SH2B3基因在髓系肿瘤中的突变位点及频率分析

目的:分析SH2B接头蛋白3(SH2B3)基因在髓系肿瘤中的突变位点及频率。方法:回顾性分析2017年11月至2022年11月首都医科大学宣武医院血液内科髓系肿瘤相关基因靶向DNA测序结果,筛选出携带SH2B3基因突变的患者,收集患者人口学资料及临床资料,分析SH2B3基因突变类型、突变位点、发生频率、共突变基因以及与疾病间的关系。结果:测序结果来自1005例患者,有19例患者检测到SH2B3基因突变,其中错义突变18例(94.74%),无义突变1例(5.26%),10例患者同时伴发其他突变(52.63%),突变等位基因频率(VAF)分布于0.03-0.66;发生频率最高的突变为p.Ile568Thr(5/19,26.32%),平均VAF为0.49,涉及1例MDS/MPN-RS(伴SF3B1突变)、1例MDS-U(伴SF3B1突变)、1例再生障碍性贫血伴PNH克隆(伴PIGA和KMT2A突变)、2例MDS-MLD(其中1例伴SETBP1突变);其余突变包括2例p.Ala567Thr(10.53%),p.Arg566Trp、p.Glu533Lys、p.Met437Arg、p.Arg425Cys、p.Glu314Lys、p.Arg308*、p.Gln294Glu、p.Arg282Gln、p.Arg175Gln、p.Gly86Cys、p.His55Asn和p.Gln54Pro各1例。结论:SH2B3基因在髓系肿瘤中突变位点分布较广,重现性低,其中p.Ile568Thr突变发生率较高,常与其他疾病特征性突变共存。

SH2D5介导DNA甲基化改善LPS诱导C6细胞的凋亡机制研究

据报道,DNA甲基化参与抑郁症的发生发展。课题组发现抑郁症大鼠海马中SH2D5含量减少,DNA甲基化是否调控SH2D5以及SH2D5具体作用机制。方法 采用LPS刺激C6细胞,建立抑郁症体外模型。使用MTT评估C6细胞的活力。通过qRT-PCR和Western印迹分析检测SH2D5、Bax、Bcl-2、Bad和Daxx的表达水平。使用亚硫酸氢盐测序/PCR评估SH2D5甲基化水平。结果 模型中SH2D5含量减少,而Bax、Bcl-2、Bad和Daxx的表达水平增加;过表达SH2D5后,上述凋亡指标显著改善。进一步发现,SH2D5的CpG位置高甲基化。结论 过表达SH2D5改善LPS诱导C6细胞凋亡指标,同时SH2D5的变化受DNA甲基化的调控。

SH2B1与EMT相关蛋白在NSCLC中的表达及相关性分析

研究接头蛋白SH2B1在非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中的表达及其与上皮细胞间充质转化(EMT)之间的关系,探讨SH2B1是否参与了NSCLC的EMT过程及可能的作用机制,以期为NSCLC的诊疗提供新的分子生物靶点。方法 分别采用免疫组化法(ABC三步法)检测63例NSCLC癌组织和相应的正常肺组织中SH2B1及EMT相关蛋白β-catenin、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin的表达情况,分析SH2B1、β-catenin、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin与NSCLC临床病理特征之间,以及SH2B1与EMT相关蛋白之间的关系。结果 免疫组织化学检测结果显示: SH2B1,N-cadherin,Vimentin在NSCLC癌组织中表达高于正常组织(P<0.05)。β-catenin在癌组织中主要表达于胞核,在正常组织中表达于包膜及胞浆。E-cadherin主要表达于包膜,在正常组织中高于癌组织(P<0.05)。SH2B1、β-catenin、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin的表达与淋巴结转移,TNM分期有关,与年龄、性别、分化类型均无关。SH2B1与EMT相关蛋白的表达在NSCLC中成正相关。结论 SH2B1的表达与NSCLC的EMT相关蛋白的表达具有相关性,提示SH2B1的表达可能参与了NSCLC的EMT过程。 。

