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衰老SH⁃SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型的建立
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作者 张巧添 蒋嫦月 +3 位作者 诸葛详真 李德丽 胡婉湘 谢露 《海南医学院学报》 CAS 2023年第6期401-407,共7页
目的:探讨衰老SH‑SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型的建立。方法:将SH‑SY5Y细胞随机分为对照(D‑半乳糖0 mmol/L)、D‑半乳糖(25 mmol/L、50 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、400 mmol/L)组,分别给予对应浓度的D‑半乳糖处理48 h,显微镜观察... 目的:探讨衰老SH‑SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型的建立。方法:将SH‑SY5Y细胞随机分为对照(D‑半乳糖0 mmol/L)、D‑半乳糖(25 mmol/L、50 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、400 mmol/L)组,分别给予对应浓度的D‑半乳糖处理48 h,显微镜观察细胞形态的改变、β‑半乳糖苷酶试剂盒检测β‑半乳糖苷酶活性、EdU试剂盒检测细胞增殖率以及CCK‑8法检测细胞存活率,确定D‑半乳糖致衰浓度,建立衰老模型。将衰老SH‑SY5Y细胞随机分为对照(氧糖剥夺不处理)、氧糖剥夺处理(0.5 h、1 h、1.5 h、2 h)组,随后复糖复氧24 h,CCK‑8检测衰老SH‑SY5Y细胞存活率。结果:25 mmol/L、50 mmol/L组的细胞形态、β‑gal活性与对照组比较没有明显变化(P>0.05),100 mmol/L组细胞可见胞体肥大,200 mmol/L组细胞染色质固缩,400 mmol/L组细胞出现大量空泡化;(100 mmol/L~400 mmol/L)组细胞β‑半乳糖苷酶染色阳性率与对照组比明显升高(P<0.05),100 mmol/L、200 mmol/L组间差异不大(P>0.05);(100 mmol/L~400 mmol/L)组细胞增殖能力明显下降,呈浓度依赖性降低(P<0.05);细胞存活率呈浓度依赖性降低(P<0.05),IC50在100 mmol/L和200 mmol/L之间。衰老SH‑SY5Y细胞存活率呈氧糖剥夺时间依赖性降低(P<0.05),IC50接近1 h。结论:D‑半乳糖浓度为100 mmoL/L且作用细胞48 h,可建立存活率约50%的衰老SH‑SY5Y细胞模型,氧糖剥夺衰老SH‑SY5Y细胞1 h再灌注24 h可建立存活率接近50%的衰老SH‑SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 氧糖剥夺/再灌注 衰老 D‑半乳糖 sh‑Sy5y细胞
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A Comparative Study of YīJiàn Xiǎo Shìand A Small Incident Rendered by the Yangs
2
作者 WANG Zai-jun ZHANG Jun-feng ZHANG Shun-sheng 《Journal of Literature and Art Studies》 2023年第11期825-830,共6页
Lu Xun’s short stories play a prominent role in the history of modern Chinese literature,and a number of Sinologists have studied them and published their English translations.This paper selects“YīJiàn Xiǎo S... Lu Xun’s short stories play a prominent role in the history of modern Chinese literature,and a number of Sinologists have studied them and published their English translations.This paper selects“YīJiàn Xiǎo Shì”in Lu Xun’s collection“Call to Arms”as the object of study,taking hypotaxis and parataxis as the starting point,and compares the translation of Yang Hsien-yi and Gladys Yang with the original version,studying the differences between the them in the process of C-E translation.It is hoped that some flexible conversion strategies in English-Chinese translation can be learned from the translation research. 展开更多
关键词 yīJiàn Xiǎo shì A Small Incident rendered by yang Hsien-yi&Gladys yang hypotaxis and parataxis comparative study
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红参水提物对Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用 被引量:13
