Advances in toxicological studies of Radix Phytolaccae

Radix Phytolaccae is the dried root of Phytolacca acinosa Roxb or P.ameri-cana L,which is commonly used as a traditional Chinese medicine to treat diseases like cirrhotic ascites,hepatitis B,nephrotic syndrome,psoriasis,etc.However,there is no exact basis for its clinical application safety.In this paper,the toxic effects and mechanism of Saponin A(EsA),the main component of Radix Phytolaccae,were summarized by searching the results and reports of toxicology related to the plant from 1991 to 2023 on CNKI and pubmed,aiming to provide reference for the toxicological research and future research direction of Radix Phytolaccae,so that Radix Phytolaccae can be safely and effectively used in clinical practice.

商陆贴敷神阙穴联合常规治疗脑出血后便秘临床研究

目的:观察商陆贴敷神阙穴联合常规治疗脑出血后便秘患者的临床疗效,及对排便情况、生活质量的影响。方法:选取脑出血后便秘患者94例,采用随机数字表法分为对照组和观察组各47例。所有患者均进行脑内血肿清除去骨瓣术治疗,对照组术后予以常规治疗,观察组在对照组基础上联合商陆贴敷神阙穴进行综合干预。2组均治疗7 d后,比较2组临床疗效,以及治疗前后便秘症状评分、肛肠动力学[肛管最大收缩压(MSP)、肛管静息压(ARP)]水平、容量感觉阈值[初始排便感觉阈值(DSV)、(DSV)和最大耐受阈值(MTV)]、粪便肠道短链脂肪酸水平及便秘患者生活质量自评量表评分。结果:治疗7 d后,观察组总有效率为91.49%,高于对照组72.34%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组便秘症状各项评分均较治疗前降低(P<0.05);观察组排便困难、粪便性状、排便频率、腹胀评分均低于对照组(P<0.05),2组排便时间、下坠不尽胀感评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组MSP、ARP水平均较治疗前升高(P<0.05),且观察组MSP、ARP水平均高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组DSV、MTV水平均较治疗前降低(P<0.05),且观察组DSV、MTV水平均低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组丁酸水平均较治疗前升高(P<0.05),且观察组丁酸水平高于对照组(P<0.05);2组乙酸、丙酸水平治疗前后均变化不大(P>0.05)。治疗后,2组生活质量自评量表中生理、忧虑、满意度、社会心理评分均较治疗前降低(P<0.05),且观察组上述各项评分均低于对照组(P<0.05)。结论:商陆贴敷神阙穴联合常规治疗可有效改善脑出血后便秘患者便秘症状,改善肛门括约肌的收缩力及肠道功能,有效调节肠道短链脂肪酸水平,提高患者生活质量,具有较好的临床效果。

苗药莴比苷(商陆)不同炮制品对小鼠脾虚动物模型的影响

目的研究苗药莴比苷(商陆)不同炮制品对小鼠脾虚动物模型的影响。方法采用醋炙、蒸制、流水浸后蒸制等方法炮制样品,通过“大黄苦寒泻下+饮食失节+劳倦过度”联合法,建立小鼠脾虚动物模型,以参苓白术散为阳性对照,通过外观体征、脏器指数、负重游泳、病理切片等,比较莴比苷(商陆)不同炮制品对小鼠脾虚动物模型的影响。结果莴比苷(商陆)蒸制后可明显改善小鼠脾虚动物模型的外观体征,有效延长负重游泳时间,恢复脾脏器指数,促进脾小体淋巴细胞的增殖,改善脾脏功能,以蒸制12 h作用较强。结论莴比苷(商陆)蒸制后,具有改善脾虚动物模型作用,久蒸药效降低,研究结果为进一步扩大该药物的临床应用奠定一定的实验基础。