阿司匹林通过抑制SH2B1/β-catenin增强顺铂对食管鳞癌细胞的化疗敏感性

目的探讨阿司匹林(ASA)是否增强顺铂(DDP)对食管鳞癌(ESCC)的治疗作用及其相关机制。方法培养ESCC细胞,实验分为空白组(DMSO组)、实验组(ASA组,DDP组,ASA+DDP组)。CCK8检测ASA和DDP单用或联用对ESCC细胞(Eca-109、Kyse30、TE-10)活性的影响,Annexin-V-FITC/PI检测ASA和DDP单用或联用对ESCC细胞凋亡的影响;转染PHY-LVOE1.6-SH2B1上调Eca-109细胞SH2B1的表达水平,CCK8及细胞划痕实验检测过表达SH2B1对Eca-109细胞活性及迁移的影响,免疫荧光及Western blot检测Eca-109细胞内SH2B1、β-catenin及其相关通路关键分子(GSK-3β、CyclinD1、TCF-4)蛋白变化。结果给予5mmol/L ASA处理后,与空白组相比Eca-109、Kyse30、TE-10细胞活性及凋亡率均无明显差异(Ps>0.05);与DDP5组相比,ASA5+DDP5组3株细胞活性最低(t=3.49,P<0.05;t=2.80,P<0.05;t=3.10,P<0.05)、凋亡率最高(t=11.44,P<0.05;t=11.68,P<0.05;t=12.24,P<0.05),差异具有统计学差异。DDP(5μmol/L)联合梯度ASA(0、5、10mmol/L)处理Eca-109细胞,SH2B1的表达量随ASA浓度上升而下降(F=54.0,P<0.05)。与SH2B1组相比,ASA(10mmol/L)和DDP(5μmol/L)联合处理后,Eca-109细胞SH2B1(t=2.62,P<0.05)、GSK-3β(t=0.96,P<0.05)、CyclinD1(t=1.25,P<0.05)、TCF-4(t=1.98,P<0.05)蛋白表达下降;与Vector组相比,过表达SH2B1,Eca-109细胞活性及迁移能力增强(Ps<0.05),β-catenin表达量及入核增加(t=2.52,P<0.05),GSK-3β(t=2.50,P<0.05)、CyclinD1(t=1.49,P<0.05)、TCF-4(t=2.62,P<0.05)表达增加;可部分逆转ASA和DDP联用处理所带来的上述蛋白抑制作用。结论ASA通过抑制SH2B1/β-catenin信号通路在一定程度上增强ESCC细胞对DDP的化疗敏感性,协同DDP可以抑制细胞活性及促进细胞凋亡。

含SH2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2表达变化对肝纤维化大鼠肝组织中细胞外信号调节激酶1/2活性的影响

