QuEChERS/气相色谱-质谱法同时测定砂仁中樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯含量

目的建立同时测定砂仁中樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯含量的QuEChERS/气相色谱-质谱(QuEChERS/GC-MS)法。方法样品用无水乙醇提取,经N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶、石墨化炭黑和硫酸镁吸附净化处理。色谱柱为HP-5 MS型色谱柱(30 m×0.25 mm,0.25μm),程序升温,流速为1.0 mL/min,分流进样,分流比为20∶1,电子轰击离子源,选择性监测、全扫描模式,定量特征离子质荷比为95。比较QuEChERS/GC-MS法和气相色谱-氢火焰离子化检测器(GC-FID)法含量测定结果的相对相差值,考察方法的可靠性。结果樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯的质量浓度分别在50~2000μg/mL、5~200μg/mL、100~5000μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(R2≥0.997,n=6);检测限均为0.005 mg/kg,定量限均为0.015 mg/kg;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均低于3.0%;50%,100%,200%水平的加样回收率为93.37%~105.37%,RSD为1.38%~2.85%(n=6)。QuEChERS/GC-MS法和GC-FID法测定樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯含量的相对相差值分别为4.76%,4.64%,3.67%。结论该方法操作简便、灵敏度高、重复性好、结果准确,可用于砂仁中樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯的含量测定。

砂仁挥发性成分及其对GES-1细胞保护作用的比较分析

目的:分析阳春砂、绿壳砂、海南砂及其伪品海南假砂的挥发性成分,比较四种砂仁挥发油对胃黏膜保护的活性。方法:采用顶空固相微萃取技术与气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS),结合NIST08和NIST08s谱库对比定性色谱结果,分析4种砂仁的挥发性成分;采用面积归一化法,计算各挥发性成分的相对百分比含量,并进行主成分及热图分析;建立人胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)损伤模型,采用CCK-8法,对4种砂仁挥发油进行胃黏膜保护活性评价。结果:从阳春砂、绿壳砂、海南砂及其海南假砂中共检出114种化学成分,分别鉴定出57、58、58、58种成分,各占总挥发性成分相对百分比含量的93.23%、88.79%、90.87%、91.40%,其中总单萜烃类化合物各占总挥发性成分相对百分比含量的40.48%、37.77%、37.09%、33.39%,总倍半萜烃类化合物各占总挥发性成分相对百分比含量的52.53%、49.88%、31.22%、35.45%;阳春砂、绿壳砂、海南砂挥发油对乙醇致GES-1细胞损伤具有保护作用(P<0.05),海南假砂无明显活性。结论:阳春砂与绿壳砂的挥发性成分及含量差异较小,而海南砂、海南假砂与阳春砂、绿壳砂的挥发性成分及含量差异较大;阳春砂、绿壳砂、海南砂挥发油具有一定的胃黏膜保护活性。

基于气相色谱-质谱联用结合多元统计分析不同炮制方法对砂仁挥发性成分的影响

目的分析炒制、姜炙、盐炙不同炮制方法对砂仁挥发性成分的影响。方法本实验采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)基于多元统计分析对砂仁不同炮制品的挥发性成分进行检测分析,经OPLS-DA分析后,以VIP>1.5和P<0.05为条件筛选差异成分,利用NIST 11谱库检索定性。结果鉴定出49种差异成分,其中只在种子团中发生变化的成分有14种,在果皮中发生变化的成分有22种。砂仁经炮制后能够显著降低种子团中樟脑含量,而炒制则显著增加果皮中乙酸龙脑酯含量,盐炙处理对砂仁中烷烃类成分影响较大,姜炙处理并非仅增加生姜中挥发性成分,体现了炮制机制的复杂性。结论尽管目前并不清楚具体炮制机制,但实验结果为砂仁炮制“减毒增效”作用提供了理论数据,反映出炮制的科学性,从而丰富了砂仁的炮制理论,为深入研究砂仁不同炮制品活性提供了借鉴。

砂仁炭疽病及其致病病原菌研究进展

刺盘孢属真菌(Colletotrichum spp.)引起的炭疽病是砂仁最主要的病害之一,其严重影响了砂仁的安全生产和品质。目前,对砂仁炭疽病病原菌的研究较少。从砂仁炭疽病发生、危害与防控措施,及其病原菌的特性、分类概况与鉴定检测技术等方面研究成果进行概述,以期为砂仁炭疽病基础研究和防控提供参考。

