2型糖尿病患者血浆中NETs标志物cfDNA,CitH3和MPO-DNA表达水平与视网膜病变程度相关性研究

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血浆中性粒细胞外陷阱(neutrophil extracellular traps,NETs)标志物循环游离DNA(circulating free DNA,cfDNA)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)-DNA、瓜氨酸化组蛋白3(citrullinated histone 3,CitH3)表达水平与视网膜病变程度的相关性。方法选取2023年1~9月河南科技大学第一附属医院80例T2DM患者为研究对象,依据T2DM患者视网膜病变情况分为无糖尿病视网膜病变(non-diabetic retinopathy,NDR)组(n=30)、非增生型糖尿病视网膜病变(nonproliferative diabetic retinopathy,NPDR)组(n=26)和增生型糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)组(n=24)。收集入选患者一般资料,检测血浆cfDNA,MPO-DNA及CitH3水平;采用Spearman相关性分析cfDNA,CitH3,MPO-DNA与T2DM患者视网膜病变严重程度的关系;ROC曲线分析cfDNA,CitH3,MPO-DNA及联合预测T2DM患者糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)发生的效能。结果NDR组、NPDR组和PDR组cfDNA(65.13±18.28,83.34±20.10,114.52±32.36ng/ml),CitH3(17.76±4.24,22.03±5.01,26.06±8.13 ng/ml),MPO-DNA(0.31±0.04,0.35±0.05,0.45±0.05)水平依次升高,差异具有统计学意义(F=28.755,13.335,62.470,均P<0.001);其中PDR组、NPDR组cfDNA,CitH3,MPO-DNA水平均高于NDR组(t=7.076,4.837,11.436;3.550,3.455,3.324),且PDR组cfDNA,CitH3,MPODNA水平高于NPDR组(t=4.127,2.128,7.065),差异具有统计学意义(均P<0.05)。Spearman相关性分析显示,cfDNA,CitH3,MPO-DNA与T2DM患者视网膜病变严重程度均呈正相关(r=0.659,0.470,0.744,均P<0.001)。ROC曲线显示,cfDNA,CitH3,MPO-DNA及联合检测曲线下面积[AUC(95%CI)]分别为0.846(0.758~0.934),0.776(0.674~0.878),0.847(0.764~0.930)和0.938(0.889~0.987),对于T2DM患者发生DR具有一定预测价值。结论DR患者血浆中NETs标志物cfDNA,MPO-DNA及CitH3水平升高,其水平与DR程度呈正相关,一定程度上可预测T2DM患者DR的发生情况,且联合预测价值最高。

游离中性粒细胞胞外诱捕网DNA的研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是先天抗微生物免疫的重要部分。NETs由中性粒细胞DNA、组蛋白和细胞质蛋白质构成。它对微生物是一种有效的防御机制,当缺乏有效抗衡调节时,它又能损伤组织。越来越多的证据表明NETs的动态水平是随着炎性过程,而不是随着组织损伤而变化。一种快速定量游离中性粒细胞胞外诱捕网DNA(cf-DNA/NETs)的方法已经建立,cf-DNA/NETs可能是用于诊断与预测炎症性疾病的新标志物。

血浆cf-DNA/NETs水平对重症肺炎患者预后评估的价值

目的探讨血浆游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(cf-DNA/NETs)水平对重症肺炎患者预后评估的价值。方法选取本院2018年1月到2019年6月收治的150例重症肺炎患者作为研究对象,依据ICU住院30 d预后结局分为两组:存活组(91例)、死亡组(59例)。采用急性生理学及慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)系统评估重症肺炎患者病情;采用PicoGreen荧光染料法检测血浆cf-DNA/NETs水平。采用Spearman法分析重症肺炎患者血浆cf-DNA/NETs水平与APACHEⅡ评分之间相关性;采用二元Logistic回归模型分析重症肺炎患者预后影响因素。结果存活组与死亡组吸烟史、重症肺炎获得环境相比,差异均有统计学意义(P<0.05);与存活组相比,死亡组APACHEⅡ评分、血浆cf-DNA/NETs水平均较高(P<0.05);Spearman结果显示,重症肺炎患者血浆cf-DNA/NETs水平与APACHEⅡ评分呈正相关(P<0.05);二元Logistic回归分析结果显示,吸烟史、医院获得性、cf-DNA/NETs、APACHEⅡ评分均是重症肺炎患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论重症肺炎患者血浆cf-DNA/NETs水平可能成为评估预后效果的生物学指标,也为重症肺炎的治疗靶点提供临床依据。

MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体与急性胰腺炎患者预后的相关性

探究改良CT严重指数(MCTSI)及外周血游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(cf-DNA/NETs)、D-二聚体与急性胰腺炎(AP)病情程度和预后的相关性分析。选取175例AP患者为研究对象,根据病情严重程度分为轻症AP组(75例)、中重症AP组(56例)、重症AP组(44例);根据患者3个月内生存情况,可分为生存组(163例)和死亡组(12例)。比较不同严重程度和不同预后患者MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体水平,并分析MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体对预后的评估价值。结果显示,重症AP组患者MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体水平高于中重症AP组,中重症AP组高于轻症AP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡组MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体水平高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体预测AP患者预后死亡的AUC分别为0.950、0.997、0.974,采用Z检验比较各指标AUC差异,均无统计学意义(P>0.05)。随着AP病情的加重,MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体呈升高趋势,并且MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体与患者预后死亡关系密切,可作为评估预后死亡的参考指标。

原发性膝骨关节炎患者血浆cf-DNA/NETs的检测水平及临床意义

目的 通过检测原发性膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者血浆中游离脱氧核糖核酸(circulating free DNA,cf-DNA)/中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)水平,分析其与病情严重程度及原发性KOA发病的关系。方法 选取空军军医大学西京医院2020年3月~2021年8月收治的192例原发性KOA患者作为观察组,200例体检健康人群作为对照组。检测两组受试者血浆cf-DNA/NETs水平;采用凯尔格伦-劳伦斯(KellgrenLawrence,K-L)分级标准将观察组分为四个亚组:原发性KOAⅠ组(n=39)、原发性KOAⅡ组(n=57)、原发性KOAⅢ组(n=63)和原发性KOAⅣ组(n=33);采用西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(Western Ontario and McMaster University Osteoarthritis Index,WOMAC)量表评估原发性KOA患者病情严重程度;Pearson分析观察组血浆cf-DNA/NETs水平与K-L分级、WOMAC评分的相关性;Logistic回归分析影响原发性KOA发病的相关因素。结果观察组血浆cf-DNA/NETs水平高于对照组(932.94±106.66 ng/ml vs 86.52±16.25 ng/ml),差异有统计学意义(t=110.901,P=0.000);原发性KOAⅠ组、原发性KOAⅡ组、原发性KOAⅢ组和原发性KOAⅣ组血浆cf-DNA/NETs水平依次升高(836.54±93.18 ng/ml,905.29±94.46 ng/ml,950.33±117.85 ng/ml和1 061.40±122.29 ng/ml),差异有统计学意义(F=28.011,P=0.000)。观察组血浆cf-DNA/NETs水平与K-L分级、关节功能评分均呈正相关(r=0.552,0.627,均P=0.000)。年龄(OR=1.936,95%CI:1.273~2.945)、吸烟史(OR=1.853,95%CI:1.158~2.966)、家族遗传史(OR=1.997,95%CI:1.336~2.935)和血浆cf-DNA/NETs水平(OR=2.104,95%CI:1.441~3.071)均是原发性KOA发病的危险因素(P=0.002,0.010,0.001,0.000)。结论 原发性KOA患者血浆cf-DNA/NETs呈高表达,血浆cf-DNA/NETs与原发性KOA的发生及病情发展密切相关。检测其水平可为原发性KOA的预防及治疗提供参考依据。