目的:探讨含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)表达变化对肝纤维化大鼠肝组织中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)活性的影响。方法:健康雄性SD大鼠160只被随机分为五组(对照组、模型组、Ad-GFP组、Ad-SHP2组及Ad-shRNA/SHP组),每组32只。除对照组(腹腔注射0.9%氯化钠溶液)外,其余四组构建四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化模型,并将表达绿色荧光蛋白(GFP)的空病毒Ad-GFP、表达野生型SHP2及GFP的腺病毒Ad-SHP2、表达GFP及靶向SHP2的短发夹RNA(shRNA)的腺病毒Ad-shRNA/SHP自大鼠尾静脉分别注射入Ad-GFP组、Ad-SHP2组及Ad-shRNA/SHP2组大鼠,各组分别于造模第2、4、6、8周选取8只大鼠留取肝组织标本。采用HE染色观察大鼠肝组织病理学变化;采用Masson三色染色检测大鼠肝组织胶原沉积;采用实时荧光定量PCR检测大鼠肝组织SHP2、ERK1 mRNA表达;采用免疫组织化学染色检测SHP2蛋白表达;采用Western blot检测ERK1和p-ERK1蛋白表达。结果:大鼠肝纤维化模型成功构建,在各造模时间点,与模型组及Ad-GFP组大鼠肝组织胶原沉积比较,Ad-SHP2组均加重,而Ad-shRNA/SHP2组均减轻。导入野生型SHP2基因后大鼠肝组织的SHP2 mRNA及蛋白表达明显升高(均P<0.05),而导入靶向SHP2的shRNA后大鼠肝组织的SHP2 mRNA及蛋白表达明显降低(均P<0.05)。在各造模时间点(第2、4、6、8周),模型组、Ad-GFP组、Ad-SHP2组及Ad-shRNA/SHP2组大鼠肝组织ERK1 mRNA及蛋白表达以及p-ERK1蛋白表达高于对照组(均P<0.05),但上述四组大鼠肝组织的ERK1 mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(均P>0.05);而在各时间点与模型组及Ad-GFP组大鼠肝组织p-ERK1蛋白表达比较,Ad-SHP2组升高(均P<0.05),Ad-shRNA/SHP2组降低(均P<0.05),模型组与Ad-GFP组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:大鼠纤维化肝组织中SHP2过表达可通过促进ERK1/2磷酸化增强ERK1/2活性,而SHP2低表达则可通过抑制ERK1/2磷酸化降低ERK1/2活性。

SH2D4A互作蛋白的筛选及初步鉴定

SH2D4A是SH2蛋白家族成员之一,可能参与酪氨酸蛋白激酶相关受体介导的信号转导,调节细胞的生长、增殖和分化,进而影响人类疾病的发生。文章运用酵母双杂交技术筛选SH2D4A相互作用蛋白,并利用酵母交配(mating)实验和GST pull-down实验进行了初步鉴定。首先成功构建了酵母诱饵蛋白重组表达载体pGBKT7-SH2D4A;利用该重组体对人肾脏cDNA文库进行逐级筛选,共得到46个阳性克隆;经目的基因的分离、DNA测序及BLAST软件对序列进行比对分析,发现5种可能的SH2D4A互作蛋白(AZGP1、DAD1、HSD17B10、KAT5和PKM2);NetPhos 2.0 Server软件预测结果显示除HSD17B10外其他4种蛋白均含有磷酸化酪氨酸;进一步以KAT5和HSD17B10作为代表进行了酵母交配和GST pull-down,证实两者均可直接结合SH2D4A。

哮喘小鼠肺内及内脏感觉传入系统SH2-Bβ的表达

目的研究SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统（C7～T5脊神经节及对应的脊髓后角）的表达,探讨SH2-Bβ在哮喘发病中的作用.方法 BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组,每组15只.利用免疫组织化学方法测定两组小鼠肺、C7～T5脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ的免疫反应变化;用免疫印迹法（Western blotting）检测肺及C7～T5节段脊髓SH2-Bβ及神经生长因子（NGF）的免疫反应变化;Metamoph图像分析系统对结果进行分析.结果免疫组织化学结果显示哮喘小鼠肺、C7～T5节段脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ免疫阳性产物平均光密度值分别为0.806±0.023、0.766±0.018、0.547±0.014,明显高于对照组（0.243±0.018、0.131±0.011、0.215±0.029）（P＜0.01）.Western blotting显示SH2-Bβ及NGF在哮喘小鼠的C7～T5节段脊髓及肺内表达明显强于对照组;正常对照组脊髓及肺内的平均相对光密度值分别为0.346±0.017和0.512±0.018,哮喘组为0.738±0.021和1.526±0.022.NGF在正常对照组脊髓及肺内的平均相对光密度值分别为0.357±0.021和0.734±0.013,哮喘组为1.445±0.015和1.265±0.018;且SH2-Bβ与NGF光密度值呈正相关（r=0.651,P＜0.01）.结论结果提示,SH2-Bβ在哮喘小鼠肺、C7～T5节段脊神经节及对应的脊髓后角过表达,可能是NGF参与哮喘发病的重要信号分子.