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作者 王晶 余惠旻 +2 位作者 胡胜全 杨大坚 陈新滋 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期627-630,共4页
目的探讨红参水提物对Aβ25-35诱导人神经瘤母细胞SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法用Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞,模拟阿尔茨海默病患者脑内神经元的病理损伤模型,以不同浓度的红参水提物进行干预;用倒置显微镜观察其形态学的变化;MTT法... 目的探讨红参水提物对Aβ25-35诱导人神经瘤母细胞SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法用Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞,模拟阿尔茨海默病患者脑内神经元的病理损伤模型,以不同浓度的红参水提物进行干预;用倒置显微镜观察其形态学的变化;MTT法测定细胞的存活率;流式细胞技术检测细胞的凋亡率以及线粒体膜电位的变化。结果50μmol·L-1Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞72h后,细胞变圆、聚集,其存活率为39.26%±3.16%、凋亡率为37.30%±0.69%,线粒体红绿荧光强度比值为0.45±0.10;而Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞与不同浓度(1、5、10mg·ml-1)红参水提物同时孵育后,明显减少了细胞损伤,升高了细胞存活率、降低了凋亡率,并升高了线粒体红绿荧光强度比值。结论红参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有显著的保护作用。 展开更多
关键词 红参水提物 sh—Sy5y 细胞凋亡 AΒ25-35
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芡实提取物对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用及体外抗氧化活性研究 被引量:16
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作者 沈蓓 袁冬平 +3 位作者 伍城颖 贺潇潇 王新胜 吴启南 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期39-43,共5页
目的观察芡实80%乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物对过氧化氢(H2O2)诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用及其体外抗氧化活性。方法采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞H2O2损伤模型。用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒法检测以... 目的观察芡实80%乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物对过氧化氢(H2O2)诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用及其体外抗氧化活性。方法采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞H2O2损伤模型。用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒法检测以上不同浓度芡实提取物对H2O2诱导损伤的SH-SY5Y神经细胞活力的影响,计算抑制率。用体外抗氧化实验方法检测芡实3种提取物清除DPPH、ABTS自由基及还原铁的能力。结果芡实80%乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物在含生药量10~30mg/mL浓度范围内,均表现出明显的抑制H2O2对SH-SY5Y神经细胞氧化损伤的作用(P<0.05,P<0.01),且对DPPH、ABTS自由基及三价铁离子有很好的清除作用及还原能力,其中芡实正丁醇提取物的作用最强。结论芡实具有保护SH-SY5Y神经细胞免受H2O2氧化损伤的作用,有着很好的抗氧化活性,其中正丁醇提取物的抗氧化活性最强。 展开更多
关键词 芡实提取物 sh—Sy5y神经细胞 H2O2诱导损伤 体外抗氧化
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莫诺苷抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y神经细胞钙超载和细胞毒 被引量:13
5
作者 王文 孙芳玲 +4 位作者 安宜 黄文婷 艾厚喜 张丽 李林 《中国康复理论与实践》 CSCD 2009年第3期201-202,共2页