急性胰腺炎患者血清中游离DNA/中心粒细胞胞外诱捕网和乳酸脱氢酶与病情程度的相关性研究

目的分析急性胰腺炎患者血清中游离DNA(cf-DNA)/中心粒细胞胞外诱捕网(NETs)、乳酸脱氢酶(LDH)与病情程度的相关性。方法选取2020年1月至2021年1月于葫芦岛市第二人民医院诊治的89例急性胰腺炎患者作为研究组,另选取同期体检的89例健康体检者作为对照组。两组均进行血清cf-DNA/NETs、LDH检查,比较两组血清cf-DNA/NETs、LDH水平,不同病情严重程度急性胰腺炎患者血清cf-DNA/NETs、LDH水平,并分析急性胰腺炎患者血清cf-DNA/NETs、LDH与病情程度的相关性分析。结果研究组cf-DNA/NETs、LDH水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。轻度、中度、重度急性胰腺炎患者血清cf-DNA/NETs、LDH水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。重度急性胰腺炎患者cf-DNA/NETs、LDH水平高于中度、轻度急性胰腺炎患者,中度急性胰腺炎患者cf-DNA/NETs、LDH水平高于轻度急性胰腺炎患者,差异有统计学意义(P<0.05)。血清cf-DNA/NETs、LDH水平与急性胰腺炎患者病情严重程度呈正相关(r>0,P<0.05)。结论血清cf-DNA/NETs、LDH水平在急性胰腺炎患者中高表达,且病情越严重,表达水平越高。

新生儿急性呼吸窘迫综合征中NETs与MAC-1的相关性及临床意义

目的:探讨新生儿急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中性粒细胞胞外诱捕(NETs)与巨噬细胞1抗原(MAC-1)的相关性及临床意义。方法:选取32例ARDS患儿为ARDS组,根据病情分为轻度组(n=12)、中度组(n=11)及重度组(n=9);另选同期24例黄疸新生儿为对照组。比较ARDS组和对照组患者及ARDS中不同病情患儿血清中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、游离DNA(cf-DNA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、MAC-1水平;通过Pearson相关性分析观察ARDS组患儿NE及cf-DNA与TNF-α、IL-6及MAC-1水平的相关性;ROC曲线分析血清NE和cf-DNA水平对新生儿ARDS的预测价值。结果:ARDS组患儿MAC-1表达水平增强(P<0.05);NE、cf-DNA、TNF-α、IL-6高于对照组(P<0.05);ARDS组不同病情患儿NE、cf-DNA、TNF-α、IL-6水平差异有统计学意义(P<0.05),且重度组>中度组>轻度组。相关性分析显示,ARDS组患儿血清NE及cf-DNA与TNF-α、IL-6及MAC-1均呈正相关关系(P<0.05)。ROC曲线分析显示,NE、cf-DNA预测新生儿ARDS的曲线下面积(AUC)分别为0.765、0.821,截断值分别为347.5 pg/mL、138.17 ng/mL。结论:新生儿ARDS患儿NE及cf-DNA与TNF-α、IL-6及MAC-1均呈正相关关系,临床可通过监测NE、cf-DNA水平来评估新生儿ARDS病情严重程度。