砂仁产业标准化现状分析及标准体系构建

通过对砂仁现行标准进行整合梳理,分析现行标准的发布时间、标准类别和标准内容,归纳砂仁产业标准及标准体系建设中存在的不足,构建覆盖砂仁全产业链的砂仁产业技术标准体系,并提出砂仁技术标准体系实施的对策,为进一步规范砂仁产业、助推砂仁产业标准示范基地建设和切实推动砂仁产业稳步发展提供参考。

基于黄元御“一气周流”理论探讨妊娠恶阻论治

黄元御将《黄帝内经》气机运动延伸归纳为“一气周流,土枢四象”理论,肝木、心火、肺金、肾水为人体四象,水火为升降两极,木金为左右翼佐,调节阴阳升降。妊娠恶阻发病为妊胎壅阻产妇体内气机,中失斡旋,一气则郁,气郁则滞塞,滞塞而不降,升降反作,故病上逆。病机有水火不济,枢机失常;金弱水衰,痰饮上泛;木亢无制,冲气上逆。治病求本,治宜修复轮、轴关系。若患者恶心呕吐、头昏头晕等症不甚严重,无其他不适,治宜理气开郁,斡旋中气,方选豆蔻苓砂汤加减。火水不交属心火不足而戊土虚寒者,治疗需补心火,方用香砂六君子汤加丁香、良姜;若属肾水亏虚而戊土失养者,治疗需注意滋肾水,方用六味地黄丸加石斛、党参、白术、半夏、化橘红等。湿邪所致者,用药需同时考虑理气和化饮两方面,理气先理肺、肾,方中需加入炒牛蒡子、紫菀以利肺气,甘草、桔梗以开肺气;化饮为治标,温土暖水为治阳虚痰饮法则,可加入药对茯苓、干姜。木气郁滞日久者,治疗应润木达郁,兼调中土,方选桂枝汤加减。

含挥发油饮片砂仁标准汤剂的质量评价方法研究

目的:通过分析砂仁标准汤剂出膏率、乙酸龙脑酯及挥发油的含量和转移率、特征图谱,建立其质量评价方法。方法:按要求制备15批砂仁标准汤剂,测定出膏率、乙酸龙脑酯和挥发油含量,并计算转移率。同时采用CORTECS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.6μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,检测波长为260 nm,流速为0.35 mL·min^(–1),柱温为30℃,建立标准汤剂特征图谱分析方法。结果:出膏率为12.3%~17.7%,乙酸龙脑酯转移率为3.9%~10.5%,挥发油转移率为5.6%~15.6%。在最佳色谱条件下,采集到的砂仁标准汤剂特征图谱实现了对多种化学成分的展现,共标定11个特征峰,采用液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)和对照品比对确认其中7个特征峰,其中峰1为原儿茶酸、峰4为香草酸、峰5为儿茶素、峰7为原花青素B2、峰8为表儿茶素、峰10为异槲皮苷、峰11为槲皮苷,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版),得到15批砂仁标准汤剂的相似度为0.984~0.999。聚为两类,2个主成分的累积方差贡献率为81.579%。结论:建立的含量测定及特征图谱方法适用性与准确度好,能较全面地反映砂仁标准汤剂的内在质量,可为砂仁配方颗粒的制备提供参考。

砂仁的炮制历史沿革考据

砂仁,作为我国知名的“四大南药”之一,具有化湿开胃、温脾止泻以及理气安胎之效,在临床上常被用于胃肠道疾病的诊治,素有“开脾胃之要药”之称。研究表明,诸如炒制、盐炙法和姜炙法等炮制技术对砂仁的化学成分和药理作用存在显著影响,有效提升其化湿开胃、温脾止泻以及理气安胎等功效。研究成果为砂仁的临床合理应用提供了科学依据,对传统炮制技术的现代化与标准化具有重大意义。

中药砂仁化学成分研究

从阳春砂果实中分得７个化合物，经光谱分析鉴定为龙脑乙酸酯，樟脑，龙脑，β谷甾醇，香草酸，硬脂酸和棕榈酸，香草酸是首次从本植物分得。用ＧＣＭＳ分析砂仁挥发油成分，鉴定了５７个化合物，其中含量１％以上的有龙脑乙酸酯，樟脑，龙脑，柠檬烯，樟烯，月桂烯，蒈烯３和α松油醇等８个化合物。

