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miR-25a-5p促进乳腺癌蒽环类药物治疗所致的心肌损伤
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作者 刘睿 吕雨桐 +2 位作者 姜翠红 王高兴 赵志正 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第1期26-31,共6页
目的:探讨蒽环类药物诱导心肌毒性的机制和新的治疗靶点。方法:106例乳腺癌患者根据超声心动图检查鉴别出肿瘤治疗相关心功能障碍,分为心功能障碍组及对照组。通过微阵列技术高通量筛选两组患者差异表达miRNA。体外构建蒽环类药物诱导H... 目的:探讨蒽环类药物诱导心肌毒性的机制和新的治疗靶点。方法:106例乳腺癌患者根据超声心动图检查鉴别出肿瘤治疗相关心功能障碍,分为心功能障碍组及对照组。通过微阵列技术高通量筛选两组患者差异表达miRNA。体外构建蒽环类药物诱导H9C2心肌细胞损伤模型,通过调控miR-25a-5p的表达,观察miR-25a-5p在蒽环类药物诱导H9C2心肌细胞损伤中的作用。结果:乳腺癌患者中9例发生肿瘤治疗相关心功能障碍,并从两组患者中鉴定出9个差异表达的miRNA。其中8个miRNA在体外模型中进一步得到验证,尤其是miR-25a-5p。通过上调miR-25a-5p,可进一步加重蒽环类药物诱导心肌细胞氧化损伤。结论:miR-25a-5p促进蒽环类药物诱导的心肌损伤,可能是新的生物标志物及治疗靶点。 展开更多
关键词 乳腺癌 蒽环类药物 肿瘤治疗相关心功能障碍 mir-25a-5p
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糖肾地黄汤通过调控lncRNA-ARAP1/miR-25-3p/SGLT2轴延缓糖尿病肾病进展的机制研究
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作者 何小泉 章良佑 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第6期211-215,I0032-I0035,共9页
目的 探究糖肾地黄汤通过调控lncRNA-ARAP1/miR-25-3p/SGLT2轴延缓糖尿病肾病进展的机制。方法 用小鼠单侧肾切除+腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)诱导糖尿病肾病(Diabetic nephropathy, DN)模型,选择糖尿病肾病小鼠模型组共4... 目的 探究糖肾地黄汤通过调控lncRNA-ARAP1/miR-25-3p/SGLT2轴延缓糖尿病肾病进展的机制。方法 用小鼠单侧肾切除+腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)诱导糖尿病肾病(Diabetic nephropathy, DN)模型,选择糖尿病肾病小鼠模型组共45只小鼠,雌性CBA/J 30只,雄性DBA/2 15只,另选正常健康小鼠10只作为正常对照组。将造模的糖尿病肾病小鼠分为模型组、糖肾地黄汤高剂量组(TSDHDHD组)、糖肾地黄汤中剂量组(TSDHDMD组)、糖肾地黄汤低剂量组(TSDHDLD组),每组10只。HE染色检测小鼠的病理学变化,应用全自动生化分析仪对所获得小鼠血清空腹血糖(Fasting blood glucose, FBG),甘油三酯(Triglyceride, TG),胆固醇(Cholesterol, TC)水平,RT-PCR法分析ARAP1、miR-25-3p、SGLT2、Bax/Bcl-2mRNA的表达,免疫印迹法(Westernblot, Wb)分析ARAP1、miR-25-3p、SGLT2、Bax/Bcl-2的蛋白表达。采用SPSS 23.0统计软件。结果 对照组中细胞排列致密整齐、完整,存在少量脂肪细胞(P>0.05);与对照组比较,模型组细胞结构较为散乱,且由稀疏变细,近端脂肪细胞数目增多,差异存在统计学意义(P<0.05);相比模型组,各剂量组糖肾地黄汤脂肪细胞数目下降,比较存在统计学差异(P<0.05)。与对照组相比,模型组、不同剂量糖肾地黄汤组油红O染色镜下IOD表达明显升高(P<0.05);与模型组相比,不同剂量糖肾地黄汤组油红O染色镜下IOD表达降低(P<0.05);与中、低剂量糖肾地黄汤组相比,高剂量糖肾地黄汤组油红O染色镜下IOD表达降低(P<0.05)。治疗前与对照组相比,模型组、不同剂量糖肾地黄汤组模型组FBG水平升高(P<0.05),模型组与不同剂量糖肾地黄汤组相比无统计学差异(P>0.05);与治疗前相比,治疗12周后不同剂量糖肾地黄汤组模型组FBG水平均降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组、不同剂量糖肾地黄汤组TG、TC水平明显升高(P<0.05);与模型组相比,不同剂量糖肾地黄汤组TG、TC水平降低(P<0.05);与中、低剂量糖肾地黄汤组相比,高剂量糖肾地黄汤组TG、TC水平降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组、不同剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2mRNA水平明显升高,Bax/Bcl-2mRNA水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,不同剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2mRNA水平降低,Bax/Bcl-2mRNA水平明显升高(P<0.05);与中、低剂量糖肾地黄汤组相比,高剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2mRNA水平降低,Bax/Bcl-2mRNA水平明显升高(P<0.05)。与对照组相比,模型组、不同剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2蛋白表达明显升高,Bax/Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组相比,不同剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2水平降低,Bax/Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05);与中、低剂量糖肾地黄汤组相比,高剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2蛋白表达降低,Bax/Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论 糖肾地黄汤可能通过调节lncRNA-ARAP1/miR-25-3p/SGLT2轴,从而达到延缓糖尿病肾病进展的目的。 展开更多
关键词 糖肾地黄汤 lncRNA-ARAP1/mir-25-3p/SGLT2轴 糖尿病肾病
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多层螺旋CT联合miR-527、miR-25检测对早期原发性肝癌诊断的临床价值 被引量:1