中性粒细胞胞外诱捕网与口腔鳞状细胞癌关系的 研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)是中性粒细胞释放的一种由解聚的染色质和颗粒蛋白组成的纤维网状结构,可以捕获和杀死细菌。NETs的形成由各种细菌、病毒等病原体激活,其过程被称为网捕死亡(NETosis)。NETosis是一种不同于细胞凋亡和细胞坏死的细胞程序性死亡过程,目前已经报道了两种NETosis形式:裂解性NETosis和非裂解性NETosis。研究发现NETs能够在肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中与免疫细胞相互作用,激活巨噬细胞;促进髓系抑制细胞的免疫抑制作用;并能包裹在肿瘤表面,防止CD8+T细胞和自然杀伤细胞发挥细胞毒性作用。近年研究发现,NETs在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中大量存在,与OSCC发生发展关系复杂,根据不同的中性粒细胞表型,NETs可发挥促肿瘤或抗肿瘤作用,对N1型中性粒细胞,NETs可能是其发挥抗肿瘤作用的手段,而转换生长因子⁃β(transforming growth factor⁃β,TGF⁃β)诱导的NETs的形成可能与N2型中性粒细胞呈现促癌活性从而诱导口腔扁平苔藓恶变的机制有关。NETs还可能参与OSCC的转移过程,其通过捕获循环肿瘤细胞(circu⁃lating tumor cells,CTC)并诱导高凝状态促进肿瘤相关血栓的形成和血源性转移。NETs参与了OSCC发生和转移的过程,为抗肿瘤治疗和预测OSCC的预后提供了新的研究方向。抑制NETs的形成可以显著抑制化疗后产生的耐药性,并有利于降低OSCC患者的血栓形成风险从而抑制肿瘤转移。目前基于NETs相关基因已构建了多个关于头颈部鳞状细胞癌的预后模型。但目前NETs与OSCC的治疗尚处于讨论阶段,其作用机制与实行的可能性尚需大规模的基础与临床试验验证。本文通过综述NETs与OSCC之间的关系,为治疗OSCC提供新思路。

清肺解毒汤联合西医治疗重症肺炎合并急性呼吸窘迫综合征患儿临床研究

目的:观察清肺解毒汤联合西医治疗重症肺炎合并急性呼吸窘迫综合征患儿的临床疗效。方法:选取62例重症肺炎合并急性呼吸窘迫综合征患儿,按随机对照原则分为对照组和观察组各31例。对照组采用无创正压通气(NIPPV)联合纤维支气管镜肺泡灌洗术治疗,观察组在对照组基础上加用清肺解毒汤治疗。比较2组气管插管率、死亡率、无创辅助通气时间、有创通气时间、总辅助通气时间、总用氧时间及住院时间,并比较2组治疗前后动脉血气分析指标、肺部感染程度及外周血游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(cf-DNA/NETs)水平。结果:观察组气管插管率低于对照组(P<0.05),无创辅助通气时间、有创通气时间、总辅助通气时间、总用氧时间及住院时间均短于对照组(P<0.05)。2组死亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组动脉血氧分压(PaO_(2))、氧合指数(PaO_(2)/FIO_(2))均升高(P<0.05),动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))降低(P<0.05),且观察组PaO_(2)、PaO_(2)/FIO_(2)高于对照组(P<0.05),PaCO_(2)低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组临床肺部感染评分(CPIS)、Murray肺损伤评分(MLIS)均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组外周血cf-DNA/NETs水平均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。结论:清肺解毒汤联合西医治疗重症肺炎合并急性呼吸窘迫综合征患儿疗效确切,可有效改善动脉血气分析指标,促进肺功能恢复,降低外周血cf-DNA/NETs水平。

中性粒细胞胞外诱捕网在新生儿急性呼吸窘迫综合征中的表达及意义

目的动态观察中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)的标记物游离DNA(cell free-DNA,cf-DNA)在新生儿急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)中的变化,并评估其与ARDS病情严重程度及早期诊断的关系。方法前瞻性纳入2021年1月—2022年6月入住江苏大学附属医院诊断为ARDS的新生儿作为研究组(ARDS组),根据氧指数(oxygen index,OI)分为轻度ARDS组(4≤OI<8)、中度ARDS组(8≤OI<16)及重度ARDS组(OI≥16)。对照组选自同期在该院新生儿科观察的黄疸新生儿,均无引起新生儿黄疸的病理性因素。ARDS组在入院后第1、3、7天采集外周血标本,对照组在入院时采集外周血标本。采用荧光酶标仪检测血清cf-DNA水平;采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平。采用Pearson相关分析法评估血清cf-DNA水平与血清IL-6和TNF-α水平的相关性。结果ARDS组共纳入50例患儿,其中轻度ARDS 15例,中度ARDS 25例,重度ARDS 10例;对照组纳入25例新生儿。与对照组相比,不同病情程度的ARDS各组血清cf-DNA、IL-6、TNF-α水平显著增加(P<0.05)。与轻度ARDS组相比,中度及重度ARDS组血清cf-DNA、IL-6、TNF-α水平显著增加(P<0.05),重度ARDS组增加更为明显(P<0.05)。与入院后第1天相比,ARDS各组血清cf-DNA、IL-6、TNF-α水平在入院后第3天显著增加,而第7天显著下降(P<0.05)。Pearson相关分析显示,在50例ARDS新生儿中,血清cf-DNA水平与血清IL-6及TNF-α水平均呈正相关(P<0.05)。结论ARDS新生儿存在NETs过量表达,动态监测cf-DNA水平在评估新生儿ARDS病情严重程度及早期诊断中有一定临床价值。