目的研究莫诺苷抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y神经细胞钙超载和细胞毒作用。方法体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞分别加入莫诺苷1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L预孵育24h,加入H2O2300~500μmol/L,作用18h,检测细胞内游离钙... 目的研究莫诺苷抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y神经细胞钙超载和细胞毒作用。方法体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞分别加入莫诺苷1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L预孵育24h,加入H2O2300~500μmol/L,作用18h,检测细胞内游离钙离子浓度、乳酸脱氢酶(LDH)释放率。结果与未加莫诺苷预孵育的细胞相比,莫诺苷10μmol/L、100μmol/L能抑制神经细胞内游离钙离子浓度增加,莫诺苷1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L能降低LDH的释放率。结论莫诺苷能够抑制H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞钙超载和细胞毒,有神经保护作用。 展开更多
关键词 莫诺苷 人神经母细胞瘤细胞 sh-Sy5y 氧化应激 钙超载 细胞毒
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肌肽对高糖诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用 被引量:5
6
作者 李宗泽 杨清俊 +3 位作者 朱艳凌 刘影 杨菁 李敏 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期795-800,共6页
目的探讨肌肽对高糖诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的保护作用及其机制。方法 SH-SY5Y细胞用含葡萄糖50mmol·L-1的高糖培养液和肌肽0.6,3和15mmol·L-1的培养液培养48h,相差显微镜下观察细胞形态的变化;MTT比色法测定... 目的探讨肌肽对高糖诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的保护作用及其机制。方法 SH-SY5Y细胞用含葡萄糖50mmol·L-1的高糖培养液和肌肽0.6,3和15mmol·L-1的培养液培养48h,相差显微镜下观察细胞形态的变化;MTT比色法测定细胞存活率;Hoechst33258染色观察细胞核形态的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;CDFH-DA探针法检测细胞中活性氧(ROS)的水平,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)的含量。结果与正常组(低糖培养基)相比,高糖组细胞存活率明显降低(P<0.01);Hoechst33258染色发现细胞核固缩裂解,呈凋亡特征性改变;细胞凋亡率、细胞中ROS的水平、上清液中8-OHdG的分泌量明显升高(P<0.01)。与高糖组相比,肌肽0.6,3和15mmol·L-1组细胞存活率明显升高(P<0.01);Hoechst33258染色发现细胞核核固缩裂解减少,形态明显改善;细胞凋亡率分别降低至(20.65±1.13)%,(14.95±0.64)%和(9.95±0.61)%(P<0.01);细胞中ROS的水平分别降低至(182±16)%,(168±15)%和(140±10)%(P<0.05);上清液中8-OHdG的分泌量均明显降低,分别为2.780±0.154,2.136±0.100和(1.864±0.151)μg·L-1(P<0.01)。单纯肌肽组的细胞存活率、细胞核形态以及细胞凋亡率与正常组相比无显著差异,细胞中ROS水平和上清液中8-OHdG的分泌量均有所降低,分别为(88±9)%和(0.380±0.023)μg·L-1(P<0.05)。甘露醇组的各项指标与正常组相比无显著差异。结论肌肽对高糖诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与肌肽的抗氧化作用有关。 展开更多
关键词 高糖 sh—Sy5y细胞 细胞凋亡 肌肽 活性氧 8-羟基脱氧鸟苷酸
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过氧化氢对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响 被引量:6
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作者 陈红艳 耿淼 胡亚卓 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第15期1665-1667,共3页
目的观察过氧化氢(H2O2)诱导SH-SY5Y细胞损伤后对线粒体膜电位的影响。方法向培养的SH-SY5Y细胞加入H2O2100、200、500μmol/L作用24 h诱导产生氧化损伤,应用MTT比色法检测细胞存活率,测定培养液中一氧化氮(NO)含量;并采用流式细胞仪检... 目的观察过氧化氢(H2O2)诱导SH-SY5Y细胞损伤后对线粒体膜电位的影响。方法向培养的SH-SY5Y细胞加入H2O2100、200、500μmol/L作用24 h诱导产生氧化损伤,应用MTT比色法检测细胞存活率,测定培养液中一氧化氮(NO)含量;并采用流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位。结果与空白对照组比较,其他实验组随H2O2浓度的加大,细胞存活率、线粒体膜电位逐渐下降,而NO的释放量及细胞凋亡数显著性增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 H2O2可引发细胞内NO的产生,使线粒体膜电位下降,导致神经细胞凋亡,从而造成脑细胞损伤,其损伤程度与H2O2浓度呈正相关。 展开更多
关键词 过氧化氢 细胞凋亡 线粒体 膜电位 sh Sy5y细胞
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α-synuclein-pEGFP真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的表达 被引量:4