SH2-B在结肠癌组织中表达及临床意义

目的探讨SH2-B在结肠癌癌变过程中的演变规律,分析SH2-B表达与结肠癌临床分期的关系,分析SH2-B表达与结肠癌转移的关系。方法免疫组织化学方法检测69例结肠癌组织、27例结肠腺瘤组织、29例结肠息肉组织中SH2-B蛋白的表达。69例结肠癌患者Ⅰ期11例、Ⅱ期22例、Ⅲ期19例、Ⅳ期17例,其中无转移34例,淋巴节转移35例。结果免疫组织化学检测结果显示,SH2-B蛋白在结肠息肉组织、结肠腺瘤组织、结肠癌组织中的表达呈浆-核型,以胞浆为主。结肠息肉患者SH2-B阳性率为31%(9/29),结肠腺瘤患者SH2-B阳性率为52%(14/27),结肠癌患者SH2-B阳性率为93%(27/29)。结肠癌组织中SH2-B的阳性细胞率(0.64±0.26)明显高于结肠腺瘤组织(0.26±0.27)和结肠息肉组织(0.12±0.21)(P<0.001),结肠腺瘤组织中阳性细胞表达率明显高于结肠息肉组织(P<0.05)。结肠癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期强阳性率分别为18.2%(2/11)、45.4%(10/22)、57.9%(11/19)和82.3%(14/17)。转移组和非转移组强阳性率为45.7%(16/35)和23.5%(8/34),转移组SH2-B强阳性率显著高于无转移组(P<0.05)。结论 SH2-B过表达可能参与了结肠癌癌变过程,可能是结肠癌变的早期事件。SH2-B表达与结肠临床分期有关。SH2-B可能参与了结肠癌转移,SH2-B高表达与结肠癌转移呈正相关。

电针对中枢Stat5敲除所致肥胖小鼠瘦素水平和下丘脑Kctd15、Sh2b1 mRNA的影响

目的观察电针对中枢Stat5条件性敲除Stat5Nestin-Cre（Stat5NKO）肥胖小鼠下丘脑Kctd15、Sh2b1基因表达的影响。方法 20只肥胖的Stat5NKO小鼠随机分为肥胖组和电针组,每组10只;10只Stat5fl/fl小鼠作为正常组。其中电针组选取单侧后三里、内庭穴进行针刺治疗,每日1次,双侧交替进行,每次30min,韩氏电针仪频率2/15Hz,疏密波,6d为1个疗程,共治疗4个疗程。运用ELISA法检测血清中瘦素（Leptin）含量,qPCR技术检测下丘脑中肥胖相关基因Kctd15、Sh2b1mRNA的表达。结果与正常组小鼠比较,肥胖组小鼠体质量明显增加（P〈0.01）伴随血清Leptin含量升高（P〈0.05）,下丘脑Leptin水平下降（P〈0.05）,同时下丘脑Kctd15、Sh2b1mRNA表达下调（P〈0.05～0.01）;与肥胖组小鼠比较,电针组小鼠的体质量明显下降（P〈0.01）,血清Leptin含量降低（P〈0.01）,且下丘脑Leptin水平回升（P〈0.01）,Kctd15、Sh2b1mRNA表达水平上调（P〈0.01）。结论电针可能通过调节Leptin水平并促进Kctd15、Sh2b1表达,实现对Stat5NKO小鼠的减肥效应。