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作者 李振伟 赵宏伟 杜森 《中国CT和MRI杂志》 2024年第2期105-107,共3页
目的分析多层螺旋CT联合血清miR-527、miR-25检测对早期原发性肝癌诊断的临床价值。方法选取本院2022年1月至2023年5月收治的原发性肝癌患者78例,同期良性肝病患者50例,对患者进行多层螺旋CT扫描,qRT-PCR法检测血清miR-527、miR-25水平... 目的分析多层螺旋CT联合血清miR-527、miR-25检测对早期原发性肝癌诊断的临床价值。方法选取本院2022年1月至2023年5月收治的原发性肝癌患者78例,同期良性肝病患者50例,对患者进行多层螺旋CT扫描,qRT-PCR法检测血清miR-527、miR-25水平。ROC曲线分析血清miR-527、miR-25水平对原发性肝癌的诊断价值;四表格法分析多层螺旋CT联合血清miR-527、miR-25对原发性肝癌的诊断价值。结果原发性肝癌患者血清miR-527、miR-25水平显著高于良性肝病患者(P<0.05);ROC曲线结果表明,血清miR-527水平诊断原发性肝癌的AUC为0.753,敏感性为74.36%,特异性为70.00%;血清miR-25水平诊断发生原发性肝癌的AUC为0.722,敏感性为61.54%,特异性为72.00%。多层螺旋CT扫描诊断结果显示,原发性肝癌患者76例,其中弥漫型肝癌12例,结节型肝癌38例,巨块型肝癌26例;良性肝病患者52例。多层螺旋CT扫描诊断原发性肝癌的敏感性为78.21%(61/78),特异性为70.00%(35/50),准确度为75.00%(96/128);多层螺旋CT扫描对原发性肝癌的诊断结果与术后病理诊断结果具有一致性(Kappa值=0.479,P<0.05)。多层螺旋CT联合血清miR-527、miR-25水平诊断原发性肝癌的敏感性为96.15%(75/78)、特异性为68.00%(34/50),准确度为85.16%(109/128);三者联合对原发性肝癌的诊断结果与术后病理诊断结果具有较好一致性(Kappa值=0.673,P<0.05),且联合诊断的敏感性和准确度显著高于多层螺旋CT、miR-527、miR-25单独诊断(P<0.05)。结论多层螺旋CT联合血清miR-527、miR-25检测对早期原发性肝癌诊断准确度较高,具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 多层螺旋CT mir-527 mir-25 原发性肝癌 诊断
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血清miR-25-3p和IBSP表达在乙型肝炎肝硬化患者病情分期及肝硬化失代偿并发腹腔积液诊断中的应用价值
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作者 吴秋月 李舜 沈江萍 《临床和实验医学杂志》 2024年第12期1253-1256,共4页
目的探讨乙型肝炎肝硬化患者病情分期及肝硬化失代偿并发腹腔积液诊断中血清微小RNA(miR)-25-3p和整合素结合唾液酸蛋白(IBSP)表达的应用价值。方法回顾性选取2021年11月至2023年12月大庆龙南医院收治的乙型肝炎肝硬化患者150例、慢性... 目的探讨乙型肝炎肝硬化患者病情分期及肝硬化失代偿并发腹腔积液诊断中血清微小RNA(miR)-25-3p和整合素结合唾液酸蛋白(IBSP)表达的应用价值。方法回顾性选取2021年11月至2023年12月大庆龙南医院收治的乙型肝炎肝硬化患者150例、慢性乙型肝炎患者50例、健康体检人员50名分别作为肝硬化组、肝炎组、健康组。统计分析3组研究对象的血清miR-25-3p和IBSP表达水平;分析不同临床参数与血清miR-25-3p和IBSP表达水平关系;分析肝硬化患者肝功能评分与血清miR-25-3p和IBSP表达水平的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响肝硬化失代偿并发腹腔积液的因素;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清miR-25-3p和IBSP表达水平单独与联合检测在肝硬化失代偿并发腹腔积液诊断中的价值。结果肝硬化组患者的血清miR-25-3p和IBSP表达水平分别为5.21±0.40、(9.33±1.27)ng/mL,均明显高于肝炎组[1.15±0.33、(3.14±0.36)ng/mL]、健康组[0.91±0.11、(1.01±0.30)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05);肝炎组患者的血清miR-25-3p和IBSP表达水平均明显高于健康组,差异均有统计学意义(P<0.05)。中、重度肝纤维化、有消化道出血、有腹腔积液患者的血清miR-25-3p和IBSP表达水平均分别高于轻度肝纤维化、无消化道出血、无腹腔积液患者,差异均有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄患者的血清miR-25-3p和IBSP表达水平之间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。肝硬化组患者的Child-Pugh评分、血清蛋白胆红素评分(ALBI)、终末期肝病模型评分(MELD)与血清miR-25-3p和IBSP表达水平均呈显著正相关(P<0.05)。肝硬化失代偿并发腹腔积液影响因素包括miR-25-3p、IBSP(P<0.05)。肝硬化失代偿并发腹腔积液诊断中血清miR-25-3p和IBSP表达水平联合检测的曲线下面积、敏感度、特异度和约登指数均明显高于单独检测(P<0.05)。结论乙型肝炎肝硬化患者病情越重,血清miR-25-3p和IBSP表达水平越高。检测血清miR-25-3p和IBSP表达水平能够为乙型肝炎肝硬化病情的判断及肝硬化失代偿并发腹腔积液的诊断提供有效依据。 展开更多
关键词 乙型肝炎肝硬化 mir-25-3p 整合素结合唾液酸蛋白 病情程度 腹腔积液
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血清circCOL1A2和miR-25-3p水平与T2DM合并DR的相关性研究 被引量:1
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作者 单四新 马正 +2 位作者 朱坤良 苑留云 王洪涛 《中国中医眼科杂志》 2024年第6期513-519,538,共8页
