羊消化道4种易混淆线虫虫卵的形态学观察与比较

为了方便临床上鉴定羊消化道常见且易混淆线虫虫卵并丰富相关资料,试验从羊消化道中采集疑似捻转血矛线虫、夏伯特线虫、食道口线虫和奥斯特线虫共4种线虫,采用形态学和分子生物学方法鉴定虫种,将4种线虫于体外短暂培养后得到纯种虫卵,通过观察虫卵不同发育阶段的胚胎形态变化获取每种线虫虫卵形态特征,并对虫卵的长径、宽径和长宽比进行测定。结果表明:经鉴定4种线虫分别为捻转血矛线虫、绵羊夏伯特线虫、粗纹食道口线虫和普通奥斯特线虫。4种线虫虫卵初期胚胎多呈收缩状态且形似桑葚,在外观形态上具有相似性,均为双层卵壳,多数对称,少数不对称。捻转血矛线虫虫卵呈短椭圆形,颜色较浅;绵羊夏伯特线虫虫卵呈椭圆形,颜色较捻转血矛线虫虫卵深;粗纹食道口线虫虫卵呈长椭圆形,颜色较捻转血矛线虫虫卵深,与绵羊夏伯特线虫虫卵相近;普通奥斯特线虫虫卵亦呈长椭圆形,颜色与捻转血矛线虫相近,较绵羊夏伯特线虫和粗纹食道口线虫虫卵浅。虫卵在生理盐水中培养1~6 d后,捻转血矛线虫、绵羊夏伯特线虫和普通奥斯特线虫依次进入蝌蚪期和幼虫期,但仅凭肉眼依然难以区分虫卵种类;绵羊食道口线虫未观察到含蝌蚪或含幼虫的虫卵,仅在桑葚期观察到胚胎收缩成1团及分裂成2团或3团不同形态的虫卵。部分粗纹食道口线虫和普通奥斯特线虫虫卵可观察到明显的气室。捻转血矛线虫卵大小为(61.22~102.05)μm×(37.96~69.33)μm,长宽比为1.51;绵羊夏伯特线虫卵大小为(81.89~139.14)μm×(43.97~90.60)μm,长宽比为1.57;粗纹食道口线虫卵的大小为(84.57~104.59)μm×(40.86~59.18)μm,长宽比为1.83;普通奥斯特线虫卵大小为(82.83~117.22)μm×(41.70~71.79)μm,长宽比为1.76。说明4种线虫虫卵的外观形态虽有细微差异,但没有特征性标识,临床上易造成误判,因此采用分子生物学方法进行鉴定更为可靠。

绵羊夏伯特线虫外生性发育的研究

把绵羊夏伯特线虫（Ｃｈａｂｅｒｔｉａｏｖｉｎａ）虫卵置于消毒粪便培养基内，于２５℃温箱内及１７℃（±２℃）室内进行培养。结果表明：在２５℃下经４０～４４ｈ第一期幼虫逸出卵壳，６２～６９ｈ完成第一次蜕皮成为第二期幼虫，１６２～１８９ｈ完成第二次蜕皮成为第三期幼虫；第三期幼虫肠细胞呈矩形，共３２个，尾鞘长０．１７５～０，２２０ｍｍ，生殖原基距头端０．３４５～０．３８１ｍｍ；在室内培养的虫卵发育缓慢，约经１０ｄ才发育为第三期幼虫。