中性粒细胞胞外诱捕网检测方法综述

中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是由多种蛋白质和DNA组成的复杂网状结构。许多研究表明,NETs是机体多种免疫炎性疾病、血栓、癌症等病理生理过程的重要参与者。每个阶段NETs的动态变化可在一定程度上预示病程发展方向。该文就目前有效定量NETs的检测方法进行系统综述,旨为临床慢性炎症和癌症早期检测,以及靶向治疗提供最新的理论参考。

中性粒细胞胞外诱捕网检测技术的研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是近些年新发现的,与自身免疫性疾病、血栓和炎症反应形成有关的网状结构,由中性粒细胞在触发因子诱导下释放产生。不同的刺激物会诱导出不同形式,其数量可被多种检测技术量化。根据检测对象的不同,其分析方法有形态学观察,检测游离DNA和中性粒细胞弹性蛋白酶、髓过氧化物酶等蛋白质组分。本文通过概述这些检测技术及各自优缺点,为进一步拓展NETs在相关疾病的早期诊断、预后判断等方面的应用提供有益参考。

NETs在急性呼吸窘迫综合征新生儿中的变化及意义

目的观察急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)新生儿中是否存在中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)的形成,以及动态观察血浆游离DNA(cell-free DNA,cf-DNA)/NETs的变化在ARDS严重程度及治疗效果中的意义。方法前瞻性选取2020年10月~2022年4月在江苏大学附属医院收治的需呼吸机辅助通气的37例ARDS新生儿为ARDS组,根据氧合指数(oxygenation index,OI)分为轻度ARDS组(4≤OI<8)、中度ARDS组(8≤OI<16)及重度ARDS组(OI≥16);以同期分娩的27例正常新生儿为对照组。采用荧光酶标仪检测cf-DNA的含量;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分别检测NETs成分中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)的含量及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平。结果ARDS各组、对照组cf-DNA、NE及TNF-α水平比较,差异均有统计学意义(F=57.517,P<0.001;F=219.408,P<0.001;F=133.200,P=0.005),ARDS各组cf-DNA、NE及TNF-α水平均明显高于对照组(P均<0.05),ARDS各组中中度组NE水平高于轻度组(P<0.05),重度组cf-DNA、NE及TNF-α水平均高于轻度组及中度组(P均<0.05)。各ARDS组治疗3、7天时的cf-DNA、NE及TNF-α水平较治疗前均有不同程度下降,差异均有统计学意义(时间:F=52.750,P<0.001;F=44.859,P<0.001;F=62.098,P<0.001;组间:F=21.237,P<0.001;F=75.427,P<0.001;F=31.776,P=0.005;交互:F=3.042,P=0.023;F=3.047,P=0.023;F=8.618,P<0.001)。ARDS患者cf-DNA与NE及TNF-α水平呈正相关(r=0.804,P<0.001;r=0.790,P<0.001)。结论新生儿ARDS存在NETs的形成,cf-DNA/NETs水平在监测新生儿ARDS病情严重程度及治疗效果中有一定的临床价值。