8
作者 张宇新 赵焕英 +4 位作者 苏月 苏玉金 赵春礼 徐群渊 杨慧 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期124-128,共5页
为了构建 α-synuclein-p EGFP真核表达载体 ,检测其在 SH-SY5 Y细胞内的表达 ,本研究应用下述方法 :PCR扩增 α-synuclein基因并消除终止密码子 ;PCR产物连入 p GEM T-easy载体 ,经测序确认无误后 ,亚克隆入 p EGFP-N1,构建α-synucle-... 为了构建 α-synuclein-p EGFP真核表达载体 ,检测其在 SH-SY5 Y细胞内的表达 ,本研究应用下述方法 :PCR扩增 α-synuclein基因并消除终止密码子 ;PCR产物连入 p GEM T-easy载体 ,经测序确认无误后 ,亚克隆入 p EGFP-N1,构建α-synucle-in-p EGF P真核表达载体 ;Lipofect AMINE法转染 SH-SY5 Y细胞 ;荧光显微镜检测报告基因表达产物 EGFP,原位杂交和免疫荧光细胞化学法检测α-synuclein m RNA及其蛋白表达。结果显示 ,该载体转染 SH-SY5 Y细胞后 ,可在细胞内观察到报告基因和目的基因的表达产物。结论 :α-synuclein-p EGFP真核表达载体构建成功 ,并可在细胞内表达。本工作为今后动态观察研究α-synu-clein致 展开更多
关键词 Α-SyNUCLEIN PEGFP 原位杂交 真核表达载体 绿色荧光蛋白 荧光免疫细胞化学 sh—Sy5y细胞
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脂质体转染TRPM7 siRNA对Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞分泌炎症因子的影响 被引量:1
9
作者 林珍 周德喜 +5 位作者 解丹 孔令娜 房城伯 詹磊 黄成 李俊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期796-801,共6页
目的利用小干扰RNA(siRNA)抑制TRPM7基因的表达,研究TRPM7对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞分泌炎症因子的影响。方法通过Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞构建阿尔采末病体外模型,MTT法测定Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞最佳作用浓度与时间点,将人工合成抑... 目的利用小干扰RNA(siRNA)抑制TRPM7基因的表达,研究TRPM7对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞分泌炎症因子的影响。方法通过Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞构建阿尔采末病体外模型,MTT法测定Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞最佳作用浓度与时间点,将人工合成抑制TRPM7基因的siR-NA片段,通过脂质体LipofectamineTM2000转染到SH-SY5Y细胞内;RT-PCR检测TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒的测定细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)的含量;ELISA测定细胞上清中TNF-α、IL-6的含量。结果转染siRNA后SH-SY5Y细胞的TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达较模型组明显下降,细胞上清中TNF-α、IL-6、LDH的含量表达较模型组明显下降。结论应用siR-NA干扰靶向抑制TRPM7基因,可以下调TNF-α、IL-6等炎症因子的释放,这一过程可能是通过抑制NF-κB信号转导通路的激活,从而减少炎症因子的释放,进而减轻Aβ对SH-SY5Y细胞的毒性作用。 展开更多
关键词 瞬时受体电位通道7 SIRNA 阿尔采末病 炎症因 AΒ25-35 sh—Sy5y NF-κB
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利用基因芯片筛选藜芦定碱对SH-SY5Y细胞神经毒性相关基因 被引量:4
10
作者 王艳丽 王宇光 +6 位作者 梁乾德 马增春 肖成荣 谭洪玲 汤响林 张伯礼 高月 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期643-647,共5页
目的利用基因芯片技术研究藜芦定碱对SH-SY5Y细胞相关基因表达的影响。方法体外培养神经细胞SH-SY5Y,不同浓度的藜芦定碱作用8 h后,提取细胞总RNA,纯化mRNA后逆转录制备目标序列,与含有29000种人cD-NA的表达谱芯片HOA 5.1杂交,以AXON40... 目的利用基因芯片技术研究藜芦定碱对SH-SY5Y细胞相关基因表达的影响。方法体外培养神经细胞SH-SY5Y,不同浓度的藜芦定碱作用8 h后,提取细胞总RNA,纯化mRNA后逆转录制备目标序列,与含有29000种人cD-NA的表达谱芯片HOA 5.1杂交,以AXON4000B荧光扫描仪扫描芯片上的荧光信号,获得的荧光信号的强度应用Rosetta ResolverSystem软件进行差异表达谱分析。结果与正常对照组相比,SH-SY5Y细胞受藜芦定碱50,200,800μmol.L-1作用后,显著差异表达基因分别有71,182,77条,其中上调基因分别有45,81,45条,下调基因分别为26,101,32条。差异表达基因涉及细胞物质与能量代谢、线粒体功能相关基因,细胞周期、细胞分化、细胞凋亡及细胞信号传导相关基因。结论采用基因芯片技术筛选藜芦定碱对SH-SY5Y细胞毒性相关基因,寻找藜芦定碱毒性作用的靶基因,可能为藜芦定碱对神经毒性机制研究提供新思路。 展开更多