地塞米松抑制哮喘小鼠SH2-Bβ蛋白表达

目的探讨地塞米松对哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统(C7-T5脊神经节及对应的脊髓后角)SH2-Bβ表达的抑制作用。方法用卵蛋白法制备BABL/c小鼠哮喘模型,应用免疫组织化学和免疫印迹法,观察SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入部位的表达及地塞米松对其表达的影响。应用小鼠肺功能仪检测气道阻力的变化。结果在肺组织、C7-T5段脊神经节及相应节段的脊髓后角内,哮喘组SH2-Bβ表达明显高于对照组和地塞米松组(P<0.01)。哮喘组气道阻力明显高于正常组及地塞米松组(P<0.01)。结论地塞米松抑制哮喘小鼠SH2-Bβ的表达可能是激素治疗哮喘的机制之一。

NGF对哮喘小鼠肺及初级传入神经元SH2-Bβ表达的调节作用

目的探讨NGF对哮喘小鼠肺及初级传入神经元(C7-T5脊神经节及相应脊髓后角)SH2-Bβ表达的调节作用。方法BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组、anti-NGF组,每组10只。利用免疫组织化学方法,免疫印迹法(W estern B lot)测定各组SH2-Bβ的免疫反应变化;M etamoph图象分析系统对结果进行分析。结果免疫组织化学结果显示哮喘小鼠肺、C7-T5节段脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ免疫阳性产物平均光密度值(MOD)分别为0.806±0.023、0.766±0.018、0.547±0.014,明显高于对照组(0.243±0.018、0.131±0.011、0.215±0.029)(P<0.01)。而Anti-NGF组小鼠SH2-Bβ免疫阳性产物MOD分别为0.252±0.015、0.158±0.012、0.251±0.024,明显低于哮喘组(P<0.01)。W estern B lot显示哮喘小鼠的C7-T5节段脊髓及肺内SH2-BβMOD与-βactin MOD的比值(0.738±0.021和1.526±0.022)明显高于对照组(0.346±0.017和0.512±0.018,P<0.01);而Anti-NGF组小鼠在肺、C7-T5节段脊髓SH2-Bβ免疫阳性产物MOD与β-actioin MOD的比值(0.436±0.011和0.682±0.015)明显低于哮喘组(P<0.01)。结论肺内、C7-T5脊神经节及对应脊髓后角神经元的SH2-Bβ可能参与NGF介导的哮喘的发病过程。

SH2-Bβ抗体治疗肥胖哮喘模型小鼠肥胖和哮喘的机制研究

目的探讨SH2-Bβ抗体对肥胖哮喘模型小鼠的治疗作用。方法采用8周C57BL/6小鼠(36只),随机分为正常组(标准饲料喂养)、肥胖哮喘组(高脂饲料喂养)和SH2-Bβ抗体干预组。测量各组小鼠体质量;应用免疫组织化学方法检测SH2-Bβ在各组小鼠肺内及下丘脑的表达;应用小鼠肺功能仪检测各组小鼠气道阻力变化。结果肥胖哮喘组体质量明显高于正常组和SH2-Bβ抗体干预组(P<0.05);免疫组织化学染色显示,在下丘脑,SH2-Bβ在肥胖哮喘组小鼠表达降低,明显低于SH2-Bβ抗体干预组和正常组(P<0.05)。在肺内,SH2-Bβ在肥胖哮喘组小鼠表达增高,明显高于SH2-Bβ抗体干预组和正常组(P<0.05);肥胖哮喘组小鼠的气道阻力明显高于SH2-Bβ抗体干预组和正常组(P<0.05)。结论 SH2-Bβ抗体可使肥胖哮喘模型小鼠下丘脑内SH2-Bβ表达上调,同时使肺内SH2-Bβ表达下调,降低体质量,降低肺内活化炎性细胞数量,进而降低气道阻力,使肥胖哮喘得到缓解。