“落得打”本草考证

“落得打”在《中华本草》《中国植物志》及各省药物志中均没有作为正名收录,现今通常作为“积雪草”的处方名应用于临床,但文献记载的“落得打”别名有多种,如积雪草、商陆、陆英等。经考证,积雪草与“落得打”不存在异名关系,本草专书记载的“落得打”与积雪草的植物特征、功效主治均不一致,且积雪草其名由来已久,在历代本草专书中均以正名记载,并无作“落得打”先例。其次,明清以来上海周边地区地方志文献中记载的“落得打”即商陆,以及《浙江民间常用草药》中记载的“落得打”为“陆英”之异名,证据均不充分。《本草从新》《本草拾遗》所载“落得打”性味甘平,陆英味苦性寒、商陆味辛酸性平且具有毒性,三者虽皆记载可外用,但主治有较大差别,因此,三者应为不同药物,不存在异名关系。整理《本草从新》及《本草拾遗》中关于“落得打”的记载,发现其植物特征、用药部位、功效主治等方面与土牛膝更相似,土牛膝与怀牛膝、川牛膝相比药力稍逊但功效相近,有较好的破恶血功效,是治疗跌打损伤的一味良药,故“落得打”应为土牛膝。

苗药莴比苷(商陆)中总多糖提取工艺的优选

目的:优选苗药莴比苷(商陆)总多糖的最佳提取工艺。方法:以莴比苷(商陆)为材料,以总多糖含量为指标,采用紫外-可见分光光度法,通过单因素试验及L 9(33)正交试验相结合,研究提取时间、提取次数、料液比对莴比苷(商陆)中总多糖含量的影响。结果:莴比苷(商陆)最佳提取工艺为:以蒸馏水为溶剂,超声提取60 min,料液比为1∶40(0.5 g:20 mL),提取1次。结论:通过正交试验优选的提取工艺方法可行、重复性好、总多糖提取率高,对莴比苷(商陆)质量评价及筛选关键有效部位提供参考依据。

正交试验优选苗药莴比苷(商陆)中总皂苷的提取工艺

目的:建立苗药莴比苷(商陆)中总皂苷的最佳提取工艺,为药效学试验筛选有效部位提供依据。方法:采用单因素试验、L_(9)(3^(4))正交试验,结合紫外-可见分光光度法,研究提取溶剂浓度、提取时间,提取次数、料液比对莴比苷(商陆)中总皂苷含量的影响。结果:以总皂苷为指标,莴比苷(商陆)最佳提取工艺为:40%甲醇,回流提取60 min,料液比为1 g∶20 mL,提取1次。结论:通过正交试验优选的提取工艺方法可行、重复性好、总皂苷提取率高,对莴比苷(商陆)中筛选关键有效部位提供了最佳给药组。

不同炮制方法对商陆中商陆皂苷甲含量的影响

目的建立商陆中商陆皂苷甲的含量测定方法,并考察不同炮制方法对商陆中商陆皂苷甲含量影响的差异。方法分别用醋炙法、醋蒸法、清蒸法、绿豆蒸法、高压蒸法炮制商陆,HPLC法测定不同炮制品中商陆皂苷甲含量,以Sino-Chrom ODS BP柱为分析柱,以1‰甲酸乙腈溶液和1‰甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长210 nm,柱温30℃,流速1.0 mL/min。结果商陆醋炙或清蒸1 h后,商陆皂苷甲含量升高,醋蒸,清蒸10 h,绿豆蒸,高压蒸后,商陆皂苷甲含量下降,尤以醋蒸品下降明显。结论所建立的商陆皂苷甲含量测定方法操作简便快速,结果准确可靠,但以商陆皂苷甲为指标来控制商陆饮片的质量较为单一,有必要进一步研究。