关键词 基因芯片 基因表达 藜芦定碱 神经毒性 毒性机制 sh-Sy5y
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胡椒碱及其衍生物对SH-SY5Y细胞的保护作用研究 被引量:4
11
作者 穆丽华 刘屏 +2 位作者 胡园 廖红波 李佳佳 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2010年第3期408-410,共3页
对胡椒碱进行结构改造,合成了4个胡椒碱衍生物。以高浓度皮质酮(corticosterone)模拟抑郁及焦虑症神经细胞损伤状态。对包括胡椒碱在内的5个化合物进行了SH-SY5Y细胞保护作用的研究。结果表明:胡椒碱、5-(3,4-methylenedioxy phenyl)-2E... 对胡椒碱进行结构改造,合成了4个胡椒碱衍生物。以高浓度皮质酮(corticosterone)模拟抑郁及焦虑症神经细胞损伤状态。对包括胡椒碱在内的5个化合物进行了SH-SY5Y细胞保护作用的研究。结果表明:胡椒碱、5-(3,4-methylenedioxy phenyl)-2E,4E-pentadienoic acid n-propylamine amide(2)以及5-(3,4-methylenedioxyphenyl)-2E,4E-pentadienoic acid N-methyl piperazine amide(4)对SH-SY5Y细胞有较好的保护作用。其中化合物2对SH-SY5Y细胞具有明显和持久的保护作用。 展开更多
关键词 胡椒碱 胡椒碱衍生物 结构修饰 sh-Sy5y
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类叶升麻苷抗鱼藤酮致SH-SY5Y细胞损伤机制的研究 被引量:20
12
作者 高燕 蒲小平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期161-165,共5页
目的研究类叶升麻苷抗鱼藤酮致多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞损伤,对帕金森病相关蛋白Parkin、α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)表达的影响,探讨类叶升麻苷抗细胞损伤的分子机制。方法化学比色法测定细胞培养液乳酸脱氢酶(lactate dehyd... 目的研究类叶升麻苷抗鱼藤酮致多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞损伤,对帕金森病相关蛋白Parkin、α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)表达的影响,探讨类叶升麻苷抗细胞损伤的分子机制。方法化学比色法测定细胞培养液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,蛋白质印迹法(Western blot)检测Parkin、α-Syn的表达,免疫荧光法检测SH-SY5Y细胞α-Syn分布。结果①类叶升麻苷(10,20或40mg.L-1)可明显降低鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞乳酸脱氢酶(LDH)的释放;②0.5μmol.L-1的鱼藤酮处理SH-SY5Y细胞48h能引起Parkin蛋白的明显降解及α-Syn蛋白二聚体增加;③预先用类叶升麻苷(10,20或40mg.L-1)处理细胞,能够有效减少鱼藤酮诱导的Parkin蛋白的降解,呈浓度依赖性;并能够抑制鱼藤酮诱导的α-Syn蛋白二聚体增加及α-Syn阳性细胞数增加。结论类叶升麻苷对鱼藤酮致SH-SY5Y细胞损伤具有神经保护作用,其作用机制可能与减少Parkin蛋白的降解和抑制α-Syn蛋白的二聚体形成有关。 展开更多
关键词 类叶升麻苷 鱼藤酮 sh.Sy5y细胞 乳酸脱氢酶 PARKIN Α-突触核蛋白
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天麻提取物对H_2O_2所诱导SH-SY5Y细胞的神经保护作用 被引量:5
13
作者 张金峰 宋贺 +5 位作者 王东 屈浙 檀浩鹏 李建华 胡昱红 鲍莎莎 《河北医药》 CAS 2018年第10期1479-1482,1487,共5页
目的检测天麻提取物对H_2O_2损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用,并探索其分子生物学机制。方法用H_2O_2处理SH-SY5Y细胞造成损伤模型,然后在培养基中分别加入0、0.1、1、10、100μg/ml的天麻提取物。用显微镜观察、记录不同处理细胞形态的差... 目的检测天麻提取物对H_2O_2损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用,并探索其分子生物学机制。方法用H_2O_2处理SH-SY5Y细胞造成损伤模型,然后在培养基中分别加入0、0.1、1、10、100μg/ml的天麻提取物。用显微镜观察、记录不同处理细胞形态的差异,用MTT法检测细胞增殖,用实时荧光定量PCR的方法检测神经细胞生长相关基因[神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)]的表达。结果 H_2O_2诱导24 h后,SH-SY5Y细胞与对照组相比形态发生显著变化,突触长度显著变小(P<0.05),细胞增殖显著下降(P<0.05),而天麻提取物处理H_2O_2诱导损伤的SH-SY5Y细胞后,可以显著的抑制H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞毒性,随着天麻提取物浓度增加,细胞突触长度、细胞增殖逐渐恢复,不同天麻提取物浓度间比较差异有统计学意义(P<0.05),进而发现H_2O_2诱导损伤的SHSY5Y细胞中NGF和BDNF等神经营养因子表达量显著降低(P<0.05),而天麻提取物处理后可以显著的上调NGF和BDNF的表达(P<0.05)。结论天麻提取物对H_2O_2诱导损伤的SH-SY5Y细胞具有保护作用,其机制可能与调控NGF和BDNF等神经营养因子的表达有关。 展开更多
