参附黄配方对脓毒症小鼠大脑皮质氧化损伤的影响

目的 探讨参附黄配方对脓毒症神经元损伤的影响及作用机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、脓毒症组和参附黄组,每组26只。假手术组小鼠麻醉后仅游离盲肠,不结扎及穿刺。脓毒症组和参附黄组采取盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型。参附黄组造模后4 h予参附黄组方2.5 g/kg灌胃,每隔12 h进行下一次灌胃,每日灌胃2次,每次0.5 ml;脓毒症组和假手术组每次灌服纯净水0.5 ml,灌胃时间同参附黄组,各组均灌胃3 d。造模72 h后采用尼氏染色观察大脑前额叶皮层神经元数量的变化,采用二氢乙啶染色检测大脑皮质组织中活性氧含量,采用8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)免疫荧光染色评价大脑皮质氧化DNA损伤的情况。结果 与假手术组比较,脓毒症组小鼠前额叶皮层神经元数量显著减少,活性氧含量增加,8-OHdG表达增多(P<0.05);与脓毒症组相比较,参附黄组神经元数量增多,活性氧含量降低,8-OHdG表达减少(P<0.05)。结论 参附黄配方对CLP小鼠前额叶皮质神经元损伤具有一定保护作用,其机制可能降低氧化应激和氧化DNA损伤有关。

参附黄方对斑马鱼炎症、巨噬细胞吞噬功能的影响

目的探讨参附黄方对斑马鱼炎症、巨噬细胞吞噬功能的作用及其机制。方法以转基因中性粒细胞荧光斑马鱼、野生型AB品系斑马鱼为实验对象,分别建立斑马鱼炎症模型和巨噬细胞吞噬模型。采用死亡率和心血管毒性评价筛选参附黄方的药用浓度;采用中性粒细胞计数评价参附黄方对斑马鱼炎症模型的作用,并以吲哚美辛为对照;检测斑马鱼白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、重组人精氨酸酶1(ARG1)、白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达评价参附黄方对斑马鱼吞噬细胞吞噬功能的影响。结果参附黄方对斑马鱼的最大安全浓度为10 mg/ml,本研究选择参附黄低、中和高剂量浓度分别为1.1、3.3和10 mg/ml。在炎症模型中,模型对照组斑马鱼炎症部位中性粒细胞个数高于正常对照组(P<0.01);与模型对照组比较,吲哚美辛组和参附黄中、高剂量组斑马鱼炎症部位中性粒细胞个数降低(P<0.01);参附黄中剂量组炎症消退作用最强为44.1%。在巨噬细胞吞噬模型中,与正常对照组比较,参附黄中、高剂量组TNF-α、IL-10 mRNA表达升高,参附黄高剂量组IL-1βmRNA表达升高、ARG1 mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论参附黄方具有很好的免疫激活作用,其机制可能与降低中性粒细胞数量和调节巨噬细胞分型有关。