商陆提取物抑菌活性评价研究

目的:探讨商陆的有效抑菌活性成分。方法:采用琼脂扩散法测定不同商陆提取物对临床常见的15株病原菌的抑菌圈;采用液体稀释法测定最小抑菌浓度。结果:商陆不同粗提物对病原菌有不同程度的抑制作用,商陆水煎液仅对不动杆菌、白假丝酵母、新生隐球菌有一定抑制作用,最小抑菌浓度分别为500.0,500.0,62.5mg.mL-1,抑菌作用不明显;多糖提取物仅对产气荚膜梭菌、痢疾志贺菌有一定抑制作用,最小抑菌浓度为60.0,7.5mg.mL-1;商陆皂苷30%乙醇提取物抑菌效果较明显、抗菌谱较广,对产气荚膜梭菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、志贺菌、甲型副伤寒菌、枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌、白假丝酵母均有抑菌作用,最小抑菌浓度范围为17.6～70.0mg.mL-1;商陆皂苷60%和90%乙醇提取物无抑菌活性。结论:商陆抑菌活性主要有效部位为极性较大的皂苷类提取物。

商陆药材中商陆皂苷甲的含量测定

目的建立商陆药材中商陆皂苷甲的高效液相色谱(HPLC)分析方法。方法采用UltimateAQ-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.02%磷酸(32:68)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长203nm,柱温30℃。结果商陆皂苷甲在1.0～7.0μg呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为99.1%(RSD=2.7%)。8批不同产地商陆药材中商陆皂苷甲的质量分数在0.25%～0.62%。结论方法简单、重复性好,可用于商陆药材的质量控制。

薄层扫描法测定商陆饮片中商陆毒素含量

商陆毒素是商陆的主要毒性成分之一。本文采用薄层扫描法对垂序商陆饮片中商陆毒素的含量进行了测定,具有方法简便、快速、可靠等优点,可用于商陆饮片的质量监控。

商陆及其性味拆分组分对阿霉素肾病大鼠肾脏的保护作用研究

目的:观察商陆及其性味拆分组分对阿霉素肾病模型大鼠肾脏的保护作用。方法:采用尾静脉注射盐酸多柔比星(7.5 mg/100 g)的方法建立大鼠肾病综合征模型。造模成功后,给药两周。考察商陆低剂量组(0.10 g/kg)、商陆高剂量组(0.20 g/kg)、多糖低剂量组(0.15 g/kg)、多糖高剂量组(0.31 g/kg)、皂苷低剂量组(0.11 g/kg)、皂苷高剂量组(0.22 g/kg)、多糖与皂苷合用组(多糖0.31 g/kg+皂苷0.22 g/kg)血清中白蛋白、总蛋白、总甘油三酯、总胆固醇、肌酐、尿素氮、硫酸吲哚酚、血清内毒素脂多糖以及尿中蛋白含量的变化。观察各组肾脏、结肠组织病理改变。以16S rDNA对空白组、模型组、泼尼松组、商陆高剂量组、多糖高剂量组、皂苷高剂量组、多糖皂苷合用组粪便样品的肠道菌群进行分析。结果:商陆及其性味拆分组分降低了阿霉素肾病大鼠血清内异常升高的肌酐、尿素氮、总甘油三酯、总胆固醇、硫酸吲哚酚和内毒素脂多糖(P<0.01),提高了总蛋白和白蛋白(P<0.01)。光镜检查结果表明,商陆及其性味拆分组分肾小管上皮肿胀明显减轻。商陆及其性味拆分组分显著提高了在模型组中减少的普雷沃菌属水平。结论:商陆及其性味拆分组分具有改善阿霉素诱导的肾损伤大鼠肠道菌群失调的作用,能够改善肾功能,缓解低蛋白血症与高脂血症,减少血清内肠道内源性毒素。

高效液相色谱法测定商陆植物中皂苷甲的含量

目的 :建立高效液相色谱法测定商陆植物中皂苷甲的含量。方法 :采用蒸发光散射检测器 ,高效液相色谱法测定含量 ,色谱柱为YWG C18( 4 6mm× 2 5 0mm ,5 μg) ;流动相为水 :甲醇 ( 6 6∶34) ;流速 1 0ml/min ;检测波长 2 0 7nm。结果 :线性范围为 1 0 4 μg～ 9 36 μg(r =0 .9995 ,n =5 ) ,回收率为 10 0 5 % ,RSD为 1 1%。 结论