目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清环状Ⅰ型胶原α2(circCOL1A2)和微小RNA-25-3p(miR-25-3p)水平与糖尿病视网膜病变(DR)的关系。方法纳入2020年5月—2022年6月在沧州市中心医院进行治疗的T2DM患者108例(216只眼),根据是否发生DR分为DR... 目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清环状Ⅰ型胶原α2(circCOL1A2)和微小RNA-25-3p(miR-25-3p)水平与糖尿病视网膜病变(DR)的关系。方法纳入2020年5月—2022年6月在沧州市中心医院进行治疗的T2DM患者108例(216只眼),根据是否发生DR分为DR组56例(112只眼),非DR(NDR)组52例(104只眼),同时选取同期到本院进行体检的健康者45例(90只眼)作为对照组。分别采集对照组体检时、DR组和NDR组入院后的静脉血4~6 mL。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法检测3组circCOL1A2、miR-25-3p相对表达量,并检测血清生化指标。分析血清circCOL1A2、miR-25-3p水平的相关性,及二者与DR发生的相关性,并评估对DR发生的影响价值。结果(1)circCOL1A2、miR-25-3p水平:3组间血清circCOL1A2水平比较,差异有统计学意义(F=685.891,P=0.000)。NDR、DR组血清circCOL1A2水平均高于对照组,差异均有统计学意义(qNDR=15.969、qDR=50.526,均P=0.000),DR组血清circCOL1A2水平高于NDR组,差异有统计学意义(q=35.641,P=0.000)。3组间血清miR-25-3p水平比较,差异有统计学意义(F=583.834,P=0.000)。NDR、DR组血清miR-25-3p水平均高于对照组,差异均有统计学意义(qNDR=10.101、qDR=45.157,均P=0.000)。DR组血清miR-25-3p水平高于NDR组,差异有统计学意义(q=36.169,P=0.000)。(2)生化指标:DR组和NDR组生化指标比较,DR组患者血清C反应蛋白(CRP)、尿酸(UA)水平均高于NDR组,差异均有统计学意义(tUA=3.320,P=0.001;tCRP=8.705,P=0.000)。2组患者其余血清生化指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)不同分期DR患者血清circCOL1A2、miR-25-3p水平比较:Ⅰ期到Ⅴ期患者血清circCOL1A2水平比较,差异有统计学意义(F=32.900,P=0.000)。且Ⅰ期到Ⅴ期患者circCOL1A2水平依次升高,差异均有统计学意义(qⅠ-Ⅱ=4.102,P=0.042;qⅡ-Ⅲ=4.674,P=0.014;qⅢ-Ⅳ=4.359,P=0.026;qⅣ-Ⅴ=4.347,P=0.027)。Ⅰ期到Ⅴ期患者血清miR-25-3p水平比较,差异有统计学意义(F=32.407,P=0.000)。且Ⅰ期到Ⅴ期患者miR-25-3p水平依次升高,差异均有统计学意义(qⅠ-Ⅱ=5.206,P=0.005;qⅡ-Ⅲ=4.187,P=0.036;qⅢ-Ⅳ=4.165,P=0.037;qⅣ-Ⅴ=4.064,P=0.045)。(4)circCOL1A2、miR-25-3p水平与DR的相关性分析:T2DM患者血清circCOL1A2、miR-25-3p水平均与DR发生呈正相关(rcircCOL1A2=0.382、rmiR-25-3p=0.479,均P=0.000)。(5)血清circCOL1A2与miR-25-3p的相关性分析:T2DM患者血清circCOL1A2与miR-25-3p呈正相关(r=0.564,P=0.000)。(6)T2DM患者DR发生的相关因素分析:CRP、UA、circCOL1A2、miR-25-3p水平为T2DM患者发生DR的危险因素。结论T2DM患者发生DR时血清circCOL1A2、miR-25-3p表达上调,二者与DR发生呈正相关,联合检测对T2DM患者发生DR具有一定的预测价值。 展开更多
关键词 2型糖尿病 circCOL1A2 mir-25-3p 视网膜病变
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急性脑梗死病人血清miR-25表达水平及其对近期预后的预测价值
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作者 高丽 李文华 谷丽丽 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第7期1327-1330,共4页
目的:探讨急性脑梗死病人血清miR-25表达及其对近期预后不良的预测价值。方法:将2020年5月—2022年1月本院收治的179例急性脑梗死病人设为研究组,另将同期在本院体检的163例健康体检者设为对照组,均行血清miR-25表达水平检测并对比。随... 目的:探讨急性脑梗死病人血清miR-25表达及其对近期预后不良的预测价值。方法:将2020年5月—2022年1月本院收治的179例急性脑梗死病人设为研究组,另将同期在本院体检的163例健康体检者设为对照组,均行血清miR-25表达水平检测并对比。随访3个月,根据改良Rankin量表(mRS)评分将研究组分为预后良好组(mRS评分≤2分)和预后不良组(mRS评分>2分),对比预后良好组与预后不良组血清miR-25表达水平。采用Logistic回归分析法分析急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-25表达水平对急性脑梗死病人近期预后不良的预测价值。结果:研究组血清miR-25表达水平低于对照组(P<0.05)。急性脑梗死病人近期预后不良的发生率为42.46%,预后不良组年龄、心房颤动比例、入院美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分、梗死体积、发病至治疗时间、血清胱抑素C(CysC)水平均高于预后良好组,血清miR-25表达水平低于预后良好组(P<0.05)。年龄、心房颤动、入院NIHSS评分、梗死体积、发病至治疗时间、血清CysC水平、血清miR-25表达水平均是急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素(P<0.05)。血清miR-25表达水平预测急性脑梗死病人近期预后不良的最佳截断值、敏感度、特异度、ROC曲线下面积(AUC)分别是0.640、72.37%、65.05%、0.731。结论:急性脑梗死病人血清miR-25表达水平降低,且为急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素,对近期预后不良有一定的预测价值。 展开更多
关键词 急性脑梗死 血清mir-25 预后不良 影响因素 预测价值
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胶质瘤患者LncRNA SNHG25、miR-497-5p水平及其与临床病理特征和预后的相关性研究
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作者 李雯 张琼 +1 位作者 任静 程娜 《微循环学杂志》 2024年第4期68-72,共5页
