细胞免疫荧光法在视神经脊髓炎患者血清及脑脊液中水通道蛋白4抗体检测中的运用价值

目的探讨细胞免疫荧光法(CBA)在视神经脊髓炎患者血清与脑脊液水通道蛋白4抗体(AQP4-Ab)检测中的运用价值。方法选择多发性硬化患者52例为硬化组,视神经脊髓炎患者54例为脊髓炎组,体检正常的自愿者50例为正常组。分别采用组织间接免疫荧光检测(IIF)、细胞免疫荧光法(CBA)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清和脑脊液标本(正常组未提取)的AQP4-Ab,比较各方法 AQP4-Ab的阳性检出率、特异性和灵敏度。结果 CBA、IIF和ELISA对脊髓炎组血清标本和脑脊液标本的AQP4-Ab阳性检出率显著高于硬化组和正常组(P<0.05)。CBA对脊髓炎组患者脑脊液标本和血清标本的AQP4-Ab阳性检出率分别为87.04%、70.37%,显著高于其他两种方法(P<0.05)。不同方法对脊髓炎组患者血清和脑脊液标本AQP4-Ab检测的敏感性为:CBA>IIF>ELISA,且有统计学差异(χ~2=7.394、14.687,P<0.05),但是不同方法的特异性无差异(P>0.05)。结论 AQP4-Ab阳性表达与视神经脊髓炎的发生有一定关系。在CBA、IIF和ELISA等检测方法中,CBA的阳性检出率和灵敏度最高,适宜视神经脊髓炎的早期诊断。

维持性泼尼松治疗视神经脊髓炎的效果及对血清水通道蛋白4抗体的影响

目的:探讨维持性泼尼松治疗视神经脊髓炎的临床效果及对血清水通道蛋白4(AQP4)抗体表达的影响。方法:选取笔者所在医院2016年6月-2019年6月收治的84例视神经脊髓炎患者为研究对象,根据随机数字表法将其分为观察组与对照组,每组42例。对照组予以口服硫唑嘌呤片治疗,观察组予以口服泼尼松维持治疗。比较两组临床疗效、治疗前后扩展残疾状态量表(EDSS)评分、AQP4抗体阳性表达率及不良反应发生率。结果:治疗前,两组EDSS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗半年及1年后,观察组EDSS评分均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗总有效率显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组AQP4抗体阳性率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:维持性泼尼松治疗视神经脊髓炎的效果显著,可显著改善神经功能,降低血清AQP4抗体阳性率,且不良反应少。

血清水通道蛋白4抗体联合MRI在中枢神经脱髓鞘疾病诊断中的价值分析

目的探讨分析血清水通道蛋白4抗体(AQP-4Ab)联合MRI诊断中枢神经脱髓鞘疾病的价值。方法回顾性分析我院2013年8月-2015年10月收治的45例拟诊断为中枢神经脱髓鞘疾病患者的临床资料,所有患者均行MRI检查及AQP-4Ab检测,以AQP-4Ab检测结果分为阳性组和阴性组,比较两组的临床特征,进行为期3年的随访,比较两组的生存情况,以病理结果为金标准,分析AQP-4Ab检测及MRI诊断的灵敏度、特异性、阳(阴)性预测值。结果AQP-4Ab检测结果显示,AQP-4Ab检测阳性20例,AQP-4Ab检测阴性25例,两组在伴随严重视神经炎、MRI示脊髓病灶节段≥3方面比较,具有显著差异(P<0.05);阳性组的随访时间为12.8-35.2个月,平均(24.22±2.41)个月,阴性组的随访时间为13.5-35.9个月,平均(26.22±3.25)个月,生存分析显示,阴性组的累积生存率显著高于阳性组(P<0.05);AQP-4Ab检测的灵敏度为0.667、特异度为0.810;MRI诊断的灵敏度为0.833,特异度为0.524;两者联合诊断的灵敏度为0.917、特异度为0.619。结论AQP-4Ab联合MRI诊断中枢神经脱髓鞘疾病可显著提高诊断灵敏度,且AQP-4Ab对于中枢神经脱髓鞘疾病患者的预后具有一定评估价值。

特发性膜性肾病中抗M型磷脂酶A2受体抗体、血管生成素样蛋白-4及可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体的临床意义