关键词 天麻提取物 神经保护 sh-Sy5y
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纳米SiO_2对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的凋亡诱导作用及其机制 被引量:3
14
作者 杨艳艳 金明华 +7 位作者 李艳博 李阳 王佳慧 郑彤 王思惠 迟翔宇 张宇佳 孙志伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期249-254,I0002,共7页
目的:探讨纳米二氧化硅(SiO2)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡和周期的影响,阐明其作用机制。方法:选取不同浓度粒径为90nm的SiO2颗粒作用于SH-SY5Y细胞,分别为0、3.125、6.250、12.500、25.000、50.000mg·L-1 SiO2组,其中0mg... 目的:探讨纳米二氧化硅(SiO2)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡和周期的影响,阐明其作用机制。方法:选取不同浓度粒径为90nm的SiO2颗粒作用于SH-SY5Y细胞,分别为0、3.125、6.250、12.500、25.000、50.000mg·L-1 SiO2组,其中0mg·L-1组为对照组。MTT法检测各组SH-SY5Y细胞存活率;采用AO/EB染色和AnnexinⅤ-FITC/PI法检测各组细胞凋亡率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期百分比和细胞中活性氧(ROS)水平。结果:MTT检测,6.250、12.500、25.000和50.000mg·L-1 SiO2组细胞存活率低于对照组(P<0.05),12.500、25.000和50.000mg·L-1 SiO2组细胞存活率低于3.125mg·L-1 SiO2组(P<0.05)。AO/EB染色和Annexin V-FITC/PI法检测,6.250、12.500、25.000和50.000 mg·L-1 SiO2组细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),12.500、25.000和50.000 mg·L-1 SiO2组细胞凋亡率高于3.125mg·L-1 SiO2组(P<0.05)。FCM检测,3.125、6.250、12.500、25.000和50.000mg·L-1 SiO2组细胞中ROS水平高于对照组(P<0.05)。25.000和50.000 mg·L-1 SiO2组G0/G1期细胞百分比低于3.125mg·L-1SiO2组和对照组(P<0.05),50.000 mg·L-1 SiO2组G2/M期细胞百分比高于对照组(P<0.05)。结论:纳米SiO2可降低SH-SY5Y细胞的活力,诱导细胞凋亡,增加细胞中ROS水平,可干扰细胞周期进程,对SH-SY5Y细胞的增殖具有抑制作用。 展开更多
关键词 纳米二氧化硅 sh—Sy5y细胞 细胞周期 细胞凋亡
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RUNX3小干扰RNA对SH-SY5Y细胞生长和药物敏感性的作用 被引量:2
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作者 张宏卫 刘丽华 王承忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期504-508,共5页
目的:探讨RUNX3基因对人神经母细胞瘤细胞生长和药物敏感性的调节作用。方法:构建RUNX3基因的小干扰RNA载体并将其转导入SH-SY5Y细胞,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotitng进行鉴定;MTT法和流式细胞仪检测... 目的:探讨RUNX3基因对人神经母细胞瘤细胞生长和药物敏感性的调节作用。方法:构建RUNX3基因的小干扰RNA载体并将其转导入SH-SY5Y细胞,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotitng进行鉴定;MTT法和流式细胞仪检测细胞转染前后生长速度和细胞周期的变化;MTT法和流式细胞仪检测细胞转染前后对阿霉素敏感性的变化;Western blotting检测细胞转染前后细胞周期相关蛋白cy-clin D1、CDK4、CDK6、p21、p27和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax以及耐药相关蛋白P-gp、MRP的表达变化。结果:成功构建了RUNX3的小干扰RNA载体并将其转染SH-SY5Y细胞;筛选到稳定的RUNX3低表达的神经母细胞瘤细胞模型;MTT和流式细胞仪检测结果显示,转染RUNX3小干扰RNA后的细胞的生长速度显著快于对照组(P<0.05),且G1期的细胞比率显著低于对照组(P<0.05);MTT法和流式细胞仪结果显示,转染RUNX3小干扰RNA后的细胞对化疗药物的敏感性降低,细胞内的阿霉素蓄积量显著减少(P<0.05);Western blotting显示,转染RUNX3小干扰RNA后的细胞中Bcl-2、P-gp和cyclin D1的表达明显增高,p21的表达明显降低。结论:下调RUNX3基因能促进神经母细胞瘤细胞生长,降低细胞对化疗药物的敏感性,提示RUNX3在神经母细胞瘤的发生和发展中可能扮演重要角色。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 RUNX3 RNA干扰 sh—Sy5y细胞