目的:探讨胶质瘤组织LncRNA SNHG25、miR-497-5p表达与患者临床病理特征及预后的相关性。方法:选取本院2018-01-2020-03收治的84例胶质瘤患者为观察组,并同期选取84例因颅脑损伤并接受手术治疗的患者为对照组。分别手术切除胶质瘤组织... 目的:探讨胶质瘤组织LncRNA SNHG25、miR-497-5p表达与患者临床病理特征及预后的相关性。方法:选取本院2018-01-2020-03收治的84例胶质瘤患者为观察组,并同期选取84例因颅脑损伤并接受手术治疗的患者为对照组。分别手术切除胶质瘤组织和正常脑组织后,比较两组LncRNA SNHG25、miR-497-5p水平。比较观察组中不同临床特征患者LncRNA SNHG25、miR-497-5p水平的差异。采用Pearson相关法分析两组患者LncRNA SNHG25水平与miR-497-5p水平相关性。对观察组患者随访3年,根据是否死亡分为死亡组和存活组,比较两组LncRNA SNHG25、miR-497-5p水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析LncRNA SNHG25、miR-497-5p水平对胶质瘤患者预后预测的临床价值。结果:与对照组比较,观察组LncRNA SNHG25水平升高,miR-497-5p水平降低(P<0.05)。在胶质瘤患者中,与肿瘤直径<4cm、WHO分级为Ⅰ-Ⅱ级的患者比较,肿瘤直径≥4cm、WHO分级为Ⅲ-Ⅳ级患者LncRNA SNHG25水平升高,miR-497-5p水平降低(P<0.05);相关性分析结果显示,胶质瘤患者LncRNA SNHG25水平与miR-497-5p水平呈负相关(r=-0.369,P<0.01),ROC曲线结果显示,当LncRNA SNHG25截断值为1.83时,预测胶质瘤患者预后的AUC为0.86;当miR-497-5p截断值为0.91时,预测胶质瘤患者预后的AUC为0.91。结论:胶质瘤患者LncRNA SNHG25和miR-497-5p水平与肿瘤直径、分期有关,二者对辅助评估预后具有一定临床价值。 展开更多
关键词 胶质瘤 LncRNA SNHG25 mir-497-5p 预后
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血清miR-25-3p、CXCL12水平与非小细胞肺癌患者胸腔镜肺叶切除术后预后的关系分析
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作者 陈斌 仲崇浩 +2 位作者 方昭 陈涛 吴玮 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第9期1643-1648,共6页
目的:分析血清miR-25-3p、脊髓趋化因子CXC配体12(CXCL12)与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者胸腔镜肺叶切除术后预后的关系。方法:选择2017年02月至2020年07月医院收治的175例NSCLC患者,所有患者均接受胸腔镜肺叶... 目的:分析血清miR-25-3p、脊髓趋化因子CXC配体12(CXCL12)与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者胸腔镜肺叶切除术后预后的关系。方法:选择2017年02月至2020年07月医院收治的175例NSCLC患者,所有患者均接受胸腔镜肺叶切除术治疗。术前检测患者血清miR-25-3p、CXCL12水平,术后随访3年,根据患者预后情况分为预后不良组(复发转移)与预后良好组(非复发转移)。对比预后不良组与预后良好组血清miR-25-3p、CXCL12水平,对比预后不良组与预后良好组的临床资料,分析NSCLC患者术后预后不良的影响因素,分析血清miR-25-3p、CXCL12水平及二者联合对NSCLC患者术后预后不良的预测价值。结果:随访3年,175例患者失访6例,随访率为96.57%,其中复发转移31例,复发转移率为18.34%,剩余138例均未发生复发转移,中位复发转移时间为24.75个月(95%CI:18.32~28.47)。预后不良组血清miR-25-3p、CXCL12水平高于预后良好组(P<0.05)。预后不良组Ⅱ期、低分化例数占比高于预后良好组(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,Ⅱ期(HR=3.827,95%CI:1.682~8.705)、低分化(HR=3.466,95%CI:1.524~7.884)、血清miR-25-3p(HR=2.732,95%CI:1.201~6.215)、血清CXCL12(HR=3.152,95%CI:1.386~7.170)为NSCLC患者术后预后不良的影响因素(P<0.05)。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线结果显示,血清miR-25-3p、CXCL12水平及二者联合预测NSCLC患者术后预后不良的灵敏度分别为80.65%(95%CI:0.627~0.853)、83.87%(95%CI:0.641~0.869)、93.55%(95%CI:0.782~0.973),特异度分别为78.26%(95%CI:0.602~0.835)、76.09%(95%CI:0.584~0.791)、91.30%(95%CI:0.769~0.934),曲线下面积(area under curve,AUC)值分别为0.767、0.755、0.908(P<0.05),且二者联合的AUC值更高(P<0.05)。结论:术前检测血清miR-25-3p、CXCL12水平可用于预测NSCLC患者胸腔镜肺叶切除术后预后,且二者联合的预测价值更高。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 mir-25-3p 脊髓趋化因子CXC配体12 胸腔镜肺叶切除术 预后 预测价值
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IL-18 sTLT-1及miR-25对脑梗死复发风险的预测价值
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作者 向文杰 梁勇 毛文 《中国实用神经疾病杂志》 2024年第5期563-567,共5页
目的探讨miR-25、白细胞介素18(IL-18)、可溶性髓样细胞触发受体样转录因子-1(sTLT-1)在脑梗死患者复发中的预测价值。方法 选取三二〇一医院收治的154例脑梗死患者为脑梗死组,对脑梗死组患者随访1 a,根据是否复发分为复发组和非复发组... 目的探讨miR-25、白细胞介素18(IL-18)、可溶性髓样细胞触发受体样转录因子-1(sTLT-1)在脑梗死患者复发中的预测价值。方法 选取三二〇一医院收治的154例脑梗死患者为脑梗死组,对脑梗死组患者随访1 a,根据是否复发分为复发组和非复发组,比较2组临床资料及血清miR-25、IL-18及s TLT-1表达情况。单因素和Logistic回归分析影响患者复发的独立危险因素。采用ROC曲线分析miR-25、IL-18、sTLT-1在预测患者复发中的临床价值。结果 脑梗死组共46例患者出现复发,相较于未复发组,复发组miR-25[32.00(23.31,34.68)比11.89(7.67,19.39)]、IL-18[(44.75±12.38)ng/L比(23.36±10.49)ng/L]及sTLT-1[(484.61±83.90)ng/L比(325.72±99.17)ng/L]水平更高(P<0.05)。单因素及多因素Logistic回归分析显示,吸烟史、高血压史、miR-25≥11.89、IL-18≥23.36 ng/L、sTLT-1≥325.72 ng/L是影响患者复发的独立危险因素。ROC曲线显示,当miR-25截断值为20.97、IL-18截断值为28.92 ng/L、sTLT-1截断值为388.03 ng/L时预测患者复发的AUC均>0.700。结论 脑梗死复发患者血清miR-25、IL-18及sTLT-1水平显著上升,且miR-25、IL-18及sTLT-1水平在预测脑梗死患者复发中具有一定临床价值。 展开更多