砂仁药材质量标准研究

目的：对不同品种、不同产地砂仁药材以及砂仁药材不同部位进行系统的质量标准研究。方法：气相色谱法，水分测定法，灰分测定法。结果：不同品种、不同产地砂仁药材以及砂仁药材不同部位中乙酸龙脑酯含量有明显差异，并与其传统疗效一致；制订了砂仁药材中总灰分、酸不溶性灰分和水分含量的标准。结论：砂仁药材的质量标准研究应选择乙酸龙脑酯为指标并规定其限量。

中药砂仁“品与质”电子鼻判别模型的建立

目的建立一种快速、有效识别中药砂仁品质的科学评价方法。方法引入电子鼻建立中药砂仁的气味指纹图谱,以不同品种、不同产地的25批砂仁样品为研究对象,采用不同分类器建立其"品与质"的电子鼻判别模型,并基于盲样回判进行模型的验证。结果经十折交叉验证法、外部测试集验证法验证,所建立的气味判别模型正判率分别为78%和84%,表明电子鼻可以完成对阳春砂道地与非道地样品的定性分析;此外,传感器响应值为0.04和0.03的砂仁,预测其主要挥发性成分(乙酸龙脑酯)含量情况分别为>3.5 mg/g和<1.8 mg/g,表明电子鼻还可进行定量分析。结论电子鼻技术可作为一种快速、有效鉴别中药"品与质"的潜在分析方法。

砂仁及其混淆品的ITS2序列鉴定

目的应用内转录第二间隔区(ITS2)序列及其二级结构对砂仁混淆品进行鉴定。方法应用CLUSTALX1.83软件进行序列比对,比对后的长度为252bp。用MEGA4.1计算种间、种内遗传距离,并构建系统进化树。结果 ITS2序列可以将砂仁的三个来源阳春砂Amomum villosum、绿壳砂Amomum villosum var.xanthioides或海南砂Amomum longiligulare互相区分开,并与伪品艳山姜Alpinia zerumbet、山姜Alpinia japonica、草果Amomum tsao-ko及同属其它近缘种区分开。结论推荐ITS2作为砂仁及其伪品鉴定用条形码序列。

豆蔻仁挥发油成分的GC-MS分析

目的 用气相色谱-质谱法对豆蔻仁挥发油进行化学成分的分析。方法 采用水蒸气蒸馏法从豆蔻仁中提取挥发油。用归一化法测定各组分的相对百分含量,并用气相色谱-质谱法对其化学成分进行鉴定。结果 共鉴定了25个成分,占挥发油总成分的89.3％以上。结论 此方法稳定可靠,重现性好,适用于中药挥发油的化学成分分析。

白豆蔻、红豆蔻、草豆蔻和肉豆蔻挥发油成分的比较

采用气相色谱-质谱联用技术对白豆蔻、红豆蔻、草豆蔻和肉豆蔻的挥发油成分进行了研究。从4种豆蔻中分别鉴定出33、54、37和29种化学成分,并测定了其相对含量。采用色谱指纹图谱分区法,将白豆蔻、红豆蔻、草豆蔻和肉豆蔻的总离子流色谱图分为4个区,对它们的挥发油成分进行比较。结果表明,白豆蔻挥发油成分与红豆蔻、草豆蔻或肉豆蔻挥发油成分差异较大,且白豆蔻的药效成分为1,8-桉叶油素,其含量远高于红豆蔻或草豆蔻,而在肉豆蔻中未检出该成分,故不宜用红豆蔻、草豆蔻或肉豆蔻代替白豆蔻入药。该研究为白豆蔻、红豆蔻、草豆蔻和肉豆蔻的精油挥发性成分的比较及质量评价提供了新途径。

中药砂仁挥发油化学成分及其抗菌活性(英文)

