不同品种绵羊的细管冻精解冻质量检测分析

选取8个不同品种羊(引进品种2个,本地品种4个,培育品种2个)的细管冻精,进行外观、剂量、精子活力、前向运动精子数和精子顶体完整率指标的检测分析。结果显示,各细管冻精外观均完好,符合生产标准;剂量检测值为(0.21±0.01) mL,均符合国家标准(≥0.18 mL);精子活力为(37.50%±1.70%)~(51.0%±3.70%),其中,陶赛特羊精子活力值最高,黑裘皮藏羊精子活力值最低;前进运动精子数为≥3×10^(7)个,符合国标;精子顶体完整率为(71.90%±1.13%)~(81.23%±1.0%),其中,西藏(草地型)羊精子顶体完整率最高,陶赛特羊精子顶体完整率最低。8个品种的羊冻精在解冻复苏后各项指标均达到配种生产要求。引进品种的精子活力比本地品种高,前进运动精子数和顶体完整率等其他指标有高有低。

不同浓度大豆卵磷脂替代蛋黄对东佛里生奶绵羊精液冷冻保存效果的影响

本试验皆在研究添加不同浓度大豆卵磷脂(SL)冷冻保存东佛里生奶绵羊精液的效果。我们在Tris基础稀释液中,添加18%蛋黄为对照组,添加0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%SL设为试验组,检测冷冻精液解冻后的精子活率和顶体完整率。结果显示,添加0.5%、2.5%SL冷冻稀释液稀释的精液,解冻后精子活率和顶体完整率与其他组之间存在显著差异(P<0.05);添加18%蛋黄和1%~2%SL冷冻稀释液稀释的精液,冷冻解冻后精子活率和顶体完整率之间无显著差异(P>0.05);添加18%蛋黄和1.0%~1.5%SL冷冻稀释液稀释后的精液,进行人工授精后母羊的妊娠率与对照组无显著差异(P>0.05)。因此,大豆卵磷脂可以作为冷冻保护剂用于东佛里生奶绵羊精液的冷冻保存,其最佳添加浓度为1~2%(g/L)。

陶赛特羊细管冷冻精液制作保存技术的研究

我们对11组试验配方中冷冻效果较好的5组配方用同样的冷冻程序进行了冷冻稀释液、甘油浓度和解冻温度进行了研究。结果表明，2号稀释液效果最好（P〈0.05）甘油浓度为6％时的冷冻效果最佳（P〈0．01），在40～44℃解冻后其活力可高达0．5。

小尾寒羊精液冷冻技术研究

本试验对11只2～3岁小尾羊种公羊的精液品质、保存稀释液和冻精制作技术进行了研究。结果表明:小尾寒羊种公羊的射精量、精液品质、精液pH值、密度、色泽、活率和畸形率均属正常范围,优于无角道塞特和莎福克绵羊;4种稀释液中,A液低温保存效果优于B、C、D 3种稀释液,差异极显著(P<0.01)。B液作为小尾寒羊冷冻精液稀释效果较理想(P<0.01)。6％甘油作为小尾寒羊冷冻精液保护剂效果较理想。

不同冷冻温度对陶赛特肉羊冻后精子活力的影响

采集2只陶赛特肉羊的精液在不同冷冻温度下制作冻精,研究不同冷冻温度对其精子的冻后活力的影响。结果表明:在-105±5℃^-135±5℃的温度下制作的冻精,解冻后的精子活力和精子复苏率非常显著地高于在-75±5℃^-105±5℃的温度下制作的冻精(P<0.01);比在其他2种区间的温度冷冻下、解冻后的精子活力也好,差异显著(P<0.05)。

全基因组水平湖羊不同保种方式的可行性探究

为了在全基因组水平上探究冷冻胚胎和冷冻精液技术对湖羊种群多样性的保护效果,试验采用简化基因组测序方法对冷冻精液(1988年和1998年制备)湖羊群体、冷冻胚胎(1998年制备)湖羊群体及浙江省两个种羊湖羊保种场湖羊群体[即种群A(Asub1、Asub2群体)、种群B(Bsub1、Bsub2、Bsub3群体)、种群C(popC群体)和种群D(popD群体)]的共90只湖羊的遗传多样性及保种效果进行了研究,利用布鲁斯惠勒校准工具、GCTA软件、FastTree软件的ML算法以及Structure软件对不同群体的单核苷酸多态性(SNP)、群体遗传多样性与分化指数、个体间亲缘关系和群体遗传结构进行分析。结果表明:90只不同种群湖羊共存在3 353 529个SNP差异位点;所有群体均处于中度核苷酸多样性水平(0.273~0.325),通过GCTA软件能够将popC和popD群体基本划分开,但Asub1、Asub2、Bsub1、Bsub2、Bsub3群体互相汇集;除Bsub1群体样本基本相似度较高外,其他个体的分化关系相对不明显;湖羊群体的基因信息来源于3个祖先,其中Bsub1群体中的冷冻胚胎湖羊几乎遗失了祖先的信息,遗传多态性相对较低,而popD群体的遗传多态性最高。说明湖羊遗传多样性不高,种质资源较贫瘠,亟需进行种质资源保护;冷冻精液保种能有效维持群体核苷酸的多样性,对于种质资源的保护起到了一定效果;现有的活体保种与冷冻胚胎和冷冻精液相比,同样能够很好地保存生物体的遗传多样性。

