、Aβ1-42水平与Mo CA的相关性,用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析血清α-syn、SSA、Aβ1-42水平对帕金森病和认知功能损害的诊断价值。结果:病例组血清α-syn、SSA水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);病例组Aβ1-42、Mo CA评分低于对照组(P<0.05)。病例组晚期患者血清α-syn、SSA水平高于早期患者(P<0.05);病例组晚期患者Aβ1-42、Mo CA评分低于早期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。病例组有认知功能损害患者血清α-syn、SSA水平高于认知功能正常患者(P<0.05);病例组有认知功能损害患者Aβ1-42、Mo CA评分低于认知功能正常患者(P<0.05)。病例组患者血清α-syn、SSA与Mo CA均呈正相关(P<0.05),Aβ1-42与Mo CA呈正相关(P<0.05)。血清α-syn、SSA、Aβ1-42水平对帕金森病诊断的曲线下面积分别为0.858、0.821、0.785;血清α-syn、SSA、Aβ1-42水平对帕金森病认知功能损害预测的曲线下面积分别为0.877、0.825、0.783。结论:帕金森病患者血清α-syn、SSA、Aβ1-42水平较健康者变化明显,且可能和帕金森病的诊断、病情进展和认知功能损害有一定关系。

针灸上调血清Aβ内化酶对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力和β淀粉样蛋白沉积的影响

目的:探讨针灸通过降解β淀粉样蛋白(Aβ)改善阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和针灸组,每组10只。采用双侧海马注射5μL Aβ_(1-42)复制AD模型。针灸组"百会"及"肾俞"穴针刺加艾灸治疗,15min/次,1次/d,6d为1个疗程,治疗2个疗程。采用Morris水迷宫检测各组大鼠行为学,ELISA法检测血清Aβ_(1-42)及Aβ内化酶的含量,免疫组化法检测海马齿状回内Aβ_(1-42)表达变化。结果:与假手术组比较,模型组前5d及后3d平均逃避潜伏期明显延长,有效区停留时间明显缩短,跨越原平台位置的次数明显减少(P<0.01),血清中转甲状腺素蛋白(TTR)、脂蛋白酯酶(LPL)、α_2巨球蛋白(α_2M)及载脂蛋白E(ApoE)含量明显下降(P<0.01,P<0.05),Aβ_(1-42)的含量明显增多(P<0.01),齿状回内Aβ_(1-42)阳性表达升高(P<0.01)。与模型组比较,针灸组前5d及后3d平均逃避潜伏期明显缩短,有效区停留时间明显延长,跨越原平台位置的次数明显增多(P<0.01,P<0.05),血清中TTR、LPL、α_2M及ApoE含量明显上升(P<0.01,P<0.05),Aβ_(1-42)含量明显减少(P<0.05),齿状回内Aβ_(1-42)阳性表达降低(P<0.05)。结论:针灸"百会""肾俞"能明显改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能与上调血清中Aβ内化酶的含量,促进Aβ的清除以保护神经细胞有关。