接头蛋白SH2B1在食管癌中的表达及意义

目的:研究接头蛋白SH2B1在食管癌组织中的表达水平及其临床病理意义。方法:选取120例食管癌患者手术切除的标本中的食管癌组织、癌旁组织及正常组织,分别采用免疫组织化学SABC法及Western印迹检测SH2B1的表达水平,同时分析SH2B1在食管癌组织中的表达水平与临床病理特征的关系。采用RT-PCR和Western印迹检测SH2B1在食管癌细胞株TE-1,Eca-109和正常人食管上皮细胞株HEEC中的表达水平。结果:SH2B1蛋白在食管正常组织、癌旁组织、癌组织中表达逐步增强(P<0.05),并且SH2B1蛋白在食管癌组织中的表达水平与食管癌患者的肿瘤浸润程度、TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与性别、年龄、饮酒与否、肿瘤类型、分化程度均无明显相关(P>0.05);SH2B1在食管癌细胞株TE-1,Eca-109和正常人食管上皮细胞株HEEC中均表达,但在食管癌细胞株TE-1,Eca-109中均较正常人食管上皮细胞株HEEC中表达明显增高(P<0.05)。结论:SH2B1在人类食管癌中过量表达,并可能与食管癌侵袭和转移密切相关。

南海北部神狐区域SH2站位甲烷水合物成藏动力学模拟研究

南海北部神狐区域海底的高丰度水合物储层与生物成因为主的甲烷气源表明该区域很可能是一种特殊的复合型海洋水合物系统,其成藏动力学机制有待进一步的研究和澄清。建立了一个耦合沉积层地质属性-流体流动过程-水合物反应动力学的传输-反应模型,区别了两种不同类型的水合物形成(分解)动力学过程:(1)在通常情况下溶解甲烷和游离气共同形成水合物,(2)特殊情况下游离气直接生成水合物,结果表明在神狐海域热力学环境下游离气形成水合物速度比溶解甲烷快约4倍,气体含量和动力学常数比值越大生成水合物越快,而对比水合物分布的模拟结果与实测数据表明该区域水合物储层聚集和产状很可能受到了其他地质活动的影响。

SH2-Bβ在局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质的表达

目的研究信号分子SH2-Bβ在局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑顶叶皮质表达情况为阐明脑缺血的演变的分子机制从而为临床治疗提供理论依据。方法用线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉制作局灶性脑缺血再灌注模型,动物随机分为假手术组和缺血再灌注组,应用免疫组织化学SABC法和图像分析方法检测大鼠顶叶皮质SH2-Bβ表达情况。结果假手术组右侧顶叶皮质SH2-Bβ有很少的表达,而缺血再灌注组3 h时间点SH2-Bβ在右侧顶叶皮质的平均光密度值比假手术组明显增高,持续到24 h,到48 h时间点开始下降,到72 h已逐渐下降但仍高于假手术组(P<0.05)。结论局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质SH2-Bβ被诱导而表达增高,SH2-Bβ可能参与NGF对缺血神经元的保护作用机制,促进神经元存活和损伤的修复。

SH2B1基因多态性与妊娠糖尿病的相关性研究

目的探讨SH2B1基因多态性与妊娠糖尿病患者胰岛素抵抗的关系。方法选取164例妊娠期糖尿病(GDM)患者和130例糖耐量正常孕妇。采用限制性片段多态性聚合酶链反应检测SH2B1基因型,并且分析相关临床资料。结果 GDM组SH2B1(rs4788102)基因GA型与GG型比较,差异有统计学意义[OR=1.531,(95%CI:1.093,2.374)P=0.04],A等位基因频率与G等位基因频率比较,差异有统计学意义[OR=1.436,(95%CI:1.091,1.972)P=0.01]。GDM组GA+AA基因型与GG基因型比较,差异有统计学意义[OR=1.699,(95%CI:1.185,2.479)P=0.02]。GDM组中GA+AA基因型体重指数、三酰甘油、瘦素及稳态模型评估胰岛素抵抗指数与GG基因型比较,差异有统计学意义(P<0.05)。经Logistic回归分析显示,GA+AA基因型为稳态模型法测定胰岛素抵抗指数升高的危险因素。结论 SH2B1(rs4788102)基因多态性可能是GDM的一个易感位点,监测孕妇该基因位点,可以用于GDM发生风险的预测。