目的:探讨血清抗M型磷脂酶A2受体(anti-M typephospholipase A2 receptor,PLA2R)抗体、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(soluble urokinase plasminogen activator receptor,suPAR)和尿液血管生成素样蛋白-4(angiopoietin-like protein 4,Angptl4)在特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)诊断中的临床意义。方法:以2012年6月—2016年12月南通大学附属医院肾内科经肾活检确诊为膜性肾病(membranous nephropathy,MN)的47例患者和同期10例健康成人为研究对象。MN包括IMN 30例,继发性膜性肾病(secondary membranous nephropathy,SMN)17例,其中包括肿瘤相关性MN 6例,狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)6例,乙型肝炎病毒相关性MN(hepatitis B virus-associated membranous nephropathy,HBV-MN)5例。应用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)检测其血清抗PLA2R抗体、suPAR和尿液中Angptl4和足糖萼蛋白(podocalyxin,PCX)蛋白水平;应用免疫组化法检测肾组织中PLA2R和Angptl4表达。比较各组血清抗PLA2R抗体、suPAR和尿液Angptl4蛋白的表达水平,并分析IMN组血清抗PLA2R抗体、suPAR和尿液Angptl4蛋白表达与各临床指标的相关性。结果:IMN组血清抗PLA2R抗体及尿液Angptl4蛋白表达均显著高于SMN组和对照组(P<0.05),各组血清suPAR水平差异无统计学意义(P>0.05)。血清抗PLA2R抗体在IMN组、SMN组和对照组阳性率分别为70%、29.4%、0。IMN组血清抗PLA2R抗体表达水平与24 h尿蛋白、尿液PCX蛋白呈正相关,与血清白蛋白呈负相关;尿液Angptl4蛋白表达水平与PCX蛋白呈正相关。IMN组肾组织中PLA2R和Angptl4阳性表达显著高于其他组(P<0.05)。结论:血清抗PLA2R抗体可作为诊断IMN的特异性指标,并与病情密切相关。血清suPAR对诊断IMN无意义。尿液Angptl4蛋白测定可作为血清抗PLA2R抗体阴性时辅助诊断IMN的新指标。

血清水通道蛋白4抗体检测在视神经脊髓炎患者中的应用价值

目的:探讨血清水通道蛋白4(AQP-4)抗体检测在视神经脊髓炎患者中的应用价值。方法:选取2016年8月-2017年8月本院收治的视神经脊髓炎患者84例为研究A组、多发性硬化患者84例为研究B组、体检正常人84例为对照组。三组均进行血清AQP-4抗体水平检测。比较三组AQP-4阳性率,比较研究组首发受累部位、不同性别患者AQP-4抗体阳性率。结果:研究组AQP-4阳性率高于对照组,且研究A组高于研究B组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);研究A组各首发受累部位例数均多于研究B组(P<0.05);女性AQP-4抗体阳性率高于男性(P<0.05)。结论:血清AQP-4抗体水平与视神经脊髓炎紧密相关,是区分神经脊髓炎与多发性硬化的重要物质,临床利用价值与推广价值较高。

鼻咽癌高发区胃癌患者血清中EB病毒抗体水平分析

目的检测中山地区胃癌患者血清中爱泼斯坦-巴尔病毒(EB病毒)核抗原1-IgA(NA1-IgA)、EB病毒Zta蛋白IgA(Zta-IgA)、衣壳抗原-IgA(VCA-IgA),探讨EB病毒抗体在胃癌患者血清中的表达情况。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对100例胃癌患者、200例健康体检者血清中NA1-IgA、Zta-IgA和VCA-IgA的水平进行测定。结果胃癌患者血清中三种EB病毒抗体总阳性率为21.00%,与健康体检者(7.00%)相比,差异具有统计学意义(P<0.001);EB病毒抗体阳性以低分化腺癌多见,双抗体(Zta-IgA和VCA-IgA)阳性的胃癌共有4例且均为低分化腺癌;在低分化腺癌与中高分化腺癌中,EB病毒抗体阳性率分别为25.00%(15/60)、16.67%(5/30)。结论胃癌患者血清中EB病毒抗体表达量升高,双抗体的阳性表达可能与胃癌的恶性程度相关,为EB病毒与胃癌的相关研究提供了参考依据。

细胞周期蛋白依赖性激酶4重组蛋白兔血清抗体的制备及鉴定

目的制备细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)重组蛋白兔血清抗体并鉴定其特性。方法将设计合成的CDK4基因克隆至载体pET21a(+)中,构建重组质粒pET21a(+)/CDK4,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经镍螯合亲和层析纯化,将纯化的重组蛋白CDK4与等量弗式佐剂混合,经背部皮下多点免疫日本大耳白兔,隔周1次,共免疫3次。于末次免疫后0(当天)、2、4、6、8周采血,分离血清。间接ELISA法检测效价,免疫荧光及免疫组化法检测特异性。结果经酶切及测序鉴定,重组质粒pET21a(+)/CDK4构建正确。重组蛋白CDK4相对分子质量约为19 100。第8周CDK4兔血清抗体效价达1∶163 840,能特异性识别宫颈癌Siha细胞及宫颈癌组织中表达的CDK4蛋白。结论成功制备了高效价、特异性强的CDK4兔血清抗体,为进一步研究CDK4生物学特性奠定了基础。