中性粒细胞胞外诱捕网相关标志物与视网膜静脉阻塞的相关性研究

目的探索外周血中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)相关生物标志物与视网膜静脉阻塞(RVO)之间的相关性。方法采用病例对照研究,纳入常熟市第二人民医院眼科2020年1月至7月因RVO入院的患者作为RVO组,从临床中心的体检部门随机选取年龄和性别相匹配的志愿者作为对照组。检测所有受试者外周游离DNA(cfDNA)、髓过氧化物酶(MPO)-DNA和瓜氨酸化组蛋白H3(H3Cit)三种NETs相关标志物的水平,以及炎症因子[血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6]和凝血功能指标[血浆样本凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(FIB)]的水平,从而分析NETs与RVO的关系及潜在机制。利用相关性分析探索外周血NETs相关标志物与RVO分型、病程及远期黄斑水肿(ME)发生、炎症水平以及血栓形成的相关性,并进一步分析具有不同水平NETs相关生物标志物的RVO患者中的炎症反应程度和血栓形成标志物的差异。结果最终纳入了RVO组77例(77眼)患者及对照组受试者48例(48眼)。在RVO组患者外周血中,cfDNA、MPO-DNA和H3Cit三种NETs生物标志物均较对照组增加(均为P<0.05)。cfDNA、MPO-DNA和H3Cit诊断RVO的AUC分别为0.859、0.871和0.928(均为P<0.001)。将RVO分为CRVO和BRVO两个亚组进行对比,结果显示,CRVO组患者的cfDNA和MPO-DNA浓度均显著高于BRVO组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。相关性分析结果显示,NETs相关标志物与炎症、血栓形成均呈显著线性相关,与RVO病程及远期ME发病无关。结论NETs与RVO亚型(CRVO及BRVO)、炎症和血栓形成有关,NTEs相关标志物对RVO有潜在的诊断作用。

血浆游离DNA水平升高源于NETosis并与活动性狼疮肾炎相关

目的 探讨SLE患者血浆游离DNA（cfDNA）水平与LN的相关性,分析患者血浆cfDNA升高的可能原因.方法 实验纳入了54例SLE患者和43名健康对照者.SLE患者中,37例合并有LN,26例为活动性LN患者,11例为缓解期LN患者.血浆cfDNA的测定采用Picogreen试剂盒;低密度粒细胞（LDGs）的测定采用流式细胞术.采用单因素相关及多元线性回归分析LN与cfDNA的关系并分析cfDNA升高的影响因素.结果 SLE组的cfDNA水平显著高于健康对照组[（237＆#177;40） ng/ml和（188＆#177;41） ng/ml,P＜0.01].在SLE中,LN组的cfDNA水平显著高于非LN组[（247＆#177;47） ng/ml和（214＆#177;31） ng/ml,P=0.028）;而且活动性LN的cfDNA水平明显高于缓解期LN[（254＆#177;50） ng/ml和（216＆#177;29） ng/ml,P=0.035）.进一步分析发现SLE患者血浆cfDNA水平与尿蛋白定量（24 h）呈正相关（r=0.350,P=0.013）,与血清白蛋白（r=-0.500,P＜0.01）和内生肌酐清除率（Ccr）（r=-0.354,P=0.044）呈负相关.LDGs在SLE患者中的比例显著高于健康对照组[（8.3＆#177;12.9）％和（1.2＆#177;0.7）％,P=0.004],并且与血浆cfDNA水平呈正相关（r=0.636,P=0.002）;中性粒细胞计数与cfDNA呈正相关（r=0.599,P＜0.01）.结论 LDGs和中性粒细胞过度形成中性粒细胞胞外网状陷阱（NETs）是SLE患者cfDNA水平升高的主要原因之一.血浆cfDNA的水平与LN的活动性相关,提示NETs标记物和活动性LN存在联系,更特异的血清NETs标记物有望成为活动性LN的临床标志.