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柴胡皂苷d对SH-SY5Y细胞ERK蛋白表达及凋亡的影响 被引量:1
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作者 李妍 纪朋艳 +2 位作者 张巍 彭顺利 吕士杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1091-1094,共4页
目的初步研究不同浓度的柴胡皂苷d(SSd)对SH—SY5Y细胞ERK蛋白磷酸化及细胞凋亡水平的影响。方法体外常规培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,将SSd溶解于含0.3%DMSO的DEAM高糖培养基q-,分别以0~10μmol/LSSd作用于SH—SY5Y细胞48h... 目的初步研究不同浓度的柴胡皂苷d(SSd)对SH—SY5Y细胞ERK蛋白磷酸化及细胞凋亡水平的影响。方法体外常规培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,将SSd溶解于含0.3%DMSO的DEAM高糖培养基q-,分别以0~10μmol/LSSd作用于SH—SY5Y细胞48h,之后用Westernblot法检测不同浓度的SSd对SH—SY5Y细胞t-ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达量的影响,并通过Hoechst33342染色及流式细胞仪检测细胞凋亡水平的变化。结果与对照组相比,8~10μmol/LSSd作用48h,SH—SY5Y细胞中ERKl/2蛋白磷酸化水平明显降低;而与对照组相比,8—10btmol/LSSd预处理的SH—SY5Y细胞凋亡细胞数明显增加,且随着SSd浓度的增加,凋亡细胞数也相应增多。结论一定浓度的SSd可引起SH—SY5Y细胞凋亡率的上升,其机制可能与抑制ERK蛋白磷酸化表达有关。 展开更多
关键词 ERK1 2 凋亡 柴胡皂苷D sh—Sy5y细胞
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小鼠下丘脑SH2B1,SOCS3,PTP1B及NPY表达的变化及其与肥胖的关系 被引量:2
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作者 苏涛 吴静 +4 位作者 刘玮芳 段朝军 张赛 汤参娥 罗凡砚 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期43-48,共6页
目的:研究肥胖小鼠及正常小鼠不同周龄下丘脑组织SH2B1(adapter protein with a Src-homology 2 domain),细胞因子信号转导抑制蛋白3(the suppressor of cytokine signaling-3,SOCS3),蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(proteintyrosine phosphatase... 目的:研究肥胖小鼠及正常小鼠不同周龄下丘脑组织SH2B1(adapter protein with a Src-homology 2 domain),细胞因子信号转导抑制蛋白3(the suppressor of cytokine signaling-3,SOCS3),蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(proteintyrosine phosphatase 1B,PTP1B)和神经肽Y(neturopetide Y,NPY)表达的变化规律及其与血清瘦素及胰岛素水平的关系。方法:选用健康C57BL/6乳鼠制作肥胖动物模型,计算Lee’s指数及稳态模型胰岛素抵抗指数。荧光定量RT-PCR法检测下丘脑SH2B1,SOCS3及PTP1B mRNA表达量,Western印迹检测下丘脑SH2B1和NPY蛋白表达量。结果:与同周龄对照组小鼠相比,肥胖组小鼠下丘脑组织SH2B1 mRNA表达减少,SOCS3及PTP1B mRNA表达增加;Western印迹结果显示:肥胖组小鼠SH2B1蛋白表达水平较对照组下降,NPY表达升高。直线相关分析显示:血清瘦素和血清空腹胰岛素水平与SH2B1 mRNA表达呈负相关,与SOCS3及PTP1B mRNA表达正相关。结论:SH2B1,SOCS3,PTP1B及NPY是肥胖发生、发展过程中的关键因子。 展开更多
关键词 肥胖 小鼠 sh2B1 细胞因子信号转导抑制蛋白3 蛋白质酪氨酸磷酸酶1B 神经肽y
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锂剂对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺模型的保护作用及其对AIF凋亡通路的影响 被引量:2
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作者 贾国强 巴晓红 潘凤英 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期228-232,共5页