添加不同糖类的稀释液对乌骨羊精子冷冻保存效果的比较研究

为了研究添加不同糖类的稀释液对乌骨羊精子冷冻保存的效果,试验选择12只健康成年乌骨羊公羊作为试验动物,每次采集5~7只公羊的精液,分别用含有果糖的Tris-柠檬酸-卵黄稀释液(D1稀释液组)、含有葡萄糖的Tris-柠檬酸-卵黄稀释液(D2稀释液组)和含有乳糖的乳糖-卵黄稀释液(D3稀释液组)以两步稀释法进行稀释后冷冻保存,分别于冷冻前和解冻后测定精子运动和存活能力、质膜和顶体完整性,计算运动精子百分率、存活精子百分率、质膜完整精子百分率、顶体完整精子百分率,分析比较新鲜精液和解冻后精液及3种稀释液冻存精子解冻后上述指标的差异。结果表明:新鲜精液的运动精子百分率为(89.23±4.54)%,存活精子百分率为(64.65±6.78)%,质膜完整精子百分率为(72.59±9.07)%,顶体完整精子百分率为(82.79±7.87)%。经过稀释、降温、冷冻和解冻等操作后,相比于新鲜精液,冷冻精液的运动精子百分率、存活精子百分率、质膜完整精子百分率和顶体完整精子百分率分别极显著下降了80.46%、67.21%、60.35%和39.73%(P<0.01)。D1稀释液组解冻后精液的运动精子百分率[(33.64±4.37)%]显著高于D2和D3稀释液组[(9.26±2.42)%、(9.42±4.63)%,P<0.05],而D2和D3稀释液组的运动精子百分率差异不显著(P>0.05)。D1稀释液组解冻后精液的存活精子百分率最高[(33.09±7.56)%],显著高于D2稀释液组[(7.96±2.42)%,P<0.05],但是与D3稀释液组[(22.56±9.36)%]差异不显著(P>0.05)。D1稀释液组解冻后精液的质膜完整精子百分率最高[(35.80±11.30)%],显著高于D2稀释液组[(17.29±7.51)%,P<0.05],但是与D3稀释液组[(33.26±6.30)%]差异不显著(P>0.05)。D2稀释液组解冻后精液的顶体完整精子百分率最高[(66.02±6.40)%],显著高于D1[(50.43±6.12)%]和D3稀释液组[(33.26±7.70)%,P<0.05];D1稀释液组的顶体完整精子百分率显著高于D3稀释液组(P<0.05)。说明含果糖的Tris-柠檬酸-卵黄稀释液能较好地保护乌骨羊冷冻精子,提高了解冻后精子运动和存活能力,以及质膜和顶体完整率。

高原型藏羊采精及细管冻精授配技术

近年,随着藏羊养殖产业不断向前发展,养殖规模扩大的同时,高品质高生产能力种公羊的数量锐减。由于农牧民群众不注重做好优质种质资源的保存工作,种间无须杂交滥交行为,使生产的后代抵抗能力较差,生长周期较长,育肥效果较差,不利于提高养殖效益。需要不断加强高原型藏羊的选育工作,通过推广应用细管冻精配种技术,缩短育种周期。为进一步推动青海地区高原型藏羊育种工作的高效开展,该文主要论述高原型藏羊采精技术,在此基础上开展细管冻精配种试验。研究结果表明,采集到的藏羊种公羊的新鲜经验品质较高,精子活力较强,冷冻处理后精子活性普遍0.35~0.5,选择使用冷冻精液对20只发情的母羊进行配种后没有出现反情现象,全部受胎,取得很好的配种效果。

海藻糖和果糖联合应用提高了乌骨羊冷冻精子质量

该文探讨了海藻糖和果糖联合应用对乌骨羊精子冷冻保存的影响。在含有82.65 mmol/L果糖的Tris-柠檬酸–卵黄稀释液中分别添加0、5、10、15、25、50和100 mmol/L海藻糖,并将其分别命名为T0、T5、T10、T15、T25、T50和T100,采用两步稀释法对来自12只乌骨羊的27份精液进行冷冻保存。在精子冷冻前和解冻后,利用精子质量分析仪评估精子运动情况,采用伊红–苯胺黑染色法评估精子存活百分率,采用羧基荧光素二乙酸酯–碘化丙碇双重染色评估精子质膜状况,利用络合异硫氰酸荧光素的碗豆凝集素染色对精子顶体状况进行评估。采用过氧化氢含量测定试剂盒和丙二醛含量测定试剂盒检测各实验组解冻后精子的过氧化氢含量和丙二醛含量,以评估精子脂质过氧化状况。结果显示,T5、T10和T15组解冻后的精子运动和存活率有显著提高;T5组精子质膜状况有显著改善;和T0组相比,添加海藻糖并不能改善精子顶体状况;添加海藻糖不能降低解冻后精子的过氧化氢含量,但是可以显著降低精子的丙二醛含量。该研究的结果说明:在Tris-柠檬酸–卵黄稀释液中添加5 mmol/L海藻糖和82.65 mmol/L果糖能提高乌骨羊冷冻精子质量,能够改善解冻后精子的运动、存活和质膜完整性,减少解冻后精子膜的脂质过氧化。