miR-181及miR-146家族在不同甲状腺癌细胞株中的表达及与BRAF^V600E基因突变的关系

目的探讨miR-146及miR-181家族中各成员(miR-146a、miR-146b、miR-181a、miR-181b、miR-181c和miR-181d)在不同甲状腺癌细胞株(TPC-1和BCPAP)中的相对表达量及与BRAF V600E基因突变的关系。方法采用实时定量PCR技术检测甲状腺癌细胞株TPC-1(无BRAF V600E基因突变)及BCPAP(BRAF V600E基因突变)中miR-146a、miR-146b、miR-181a、miR-181b、miR-181c和miR-181d的表达水平,并初步探讨其表达水平与BRAF V600E基因突变的关系。结果miR-146a、miR-181b、miR-181d在甲状腺癌细胞BCPAP中相对高表达,分别为1.52±0.03、4.13±0.01、6.51±0.87。BRAF V600E基因突变细胞株BCPAP中的miR-146a、miR-181a、miR-181b、miR-181c、miR-181d表达量较无BRAF V600E基因突变的细胞株TPC-1明显增高(P<0.01)。BRAF V600E基因突变细胞株BCPAP中miR-146b的表达量较无BRAF V600E基因突变细胞株TPC-1明显减低(P<0.01)。结论miR-146a、miR-181b、miR-181d在甲状腺癌细胞BCPAP中表达水平相对较高。miR-146及miR-181家族中各成员的相对表达量与BRAF V600E突变均有明显相关性。

miR-181a调控小胶质细胞ZEB1对缺血性脑卒中模型炎症反应机制的影响

目的观察缺血性脑卒中(CIS)模型大鼠炎症反应及大脑皮层组织微小RNA(miR)-181a和锌指E盒结合同源框(ZEB)1蛋白水平变化情况,探讨miR-181a调控ZEB1对炎症反应的作用机制。方法将36只SD大鼠随机分为对照组、假伤组和模型组,雌雄各半,每组12只。模型组建立CIS模型,假伤组行假伤手术,对照组不做任何干预。取小胶质细胞(BV2)培养,分别转染miRNA Negtive Control(空白对照组)、miR-181a inhibitor(抑制表达组)和hsa-miR-181a(促进表达组)。采用免疫比浊法检测大鼠血清C反应蛋白(CRP)表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平。RT-PCR检测大鼠大脑皮层组织和转染细胞miR-181a和ZEB1 mRNA表达量,Western印迹检测大脑皮层组织和转染细胞ZEB1表达量。结果与对照组比较,假伤组和模型组超敏(hs)-CPR、IL-6和TNF-α表达水平均明显升高(均P<0.05);且模型组均明显高于假伤组(均P<0.05)。与对照组和假伤组比较,模型组miR-181a、ZEB1蛋白及mRNA相对表达量均明显升高(均P<0.05)。模型组血清hs-CPR、IL-6和TNF-α表达与miR-181a相对表达量呈正相关,与ZEB1蛋白及mRNA相对表达量呈负相关(P<0.05,P<0.001)。与空白对照组比较,抑制表达组转染细胞miR-181a相对表达量明显下降,ZEB1蛋白及mRNA相对表达量均明显升高(均P<0.05);促进表达组miR-181a相对表达量明显升高,ZEB1蛋白及mRNA相对表达量均明显下降(均P<0.05)。结论miR-181a可能通过调控小胶质细胞ZEB1表达而影响CIS模型炎症反应。

血清微小RNA-92a、微小RNA-34a、微小RNA-181c水平对急性脑梗死诊断及预后评估有重要价值

目的:探究血清微小RNA-92a(miR-92a)、miR-34a、miR-181c诊断急性脑梗死(ACI)的价值,并分析各指标评估患者预后的临床意义。方法:选取ACI患者80例为研究组,另选取同期健康体检者80例为对照组。比较2组血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平,并比较研究组不同病情患者血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平,分析各指标与神经功能缺损程度、梗死体积的相关性,及对ACI的诊断价值,分析各指标对预后的评估价值。结果:研究组血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平高于对照组(P均<0.05);重度、中度和轻度神经功能缺损患者血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平依次降低(P均<0.05);梗死体积>10 cm^(3)、5~10 cm^(3)、<5 cm^(3)患者血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平依次降低(P均<0.05);ACI患者血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平与美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、梗死体积呈正相关(r=0.857、0.832;0.823、0.806;0.794、0.752,P均<0.05);血清miR-92a、miR-34a、miR-181c诊断ACI的曲线下面积(AUC)均>0.75,具有一定诊断效能,各指标联合诊断的AUC最大(0.927),最佳诊断敏感度、特异性分别为77.50%、95.00%;血清miR-92a、miR-34a、miR-181c阳性患者预后良好率(62.75%、65.52%、62.26%)低于阴性患者(89.66%、90.91%、92.59%,P均<0.05)。结论:联合检测血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平可辅助临床诊断ACI,且各指标表达水平与患者预后密切相关。