商陆致大鼠肾损伤的基因组学研究

目的采用寡核苷酸微阵列芯片技术探讨商陆长期给药对大鼠肾组织相关细胞因子及基因表达的影响,以阐释商陆致大鼠肾损伤的作用机制。方法将大鼠随机分为对照组及商陆低、高剂量组(10、20 g·kg-1),灌胃商陆水煎液(20 mL·kg-1)或等体积纯水,每天1次,连续49 d。采用酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化法(IHC)检测肾组织中相关炎性因子[白细胞介素(IL)1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]含量及核因子κB(NF-κB)表达;采用全基因组寡核苷酸生物芯片检测大鼠肾组织基因表达,筛选差异基因,并进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法验证差异基因。结果与对照组比较,商陆高、低剂量组大鼠肾组织中IL-1β、IL-6、TNF-α含量均明显升高(P<0.05,P<0.01),商陆高剂量组大鼠肾组织中NF-κB表达量明显升高(P<0.05);商陆高、低剂量组分别有2 560、1 923个差异表达基因,两组均激活了丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的MAP、p38 MAPK、JNK 3条信号通路,且高剂量组引起MAPK通路的差异基因数是低剂量组的2倍;商陆高剂量组还激活了Janus激酶/信号转导与转录激活因子(JAK-STAT)信号通路及细胞凋亡(Apoptosis)信号通路。验证实验结果表明,与对照组比较,商陆低剂量组大鼠肾组织的转化生长因子β1(TGF-β1)基因表达量明显升高(P<0.01),而高剂量组大鼠肾组织的IL-1β、表皮生长因子受体(EGFR)、TGF-β1基因表达量均显著升高(P<0.01)。结论通过IL-1β、TGF-β1/β2等细胞因子激活MAPK、JAK-STAT及细胞凋亡信号转导通路,继而引起炎性反应和细胞凋亡,可能是商陆致大鼠肾损伤的机制之一。

不同醋量醋煮对商陆毒性及药效的影响

目的 :考察不同醋量对商陆毒性及药效的影响。方法 :采用急性毒性实验 (测LD50 ) ,祛痰实验 (酚红排泌法 )及利尿实验 (滤纸法 )。结果 :商陆醋制后毒性明显降低 ,利尿作用有所缓和 ;生品和 30 %醋煮品祛痰效果较好 ,而 5 0 % ,10 0 %醋量醋煮制商陆较生品差。结论 :商陆以 30 %醋煮制为佳。

苯酚-硫酸法联合DNS法测定商陆多糖及响应面法优化超声波辅助提取研究

目的:探寻一种商陆多糖快速、简捷的测定方法。方法:利用紫外分光光度计,分别采用苯酚-硫酸法测定商陆总糖含量,DNS法测定还原糖含量,用二者的差值作为测得的商陆多糖含量,并从重复性、稳定性、加样回收率等方面进行方法学考察;通过对商陆多糖超声波辅助提取的单因素研究,以多糖提取率为响应值,采用四因素三水平的响应面试验设计进行工艺优化。结果:苯酚-硫酸法联合DNS法测定商陆多糖具有良好的适用性;最佳提取工艺为料液比1∶40(g∶m L)、超声时间30 min、超声温度60℃、超声功率350 W,在此这条件下得到商陆多糖提取率平均为(12.38%±0.59%)。结论:本实验采用的样品处理方法简单,测定方法可靠,可用于商陆多糖的测定。

中药商陆饮片质量研究

从饮片性状、粉末特征、荧光反应、薄层层析、浸出物测定等方面报告了对商陆饮片质量的研究情况。

商陆总皂苷提取工艺研究

实验采用乙醇回流提取法提取商陆根中的总皂苷,用紫外分光光度法测定总皂苷含量,以人参皂苷为指标成分,测定波长为540nm,考察乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比对总皂苷提取液浓度的影响。结果表明,乙醇浓度80%,提取温度90℃,提取时间2h,料液比1∶20,商陆总皂苷提取液浓度分别达到最大值。以乙醇浓度(A)、提取温度(B)、提取时间(C)3个对皂苷提取影响较大的因素,以总皂苷提取率为指标设计正交实验,3个因素对商陆总皂苷提取液浓度的影响大小为:C>B>A,提取工艺条件A1B1C2,即乙醇浓度80%、提取温度80℃,提取时间2h,该条件下商陆总皂苷提取液浓度达到最大值0.141mg/g。