小鼠下丘脑SH2B1,SOCS3,PTP1B及NPY表达的变化及其与肥胖的关系

目的:研究肥胖小鼠及正常小鼠不同周龄下丘脑组织SH2B1(adapter protein with a Src-homology 2 domain),细胞因子信号转导抑制蛋白3(the suppressor of cytokine signaling-3,SOCS3),蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(proteintyrosine phosphatase 1B,PTP1B)和神经肽Y(neturopetide Y,NPY)表达的变化规律及其与血清瘦素及胰岛素水平的关系。方法:选用健康C57BL/6乳鼠制作肥胖动物模型,计算Lee’s指数及稳态模型胰岛素抵抗指数。荧光定量RT-PCR法检测下丘脑SH2B1,SOCS3及PTP1B mRNA表达量,Western印迹检测下丘脑SH2B1和NPY蛋白表达量。结果:与同周龄对照组小鼠相比,肥胖组小鼠下丘脑组织SH2B1 mRNA表达减少,SOCS3及PTP1B mRNA表达增加;Western印迹结果显示:肥胖组小鼠SH2B1蛋白表达水平较对照组下降,NPY表达升高。直线相关分析显示:血清瘦素和血清空腹胰岛素水平与SH2B1 mRNA表达呈负相关,与SOCS3及PTP1B mRNA表达正相关。结论:SH2B1,SOCS3,PTP1B及NPY是肥胖发生、发展过程中的关键因子。

抗SH2-Bβ抗体可减轻哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性

目的:研究SH2-Bβ在支气管哮喘发病中的作用。方法:SH2-Bβ被阻断后,观察哮喘小鼠肺泡灌洗液中细胞数、应用酶联免疫吸附实验肺泡灌洗液、血清及脾细胞培养液中IgE、IL-4含量变化。应用小鼠肺功能仪检测气道阻力的变化。结果:同哮喘组比,anti-SH2-Bβ组:1)气道阻力明显降低(P<0.01);2)肺泡灌洗液中细胞总数及嗜酸细胞数明显降低(P<0.01);3)血清IgE及脾细胞培养液中IgE、IL-4含量明显降低(P<0.01)。结论:SH2-Bβ参与哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的发病机制。阻断SH2-Bβ可能成为治疗过敏性哮喘的有效新方法。

SH2B1调控JAK2/IRS2在肥胖症发病中的分子机制

目的:研究JAK2接头蛋白SH2B1调控JAK2/IRS2在肥胖症发病中的作用及其分子机制。方法:采用高效稳定表达瘦素受体的细胞株HEK239LRb和SH2B1基因缺失小鼠,Western印迹、[γ-32P]-ATP体外激活分析法分析瘦素信号通路关键分子JAK2和IRS2的酪氨酸磷酸化水平;ELISA法测定小鼠血清瘦素水平;检测出生后至27周小鼠体质量。结果:在高效稳定表达瘦素受体细胞株HEK239LRb中,SH2B13显著增强瘦素刺激的JAK2激酶活性和IRS2磷酸化;在SH2B1基因缺失小鼠中,瘦素刺激JAK2激酶活性和IRS2酪氨酸磷酸化水平均显著降低;无论空腹还是随机给食,SH2B1基因缺失小鼠血清瘦素水平均升高并发展为高瘦素血症,其血清瘦素水平与同窝野生型小鼠相比分别增加3.2倍和5.1倍。5周后,SH2B1基因缺失小鼠体质量逐渐增加,21周龄时,大约为同窝野生型小鼠2倍。结论:JAK2接头蛋白SH2B1是内源性瘦素敏感性增强子,通过瘦素JAK2/IRS2信号通路参与瘦素对体质量的调节,SH2B1基因缺失小鼠易发展为高瘦素血症及肥胖。