关键词 脑梗死 mir-25 白介素18 可溶性髓样细胞触发受体样转录因子-1 复发
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胃癌患者血清miR-101与miR-25的动态变化及其诊断价值 被引量:9
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作者 宋雅琴 温旺荣 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期259-266,共8页
目的:探讨miR-101与miR-25在胃癌术前术后血清中的表达及其与病理因素间的关系,探讨其是否能作为胃癌早期诊断的新型生物标志物.方法:应用实时荧光定量(PCR)检测58例胃癌(其中31例配对胃癌术前术后),30例胃癌癌前病变,30例正常对照血清m... 目的:探讨miR-101与miR-25在胃癌术前术后血清中的表达及其与病理因素间的关系,探讨其是否能作为胃癌早期诊断的新型生物标志物.方法:应用实时荧光定量(PCR)检测58例胃癌(其中31例配对胃癌术前术后),30例胃癌癌前病变,30例正常对照血清miR-101与miR-25的相对表达量,比较miR-101与miR-25在胃癌术前术后表达差异,及其与病理参数的关系,绘制研究对象工作特征曲线(ROC),评估血清miR-101与miR-25对胃癌的临床诊断价值.结果:胃癌血清miR-101表达水平显著性低于正常对照组(P<0.01)及胃癌癌前病变组(P<0.01),而胃癌血清miR-25(P<0.01)表达水平显著升高.胃癌术后血清miR-101表达水平明显高于术前(P=0.007),而血清miR-25在胃癌术后显著性降低(P=0.011).ROC曲线分析显示血清miR-101与miR-25对胃癌诊断价值较高[miR-101:ROC曲线下面积(Area Under roc Curve,AUC)=0.857,敏感度=0.710,特异度=0.881;miR-25:AUC=0.821,敏感度=0.702,特异度=0.800],而血清miR-101与miR-25联合诊断胃癌的AUC为0.905,其敏感性和特异性分别为75.9%和86.7%.进一步分析发现胃癌血清miR-101低表达与幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染有关,miR-101表达水平在感染HP的胃癌血清中显著低于未感染HP的胃癌血清(P=0.012);胃癌血清miR-101低表达与胃癌淋巴结转移(P=0.033)和临床分期(P=0.015)显著相关;胃癌血清miR-25在高临床分期(P=0.018)和淋巴结转移(P<0.001)表达水平升高.结论:血清miR-101与miR-25可能作为胃癌术前术后动态监测和胃癌诊断的新型潜在标志物. 展开更多
关键词 胃癌 mir-101 mir-25 血清标志物
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血清miR-25和miR-100作为食管鳞状细胞癌诊断和预后标志物研究 被引量:7
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作者 王静 王成 张春妮 《现代检验医学杂志》 CAS 2015年第5期17-21,共5页
目的 探讨血清miR-25和miR-100对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)的诊断和预后价值.方法 收集2011年6月~2014年5月南京军区南京总医院及徐州市肿瘤医院63例ESCC患者术前、术后及随访血清,并收集63例年龄、... 目的 探讨血清miR-25和miR-100对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)的诊断和预后价值.方法 收集2011年6月~2014年5月南京军区南京总医院及徐州市肿瘤医院63例ESCC患者术前、术后及随访血清,并收集63例年龄、性别匹配的非癌健康人血清作为对照;实时荧光定量PCR法检测血清miR-25和miR-100含量.用非参数Mann-Whitney U检验ESCC患者组和对照组血清miR-25和miR-100表达水平的差异,配对t检验分析ESCC患者术前术后血清中miR-25和miR-100的表达量变化,受试者工作特征曲线(ROC)评估血清miR-25和miR-100对ES-CC的诊断价值,单因素Kaplan-Meier法分析对ESCC患者生存的影响.结果 与健康对照相比,ESCC患者血清miR-25(0.40±0.20 vs 0.02±0.01)和miR-100的相对含量(0.10±0.02 vs 0.04±0.00)显著升高,差异具有统计学意义(U值分别为885.0和1 006.0,P值均<0.01);血清miR-25和miR-100的ROC曲线下面积AUC均明显大于癌胚抗原;ESCC患者术后血清miR-100含量较术前明显降低(0.07±0.01 vs 0.10±0.02),差异具有统计学意义(t=2.367,P=0.021);单因素Kaplan-Meier法分析显示血清miR-25和miR-100表达阴性的ESCC患者的生存期明显高于阳性患者(P<0.05).结论 血清miR-25和miR-100可作为ESCC诊断及预后评估的潜在标志物. 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 mir-25 mir-100 诊断 预后
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人脑胶质瘤中miR-106b^25基因簇表达的研究 被引量:6
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作者 叶敏华 张安玲 +3 位作者 王坤 吴淼经 黄强 祝新根 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期281-285,共5页