卒中相关性肺炎患者感染病原菌种类及其与血清cf-DNA/NETs的相关性

目的分析卒中相关性肺炎(SAP)的病原学特点,以及患者血清游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(cf-DNA/NETs)水平与痰培养结果的相关性。方法本院2018年6月-2020年6月收治的SAP患者78例,采集痰液标本进行病原菌培养。于抗生素治疗前采集患者血清标本,检测cf-DNA/NETs水平,分析其与病原学检查结果及预后的相关性。结果 78例SAP患者痰液标本共培养出9种病原菌,共156株,其中革兰阴性菌占78.85%,革兰阳性菌占19.23%,真菌占1.92%。SAP主要致病菌为肺炎克雷伯菌,占53.85%。78例患者中细菌感染75例,真菌感染3例。SAP患者血清cf-DNA/NETs水平显著高于对照组(P<0.05),SAP细菌感染组显著高于真菌感染组(P<0.05)。78例SAP患者中因感染控制不良死亡10例,死亡患者血清cf-DNA/NETs水平显著高于存活患者(P<0.05)。结论 SAP主要为细菌性感染,少数为真菌性感染。血清cf-DNA/NETs对鉴别致病菌类型和患者预后评估有一定参考价值。

中性粒细胞胞外诱捕网标志物游离DNA水平与脓毒症血小板活化的相关性

目的研究中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)标志物游离DNA(cfDNA)水平与血小板(PLT)活化之间的相关性。方法根据纳入标准、排除标准将2018年9至12月中国医科大学附属第一医院ICU收治的51例患者分为脓毒症组(29例)和对照组(22例)。用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测患者外周血浆的cfDNA、血小板因子4(PF4)、P-选择素浓度。采用SPSS 25.0进行统计学分析,比较2组患者入ICU 24 h内生化指标、急性生理学与慢性健康状况(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭评估(SOFA)评分、国际血栓与止血委员会(ISTH)评分、日本危重病协会(JAAM)评分、cfDNA以及PLT标志物(PF4、P-选择素)的差异性。同时将脓毒症组cfDNA和PLT、PLT标志物(PF4、P-选择素)、炎症指标[中性粒细胞计数(NE)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)]、凝血指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、D-二聚体(D-D)、抗凝血酶Ⅲ活性(AT-Ⅲ)]、疾病严重程度(APACHEⅡ评分、SOFA评分、ISTH评分、JAAM评分)等分别进行相关性分析。结果脓毒症组患者cfDNA水平明显高于对照组,差异有统计学意义[(174.499±76.596)ng/ml vs(114.354±19.319)ng/ml,P<0.05],但2组P-选择素、PF4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。脓毒症组中cfDNA水平与P-选择素/PLT、D-D、CRP、APACHEⅡ评分、JAAM评分之间具有相关性(r=0.3849、0.3872、0.6211、0.4542、0.4451,P<0.05);与NE、PLT计数、PLT标志物(PF4、P-选择素)、ISTH评分等无明显相关性(P>0.05)。结论脓毒症组患者cfDNA明显升高。脓毒症组中cfDNA与D-D之间具有明显正相关性,提示NETs可能与继发性纤溶过程关系更加密切。尽管脓毒症组中cfDNA与P-选择素/PLT之间有正相关性,但因为P-选择素并不是特异性的PLT活化标志物,所以NETs与脓毒症PLT活化的关系仍需进一步探究。

线粒体DNA在中性粒细胞胞外诱捕网中作用的研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)是近十余年发现的新的细胞程序性死亡方式,其来源、构成及作用等已成为目前的研究热点.最新研究表明,线粒体DNA(mitochon-drial DNA,mtDNA)是NETs的组成部分,在线粒体氧化呼吸产生大量活性氧(reactive oxygen species,ROS)的情况下,氧化异常的mtDNA与NETs相互激活,参与多种疾病的发生.以下就NETs的研究进展、mtDNA在NETs中的作用及可能的关系进行综述.

