鳞翅目核仁小RNA Sf-15在逆境胁迫下的表达分析

核仁小RNA(small nucleolar RNA,snoRNA)除了能够指导rRNA修饰外,在肿瘤发生及生物响应逆境胁迫中也发挥着重要作用。课题组在前期研究中发现一个家蚕C/D box snoRNA Bm-15在鳞翅目昆虫中高度保守,在草地贪夜蛾细胞Sf9中干涉此snoRNA同源序列Sf-15后,细胞出现凋亡现象,与逆境相关的基因表达变化显著。为了进一步研究该snoRNA的功能,对Sf9细胞施加非生物胁迫紫外线照射(ultraviolet,UV)和生物胁迫病毒感染,检测snoRNA Sf-15在胁迫条件下表达量的变化。结果发现,UV处理后Sf9细胞中snoRNA Sf-15迅速响应,处理后4 h表达即上调,至8 h达高峰,随后其表达量逐渐下降;而且随着UV剂量的增大,snoRNA Sf-15的诱导表达量逐渐升高。Sf9细胞被AcMNPV病毒感染后,snoRNA Sf-15呈现先下降后上升再下降的趋势,感染后48 h表达量最高,病毒感染组48 h后Sf-15表达量整体高于对照组。结果表明snoRNA Sf-15在细胞响应非生物及生物胁迫过程中均发挥着重要的作用。该研究在鳞翅目昆虫中发现snoRNA可以参与细胞的逆境胁迫反应,为探索昆虫snoRNA的功能提供了新的思路。

血清CA_125、CA_(15～3)和SF联合测定在卵巢肿瘤诊断中的意义

对５１例卵巢良、恶性肿瘤和２８例对照者的血清进行癌抗原１２５（ＣＡ１２５），癌抗原１５—３（ＣＡ１５—３）和铁蛋白（ＳＦ）等指标检测。结果：⑴卵巢恶性肿瘤者血清三项指标均值全部高于对照者和卵巢良性肿瘤患者，差异有显著性（Ｐ＜００５～００１）；⑵Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌各项指标阳性率高于Ⅰ、Ⅱ期患者（Ｐ＜００５～００１），上皮性癌患者各指标阳性率高于非上皮性癌患者（Ｐ＜００５）；⑶判断卵巢的良、恶性，单项指标以ＣＡ１２５的诊断性能最好；⑷多项指标联合以ＣＡ１２５＋ＣＡ１５—３＋ＳＦ中任意二项同时增高作为阳性标准诊断性能最好。

半边旗提取物5F诱导HepG2细胞凋亡与p53活化及血管内皮生长因子抑制有关

目的观察半边旗提取物Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid(5F)对人肝癌细胞HepG2增殖的影响,并探讨p53、血管内皮生长因子(VEGF)及Caspase-3在5F诱导的HepG2细胞凋亡中的作用。方法采用MTT分析检测5F对HepG2细胞增殖的影响,并通过细胞凋亡检测ELISA试剂盒分析经5F处理的HepG2细胞胞浆核小体片段,以确定5F能否诱导细胞凋亡,采用Hoechst/PI分析鉴定凋亡细胞核形态。通过免疫印迹(Western blotting)分析测定p53及VEGF蛋白表达水平,并通过Caspases-3分光光度法检测试剂盒检测Caspase-3活性。结果通过细胞活性分析证实,5F对HepG2的细胞毒作用随着5F质量浓度的升高而增强。5F诱导HepG2产生胞浆核小体片段,并且该诱导作用具有剂量依赖性。5F处理后,凋亡变化,如染色质浓缩,被Hoechst/PI染色所确定。5F处理后HepG2细胞核内p53表达水平显著提高,而胞浆VEGF表达水平却下降,同时,Caspase-3活性通过浓度依赖方式增强。结论5F所诱导的HepG2细胞凋亡与p53及Caspase-3活化、VEGF负调控有关。5F可能具有抗癌尤其是抗肝细胞癌价值。