目的:检测胶质瘤细胞系及组织中miR-106b^25基因簇成员miR-106b、miR-93、miR-25的表达情况。方法:运用实时定量PCR的方法检测不同人脑胶质母细胞瘤细胞系及不同病理级别胶质瘤标本中miR-106b^25基因簇成员miR-106b、miR-93和miR-25的... 目的:检测胶质瘤细胞系及组织中miR-106b^25基因簇成员miR-106b、miR-93、miR-25的表达情况。方法:运用实时定量PCR的方法检测不同人脑胶质母细胞瘤细胞系及不同病理级别胶质瘤标本中miR-106b^25基因簇成员miR-106b、miR-93和miR-25的表达水平。原位杂交技术检测含不同病理级别及瘤旁正常脑组织的胶质瘤组织芯片中miR-106b^25基因簇成员的表达情况,进而分析该簇miRNAs的表达与胶质瘤病理级别的相关性。结果:以正常脑组织表达量为基准,3种miRNA在所有检测细胞系中均有增高的趋势。收集43例胶质瘤标本中,RT-PCR结果显示,随着肿瘤病理级别的升高,3种miRNA在各组中的平均表达量也逐步升高。其中,miR-106b(F=4.479,P=0.018)和miR-93(F=3.493,P=0.040)各组间的表达差异均有统计学意义。而miR-25表达无明显的统计学差异(F=2.766,P=0.075)。原位杂交结果显示3种miRNA的表达在高级别胶质瘤中的表达量明显高于低级别肿瘤。Spearman等级相关分析表明3种miRNA的表达信号强度分布均与胶质瘤的WHO病理分级呈正相关,在miR-106b、-93、-25中的相关系数分别为rs=0.617(P<0.001)、rs=0.438(P<0.001)、rs=0.463(P<0.001)。结论:miR-106b^25在胶质瘤中表达呈不同程度增高,并与肿瘤分级呈正相关。 展开更多
关键词 mir-106b-25 miRNA表达胶质瘤
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miR-25靶向RECK促进宫颈癌HeLa细胞的增殖 被引量:2
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作者 邱刚 房保栓 +3 位作者 辛国宏 魏强 苑晓烨 吴大勇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期40-43,共4页
目的探讨微小RNA-25(miR-25)对宫颈癌He La细胞增殖活性的影响及其与逆向诱导的带Kazal基序的富含半胱氨酸蛋白(RECK)的靶向关系。方法构建pc DNATM6.2-GW-pre-miR-25、pmir GLO-野生型RECK(RECK-WT)和突变型RECK(RECK-MT)真核表达载体... 目的探讨微小RNA-25(miR-25)对宫颈癌He La细胞增殖活性的影响及其与逆向诱导的带Kazal基序的富含半胱氨酸蛋白(RECK)的靶向关系。方法构建pc DNATM6.2-GW-pre-miR-25、pmir GLO-野生型RECK(RECK-WT)和突变型RECK(RECK-MT)真核表达载体及miR-25抑制剂(anti-miR-25),采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测pre-miR-25和anti-miR-25在He La细胞中的转染效率,并采用MTT法分析miR-25对He La细胞增殖活性的影响,双萤光素酶报告基因、qRT-PCR和Western blot法检测miR-25与RECK靶向关系。结果测序结果显示pc DNATM6.2-GW-pre-miR-25、pmir GLO-RECK-WT和pmir GLO-RECK-MT重组载体构建成功,qRT-PCR提示pre-miR-25与anti-miR-25在He La细胞中具有良好的转染效率。MTT结果显示miR-25能够明显促进He La细胞的增殖。双萤光素酶报告基因检测显示共转染pre-miR-25与RECK-WT的He La细胞其萤光活性显著下降,同时qRT-PCR及Western blot也显示anti-miR-25在转录和转录后水平均能够显著增加He La细胞中RECK的表达。结论miR-25能够靶向RECK,促进宫颈癌He La细胞的增殖。 展开更多
关键词 宫颈癌 He La细胞 mir-25 RECK 增殖
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miR-25靶向抑制KLF4促进胃癌细胞增殖 被引量:6
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作者 丁小丽 夏宇 胡蓉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第6期867-871,共5页
目的:探讨micro RNA-25(mi R-25)是否靶向抑制KLF4基因调控胃癌细胞生长,阐明mi R-25在胃癌细胞中的作用及其机制。方法:q RT-PCR技术检测35对胃癌及癌旁组织中mi R-25及KLF4的表达。运用生物信息学分析软件Targetscan预测mi R-25的靶... 目的:探讨micro RNA-25(mi R-25)是否靶向抑制KLF4基因调控胃癌细胞生长,阐明mi R-25在胃癌细胞中的作用及其机制。方法:q RT-PCR技术检测35对胃癌及癌旁组织中mi R-25及KLF4的表达。运用生物信息学分析软件Targetscan预测mi R-25的靶基因。双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证mi R-25是否靶向抑制KLF4。分别下调mi R-25及干扰和过表达KLF4后采用MTT及克隆形成实验检测细胞增殖。挽救实验验证KLF4是否能减弱mi R-25的生物学功能。结果:mi R-25在胃癌组织中高表达,KLF4呈低表达。抑制mi R-25能显著降低胃癌细胞的增殖,上调mi R-25的表达结果则相反。mi R-25负调控KLF4促进胃癌细胞增殖,而过表达KLF4能明显减弱mi R-25的促增殖效应。结论:mi R-25靶向抑制KLF4促进胃癌细胞增殖。 展开更多
关键词 胃肿瘤 mir-25 KLF4 ERK通路
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外周血miR-25表达与急性脑梗死患者凋亡分子含量及90天预后的相关性 被引量:11
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作者 张子英 王新华 +1 位作者 席妹景 闫莹莹 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2020年第9期773-777,共5页
目的探讨急性脑梗死患者外周血miR-25表达与凋亡分子含量及90天预后的相关性。方法选取急性脑梗死患者162例为急性脑梗死组,体检健康者150例为正常对照组。测定两组外周血miR-25及凋亡分子含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、... 目的探讨急性脑梗死患者外周血miR-25表达与凋亡分子含量及90天预后的相关性。方法选取急性脑梗死患者162例为急性脑梗死组,体检健康者150例为正常对照组。测定两组外周血miR-25及凋亡分子含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤2基因(Bcl-2)的水平。根据改良Rankin量表(mRS)评分将随访90天的预后情况分为预后良好(mRS评分≤2分)和预后不良(mRS评分>2分)。比较不同预后急性脑梗死患者的临床资料,并进一步行Logistic回归分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估急性脑梗死患者外周血miR-25表达水平对90天不良预后的预测价值。