目的研究不同浓度的锂剂对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺模型的保护效果,确定有效的浓度,并探讨其对AIF凋亡通路的作用,分析其神经保护作用的机制。方法以不同浓度的锂剂对制备氧糖剥夺模型的SH-SY5Y细胞进行预处理,观察其对细胞的保护作用。MTT... 目的研究不同浓度的锂剂对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺模型的保护效果,确定有效的浓度,并探讨其对AIF凋亡通路的作用,分析其神经保护作用的机制。方法以不同浓度的锂剂对制备氧糖剥夺模型的SH-SY5Y细胞进行预处理,观察其对细胞的保护作用。MTT法描绘细胞生长曲线。Annexin V和PI双染,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。免疫荧光检测凋亡诱导因子(AIF)蛋白的变化。结果 MTT显示不同浓度的锂剂对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺模型有较强的细胞保护作用,1mmol/L氯化锂为细胞保护的有效剂量。Annexin V和PI双染,流式细胞仪检测可见锂剂处理组凋亡细胞明显减少。免疫荧光染色可见锂剂处理组AIF蛋白发生核移位减少。结论锂剂对氧糖剥夺模型的SH-SY5Y细胞具有较强的保护作用,1mmol/L氯化锂为细胞保护的有效剂量,其作用机制之一可能是对AIF凋亡通路的抑制。 展开更多
关键词 sh—Sy5y细胞 AIF凋亡通路 锂剂 氧糖剥夺模型
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胰岛素增敏剂罗格列酮对链脲佐菌素损伤SH-SY5Y细胞的保护作用 被引量:1
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作者 张景燕 王蓉 +3 位作者 盛树力 姬志娟 孟祥宏 赵志炜 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第1期69-71,共3页
目的观察胰岛素增敏剂罗格列酮对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)所致胰岛素信号转导通路损伤的SH-SY5Y细胞的影响。方法将人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞分为对照组、STZ制备神经元损伤模型组(STZ 0.8 mmol/L)、罗格列酮干预组(STZ 0.8 m... 目的观察胰岛素增敏剂罗格列酮对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)所致胰岛素信号转导通路损伤的SH-SY5Y细胞的影响。方法将人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞分为对照组、STZ制备神经元损伤模型组(STZ 0.8 mmol/L)、罗格列酮干预组(STZ 0.8 mmol/L+罗格列酮20μmol/L),测定每组的细胞计数、噻唑蓝(MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,观察罗格列酮对SH-SY5Y细胞的作用。结果与对照组相比,STZ模型组的细胞计数和MTT代谢率降低(P<0.01),LDH漏出率升高(P<0.01);经罗格列酮保护后,上述细胞生存指标明显改善,细胞计数和MTT代谢率均高于STZ损伤组(P<0.01),LDH漏出率降低(P<0.01)。结论罗格列酮可以减轻STZ引起的神经细胞毒性,提高细胞生存率,其作用机制尚需进一步探讨。 展开更多
关键词 人神经母细胞瘤株sh—Sy5y 链脲佐菌素 罗格列酮
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绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯对酒精诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用研究 被引量:3
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作者 杨海玉 刘勇 +3 位作者 胡建新 文丽丹 巢海潮 曾红 《临床与病理杂志》 2016年第12期1900-1904,共5页
目的:体外观察绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对酒精诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用,初步探讨EGCG治疗酒精性痴呆(alcohol-associated dementia,AAD)的可行性。方法:以SH-SY5Y神经元细胞为... 目的:体外观察绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对酒精诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用,初步探讨EGCG治疗酒精性痴呆(alcohol-associated dementia,AAD)的可行性。方法:以SH-SY5Y神经元细胞为实验对象,酒精组给予100 mol/L酒精37℃培养24 h, EGCG+酒精组在其培养液中同时加入不同浓度的EGCG(1~100μmol/L)及100 mol/L酒精,37℃培养24 h;另设相同浓度的EGCG对照组(EGCG组)及空白对照组(对照组)。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,以Annexin-V APC/7-AAD双染法检测细胞凋亡及光镜下观察细胞形态。结果:MTT结果证实EGCG(25~100μmol/L)作用24 h后可明显促进SH-SY5Y细胞存活,并呈浓度依赖关系(P〈0.001)。流式检测及细胞形态观察结果证实酒精组细胞凋亡率(21.82%±1.27%),明显高于对照组(4.90%±0.80%)(P〈0.001)及EGCG组(7.82%±0.68%)(P〈0.001);EGCG(100μmol/L)+酒精组细胞凋亡率(10.81%±0.31%),明显低于酒精组(P〈0.001)。结论:EGCG可抑制酒精诱导SH-SY5Y细胞凋亡发生并促进细胞存活,提示EGCG对于AAD治疗具有潜在价值。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 sh—Sy5y细胞 凋亡 酒精性痴呆
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