高效液相色谱法快速检测商陆中毒样品中的两种商陆皂苷

目的建立高效液相色谱法快速检测商陆中毒样品中商陆皂苷的方法。方法采用微波辅助萃取法,提取商陆中的商陆皂苷甲和商陆皂苷乙,C18色谱柱分离后,采用紫外检测器进行测定,检测波长203nm,流动相为乙腈-0.01%磷酸溶液,流速为1.0mL/min。结果商陆皂苷甲和商陆皂苷乙在质量浓度0~500μg/mL范围内呈良好线性关系,相关系数均>0.999,检出限分别为36.5、96.5mg/kg。加标回收率为96.3%~98.6%,相对标准偏差(RSD)为0.13%~0.54%。结论建立的方法简单、快速、准确,适用于商陆中毒样品中两种商陆皂苷的应急检测需要。

醋制对商陆促利尿作用的影响及其机制研究

目的探索毒性中药商陆醋制前后对机体利尿作用及相关指标的影响。方法灌胃给予盐水负荷模型大鼠商陆醋制前后的水煎液,测定给药5h内尿量变化、血浆抗利尿激素(ADH)、醛固酮(ALD)、心房钠尿肽(ANP)含量及肾脏水通道蛋白AQP2、AQP3、AQP4表达水平。结果商陆醋制前后均能导致大鼠尿量显著增加(P<0.01),醋制品较生品组大鼠尿量有显著增强(P<0.05);商陆生品仅高剂量可显著降低血浆ADH水平(P<0.01),同时有降低ALD、增加ANP水平的趋势,但无显著性差异;商陆醋品则可显著降低血浆ADH、ALD水平,升高ANP含量(P<0.05～0.01);商陆生品可显著抑制肾脏中AQP2、AQP3和AQP4蛋白表达(P<0.05～0.01),醋制后可显著抑制AQP2、AQP3蛋白表达水平(P<0.01),对AQP4蛋白表达与模型组相比无显著性影响,且醋制品较生品抑制AQP3蛋白表达更显著(P<0.05)。结论商陆经醋制后仍具有较强的利尿作用,且分子水平的效应比生品更强。商陆利尿作用的机制除与其改变机体体液代谢相关的激素水平外,还可能与其抑制肾脏远曲小管和集合管AQPs蛋白表达,进而抑制水的重吸收有关。

HPLC-ELSD法同时测定商陆中四种皂苷的含量

目的:建立HPLC-ELSD法同时测定商陆中商陆皂苷A、商陆皂苷B、商陆皂苷C和商陆皂苷H的含量。方法:采用Diamonsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.1%冰乙酸水溶液(B),梯度洗脱(0~20 min,50%A^90%A),流速1.0 mL·min^(-1),用蒸发光散射检测器进行检测,柱温30℃,气体流速2.0 L·min^(-1),漂移管温度50℃。结果:商陆皂苷A、商陆皂苷B、商陆皂苷C和商陆皂苷H分别在0.719~8.628、0.376~4.518、0.258~3.102、0.503~6.036μg范围内,进样量的对数与峰面积对数呈现良好的线性关系(r=0.9992~0.9996),平均加样回收率(n=6)在99.52%~100.17%之间,RSD为1.83%~2.34%。30批商陆样品中商陆皂苷A、商陆皂苷B、商陆皂苷C和商陆皂苷H的含量(n=3)测定结果分别为1.53~4.58、0.16~1.40、0.10~0.61、0.13~4.98 mg·g^(-1)。结论:该方法准确且重复性好,适用于商陆中四种三萜皂苷的含量测定。