结果急性脑梗死组患者外周血miR-25、Bcl-2表达水平低于正常对照组,Caspase-3水平高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析发现,急性脑梗死患者外周血miR-25表达水平与Bcl-2表达水平呈正相关,与Caspase-3表达水平呈负相关(P<0.05)。急性脑梗死患者随访90天预后良好119例、预后不良43例。不同预后急性脑梗死患者的年龄、发病至治疗时间、入院当天NIHSS评分的差异有统计学意义(P<0.05),其余临床资料差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析发现,年龄较大、入院当天NIHSS评分较高、外周血miR-25表达水平较低是急性脑梗死患者90天预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线发现,外周血miR-25表达水平预测急性脑梗死患者90天预后不良的截断值为0.635,AUC为0.699(95%CI 0.609~0.789),对应的敏感度、特异度分别为72.09%、65.55%。结论急性脑梗死患者外周血miR-25表达水平降低,可能参与凋亡分子的表达调控。低水平miR-25是急性脑梗死患者预后不良的危险因素,且具有一定早期预测价值。 展开更多
关键词 急性脑梗死 mir-25 凋亡分子 90天预后
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miR-106b~25基因簇增强乳腺癌MCF-7肿瘤干细胞相关耐药性 被引量:3
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作者 胡蕴慧 盛梦瑶 +4 位作者 张孝云 李双静 范冬梅 熊冬生 周圆 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1070-1075,共6页
目的探讨乳腺癌细胞中miR-106b~25基因簇过表达与肿瘤耐药形成及乳腺癌干细胞特性的关系。方法利用慢病毒表达载体,在乳腺癌细胞系MCF-7中建立稳定过表达miR-106b~25基因簇,建立MCF-7-mirC细胞系,观察细胞对化疗药物敏感性的改变。利... 目的探讨乳腺癌细胞中miR-106b~25基因簇过表达与肿瘤耐药形成及乳腺癌干细胞特性的关系。方法利用慢病毒表达载体,在乳腺癌细胞系MCF-7中建立稳定过表达miR-106b~25基因簇,建立MCF-7-mirC细胞系,观察细胞对化疗药物敏感性的改变。利用细胞毒性实验、耐药克隆形成实验、细胞衰老相关β-半乳糖苷酶染色对细胞的耐药状况进行评价;通过流式细胞术和实时定量PCR测定P-gp的表达;通过微球体(mammosphere)培养实验及对乙醛脱氢酶(ALDH1)活性的检测评价MCF-7-mirC肿瘤干细胞特性的变化。结果过表达miR-106b~25基因簇能帮助细胞更快脱离由阿霉素引起的细胞衰老状态,促进耐药克隆的生长。但是,miR-106b~25基因簇对P糖蛋白(P-gp)在mRNA和蛋白水平表达均无影响。对ALDH1的检测及mammo-sphere形成实验结果显示,过表达miR-106b~25基因簇能提高MCF-7细胞中肿瘤干细胞的比例。结论 miR-106b~25基因簇对乳腺癌MCF-7细胞耐药性的调控不依赖于P-gp表达,至少与促进肿瘤干细胞特性有关。 展开更多
关键词 mir-106b^25 乳腺癌 肿瘤干细胞 肿瘤耐药 细胞衰老 P糖蛋白
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miR-106b-25基因簇在小鼠肝泡型包虫病中的表达 被引量:3
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作者 叶建蔚 刘辉 +4 位作者 吕国栋 林仁勇 忙尼沙汗·阿不都拉 毛睿 包永星 《临床和实验医学杂志》 2016年第23期2296-2300,共5页
目的探讨miR-106b-25基因簇(miR-93,miR-106b)在肝泡型包虫病中的表达及靶基因预测。方法Balb/c小鼠40只随机分为实验组24只(注射0.1 ml泡球蚴组织匀浆液)、对照组15只(注射0.1 ml生理盐水),正常组1只(不作任何处理)。分别收集实验组和... 目的探讨miR-106b-25基因簇(miR-93,miR-106b)在肝泡型包虫病中的表达及靶基因预测。方法Balb/c小鼠40只随机分为实验组24只(注射0.1 ml泡球蚴组织匀浆液)、对照组15只(注射0.1 ml生理盐水),正常组1只(不作任何处理)。分别收集实验组和对照组小鼠1月、3月和6月肝脏标本,提取RNA并定量测定miR-93和miR-106b的相对表达量,预测miR-93和miR-106b的靶基因。结果在感染3月实验组小鼠的肝内miR-93和miR-106b相对表达量分别为3.704±1.776和5.901±2.921,明显高于对照组和正常组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组1月和6月的相对表达量与对照组和正常组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);经生物信息数据库比对后可知p21可能是miR-93、miR-106b共同的目的基因,主要发挥调控细胞周期及参与细胞凋亡等功能。结论miR-93和miR-106b在肝泡型包虫病中的表达差异可能与靶基因p21有关。miR-106b-25基因簇可能参与泡球蚴肝损伤的过程。 展开更多
关键词 小鼠 MICRORNA mir-106b-25基因簇 泡球蚴
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MiR-25-3p靶向NOTCH1对食管鳞癌细胞ECA109侵袭、迁移、增殖的影响 被引量:6
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作者 薛亚军 杜雅彦 +2 位作者 周奕君 董星星 魏育涛 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第1期75-80,共6页
目的探讨miR-25-3p靶向NOTCH1基因对食管鳞癌细胞侵袭、迁移和增殖的影响,阐明miR-25-3p和NOTCH1基因在食管鳞癌中的作用机制。方法将ECA109细胞以1×10~6/ml均匀接种于培养皿,每组设3个复孔,实验分为两组。第1组:miR-25-3p上调组(... 目的探讨miR-25-3p靶向NOTCH1基因对食管鳞癌细胞侵袭、迁移和增殖的影响,阐明miR-25-3p和NOTCH1基因在食管鳞癌中的作用机制。方法将ECA109细胞以1×10~6/ml均匀接种于培养皿,每组设3个复孔,实验分为两组。第1组:miR-25-3p上调组(转染miR-25-3p模拟物)、miR-25-3p下调组(转染miR-25-3p抑制剂)和NC组;第2组:NOTCH1上调组(转染NOTCH1模拟物)、NOTCH1下调组(转染NOTCH1抑制剂)和NC组。实时荧光定量PCR法分别检测各组miR-25-3p、NOTCH1表达水平,Transwell小室检测转染miR-25-3p、NOTCH1后ESCC细胞侵袭能力,CCK-8检测细胞增殖能力,生物信息学分析和荧光素酶活性测定以确定NOTCH1是否为miR-25-3p的靶基因。结果①NOTCH1是miR-25-3p的靶基因;②细胞实验结果显示,与NC组相比,miR-25-3p上调组促进ECA109细胞的侵袭(P<0.05),CCK-8增殖试验显示在ECA109细胞中miR-25-3p上调组促进细胞增殖(P<0.05);③下调NOTCH1促进细胞生长(P<0.05),下调NOTCH1可增强ECA109细胞的侵袭能力(P<0.005),上调NOTCH1可抑制ECA109细胞的侵袭能力(P<0.005)。结论 miR-25-3p通过靶向调节NOTCH1促进人ESCC细胞的侵袭、迁移和增殖,miR-25-3p有望成为ESCC治疗的新靶点。 展开更多