本研究将Bligh-Dyer溶剂提取法首次应用于植物挥发油的提取,通过GC-MS方法分析,从干燥成熟的砂仁种子和果壳四种挥发油提取物中共鉴定出138种化学成分,挥发油成分主要包括乙酸龙脑酯(5%～47%)、樟脑(4%～17%)、龙脑(1.5%～6%)、莰烯(0.2%～3%)、α-蒎烯(0.2%～3%)、β-蒎烯(0.2%～5%)以及α-柯巴烯(0.1%～2%)等,其中总烯类物质相对含量占总挥发油总成分的10%～40%。从该植物中首次鉴定出蓝桉醇、二环大根香叶烯、薄荷烯醇、二十三烷、二十四烷等新的化学成分35个。所得挥发油对部分真菌及细菌的抑制试验表明其对红色毛癣菌、须毛癣菌、石膏样小孢子癣菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌均表现出显著的抑制活性。因此,砂仁不仅可作为抗菌药物应用于临床,也可以作为食品原料或天然的食品防腐剂用于食品工业的生产。

傅里叶变换红外光谱法应用于中药砂仁真伪鉴别的研究

为了直接准确地鉴别砂仁及其伪品的真伪,采用傅里叶变换红外光谱法直接测定砂仁及其伪品的红外光谱。结果阳春砂、绿壳砂、海南砂的红外光谱差别不大,而砂仁与其伪品红壳砂仁、海南假砂仁、华山姜及山姜的红外光谱吸收差别较大。对同一批次的不同样品进行了重复性试验,二阶导数傅里叶变换红外光谱正峰值的峰位一致率检验结果无显著性差异存在,说明可以采用FTIR法直接、快速、准确地对阳春砂、绿壳砂、海南砂与其伪品红壳砂仁、海南假砂仁、华山姜及山姜进行区别鉴定。

响应曲面法优化微波辅助提取白豆蔻挥发油的工艺研究(英文)

在单因素试验基础上,采用Box-Behnken设计对白豆蔻挥发油微波辅助提取工艺中的液料比、微波时间和微波功率3因素的最优化组合进行定量研究,建立并分析各因素与得率关系的数学模型。结果表明,最佳的工艺条件为液料比10:1(mL/g),微波时间153s和微波功率322W。经验证实验,在此条件下得率为2.67%,与理论计算值2.64%基本一致。说明回归模型能较好地预测白豆蔻挥发油的提取得率。

砂仁的药源调查和商品鉴定

通过调查砂仁主产区药源,并对全国7个省区收集的砂仁商品进行鉴定,结果表明:目前市场流通的商品药材主要来自阳春砂 Amomunm villosum、绿壳砂 A.villosum var.xanthioides和海南砂A.longiligulare等3种的干燥成熟果实或种子。云南及广东产的阳春砂为砂仁的主流商品。

砂仁不同部位总黄酮的含量测定

目的:建立砂仁中总黄酮的提取与含量测定方法,并分别测定砂仁不同部位总黄酮含量。方法:采用紫外分光光度法(UV),以芦丁为对照品,在510 nm波长下测定,标准曲线法计算样品中总黄酮的含量。结果:芦丁的浓度在0～0.132 08 mg(mL-1范围内线性关系良好,线性回归方程为:Y=12.427X-0.012 3,r=0.999 9(n=7);平均回收率为99.67%,RSD为2.37%(n=6)。砂仁不同部位黄酮含量高低顺序为:种子团>果实>果皮。结论:该方法简便、灵敏、准确、重复性好,可用于砂仁药材中总黄酮的含量测定;砂仁不同部位的总黄酮含量有明显差异。

基于SNP位点鉴定砂仁药材物种

目的:为建立基于单核苷酸多态性(SNP)技术鉴别砂仁3个基原(阳春砂Amomum villosum、海南砂Amomum longiligulare、绿壳砂Amomum villosum var.xanthioides)的方法,对这3个种共计60份材料ITS2序列进行分析比较。方法:将实验所得砂仁ITS2序列,应用CodonCode Aligner软件进行序列拼接比对。用MEGA 5.0导出各序列变异位点,并对变异位点进行分析。为验证结果准确性,下载砂仁3个基原GenBank的所有ITS2序列,共计34条,对结果进行验证。结果:砂仁ITS2序列比对后长度为230 bp,3个不同基原在135 bp和199 bp处存在稳定SNP(s)变异位点。结论:本研究开发的两个稳定的SNP(s)位点可以快速准确地鉴定砂仁药材3个基原。