慢性乙型肝炎患者外周血游离DNA/NETs与HBV-DNA载量的相关性

目的检测慢性乙型肝炎患者外周血游离DNA(cf-DNA)/中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)水平、乙型肝炎病毒(HBV)-DNA载量,并分析两者相关性。方法选取2018年9月-2020年5月郑州市第七人民医院收治的150例慢性乙型肝炎患者为观察组,同期150名健康志愿者为对照组。抽取受试者清晨空腹外周血,分离血清,荧光染色法检测cf-DNA/NETs水平,qRT-PCR法检测HBV-DNA载量,苹果酸脱氢酶(MDH)法及乳酸脱氢酶法分别检测肝脏损伤指标天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。采用Pearson法分析慢性乙型肝炎患者血清cf-DNA/NETs水平与HBV-DNA载量,血清cf-DNA/NETs水平、HBV-DNA载量与AST、ALT水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清cf-DNA/NETs水平、HBV-DNA载量对慢性乙型肝炎的诊断价值。结果观察组患者血清cf-DNA/NETs水平、HBV-DNA载量及AST、ALT水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。慢性乙型肝炎患者血清cf-DNA/NETs水平与HBV-DNA载量成显著正相关(r=0.508,P<0.05),血清cf-DNA/NETs水平与AST、ALT水平成显著正相关(r=0.418、0.476,P<0.05),血清HBV-DNA载量与AST、ALT水平成显著正相关(r=0.490、0.405,P<0.05)。血清cf-DNA/NETs水平、HBV-DNA载量诊断慢性乙型肝炎的ROC曲线下面积分别为0.974(95%CI:0.959~0.990)、0.943(95%CI:0.913~0.974),敏感度分别为91.3%、88.7%,特异性分别为99.3%、100.0%。结论慢性乙型肝炎患者外周血cf-DNA/NETs水平升高,与HBV-DNA载量及肝脏损伤程度成正相关,且对慢性乙型肝炎诊断具有一定价值。

重症急性胰腺炎cf-DNA/NETs、sTREM-1及GP-2α水平与病情关系

目的探讨重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)患者血清游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(cell-free DNA/nertrophil extracellular traps,cf-DNA/NETs)、可溶性髓系细胞触发受体-1(soluble triggering receptor expresses on myeloid cell-1,sTREM-1)、糖蛋白-2α(glycoprotein-2,GP-2α)水平变化,分析cf-DNA/NETs、sTREM-1、GP-2α与SAP病情进展的关系。方法105例胰腺炎患者,其中58例SAP患者为SAP组,47例单纯急性胰腺炎患者为胰腺炎组,根据28 d生存情况将SAP组分为生存组46例和死亡组12例。采用ELISA法检测血清sTREM-1和GP-2α水平,采用PicoGreen荧光染料定量分析检测cf-DNA/NETs表达水平;绘制ROC曲线,评估cf-DNA/NETs、sTREM-1、GP-2α单独和联合检测预测SAP病情严重程度的效能;采用多因素logistic回归分析影响SAP患者预后的因素。结果SAP组患者入院第1天血清cf-DNA/NETs[(1175.53±274.26)μg/L]、sTREM-1[(91.66±20.49)ng/L]、GP-2α[(5.09±1.82)u]水平均高于胰腺炎组[(623.17±178.35)μg/L、(63.25±15.92)ng/L、(3.53±1.26)u](P<0.05);入院第1、3、7天,死亡组血清cf-DNA/NETs、sTREM-1、GP-2α水平均高于生存组(P<0.05);当cf-DNA/NETs、sTREM-1、GP-2α最佳截断值分别为1262.15μg/L、98.19 ng/L、6.88 u时,预测SAP病情严重程度的AUC分别为0.824(95%CI:0.706~0.943,P=0.001)、0.857(95%CI:0.705~1.000,P<0.001)、0.689(95%CI:0.506~0.873,P=0.045),灵敏度分别为75.00%、91.7%、60.00%,特异度分别为80.4%、80.4%、93.4%,三者联合预测SAP病情严重程度的AUC为0.940,敏感度为91.7%、特异度为82.6%;cf-DNA/NETs(OR=2.37,95%CI:1.45~3.89,P=0.006)、sTREM-1(OR=2.32,95%CI:1.24~4.36,P=0.004)和GP-2α(OR=3.19,95%CI:1.72~5.91,P<0.001)是SAP患者预后的影响因素。结论SAP患者血清cf-DNA/NETs、sTREM-1、GP-2α呈高表达,且随病情加重而升高,均是影响SAP患者预后的危险因素,可用于评估SAP病情严重程度。