关键词 mir-25-3p ESCC NOTCH1 侵袭 增殖 生物信息学分析
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miR-25通过TGF-β1途径降低缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡 被引量:3
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作者 徐敏 岳峰 +4 位作者 宋勃 周松 黄晶 田水 刘启方 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期3045-3048,共4页
目的 探讨miR-25在缺氧/复氧诱导H9C2心肌细胞凋亡过程中的作用及机制。方法 H9C2细胞培养24 h后进行慢病毒感染,空白对照(control)组未进行转染;阴性对照(Lv-control)组转染Lv-control-miRNA模拟物(mimic);Lv-anti-control组转染Lv-con... 目的 探讨miR-25在缺氧/复氧诱导H9C2心肌细胞凋亡过程中的作用及机制。方法 H9C2细胞培养24 h后进行慢病毒感染,空白对照(control)组未进行转染;阴性对照(Lv-control)组转染Lv-control-miRNA模拟物(mimic);Lv-anti-control组转染Lv-control-miRNA-抑制剂(inhibitor);Lv-miR-25组转染Lv-miR-25 mimic;Lv-anti-miR-25组转染Lv-miR-25 inhibitor。按照脂质体转染试剂Lipofectamine2000试剂盒说明,Contol-shRNA组转染control-shRNA;HMGB1-shRNA组转染HMGB1-shRNA,经培养后筛出稳定细胞系。选取高表达miR-25 H9C2心肌细胞,Lv-miR-25组转染Lv-miR-25 mimic, Lv-miR-25+SB431542组转染Lv-miR-25 mimic后加入TGF-β1/Smads抑制剂SB431542共培养。稳定转染后给予缺氧/复养处理。Western印迹检测高迁移率族蛋白(HMG)B1、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved caspase)-3、转化生长因子(TGF)-β1、Smad3、磷酸化(p)-Samd3、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2、p-ERK1/2蛋白表达。流式细胞术检测细胞凋亡。结果 Lv-miR-25组HMGB1、Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著低于control组、Lv-control组、Lv-anti-control组、Lv-anti-miR-25组(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著高于control组、Lv-control组、Lv-anti-control组、Lv-anti-miR-25组(P<0.05)。与Contol-shRNA组比较,HMGB1-shRNA组HMGB1、TGF-β1、p-Samd3、Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著下降(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著上升(P<0.05)。与Lv-miR-25组比较,Lv-miR-25+SB431542组Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平及细胞凋亡率显著下降(P<0.05)。结论 miR-25抑制缺氧/复氧诱导的H9C2细胞凋亡,其作用机制通过靶向调控HMGB1,降低TGF-β1导致的心肌凋亡。 展开更多
关键词 mir-25 缺血/再灌注 细胞凋亡 转化生长因子(TGF)-β1
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肉牛DKK3基因3'UTR双荧光素酶报告质粒构建及与miR-25的靶向验证 被引量:3
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作者 张凤 陈明新 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2022年第6期135-140,共6页
实验旨在鉴定miR-25与肉牛DKK3基因之间的靶向关系,为开展miR-25调控肉牛肌内脂肪生成的分子机制研究奠定基础。利用生物信息学分析软件TargetScan预测miR-25的潜在靶基因及结合位点,然后PCR扩增包含miR-25结合位点的肉牛DKK3基因3’非... 实验旨在鉴定miR-25与肉牛DKK3基因之间的靶向关系,为开展miR-25调控肉牛肌内脂肪生成的分子机制研究奠定基础。利用生物信息学分析软件TargetScan预测miR-25的潜在靶基因及结合位点,然后PCR扩增包含miR-25结合位点的肉牛DKK3基因3’非编码区(3’UTR)片段,构建DKK33’UTR野生型、突变型及删除型双荧光素酶报告基因质粒,并分别与miR-25 mimics和mimics NC共转染牛肾细胞(MDBK),检测双荧光素酶活性;此外,miR-25 mimics、mimics NC、miR-25 inhibitor、inhibitor NC分别转染MDBK细胞,荧光定量PCR和Western blot检测DKK3表达量。结果表明:TargetScan软件预测到miR-25具有包括DKK3在内的共944个潜在靶基因,且与DKK3结合的靶位点位于DKK3基因3’UTR的25~32 bp处;构建的3种质粒经双酶切后释放出大小约321 bp的条带,测序结果与预期一致,表明质粒构建成功;miR-25mimics可显著降低DKK3野生型质粒的双荧光素酶活性;过表达miR-25显著抑制DKK3表达,而抑制miR-25后DKK3的表达量显著上升。综上所述,本研究结果表明miR-25可靶向肉牛DKK3 3’UTR,并抑制其表达。 展开更多
关键词 肉牛 mir-25 DKK3 双荧光素酶
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