生地提取物对肺间质纤维化大鼠肺系数及MCP-1 mRNA表达的影响

目的检测生地提取物对肺间质纤维化模型大鼠肺系数及MCP-1 mRNA表达的影响并初步研究其作用产生的内在机理。方法博莱霉素气管内注入法复制大鼠肺间质纤维化模型。随机分为正常组、模型组、生地提取物组和甲强龙组,各组分别在造模后第3、7、28天处死总数的1/3只,取全肺称重,计算肺系数,并用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法,检测MCP-1 mRNA的表达。结果第28天生地提取物组和甲强龙组肺系数较模型组有减小趋势。MCP-1 mR-NA的表达在肺间质纤维化过程中增加,第7天时达到高峰,模型组MCP-1 mRNA的表达高于正常组(P <0. 05),第28天时已有回落。生地提取物组和甲强龙组第7天和第28天MCP-1 mRNA均有低于模型组的趋势。结论生地提取物可改善肺间质纤维化模型大鼠肺系数;生地提取物抑制肺间质纤维化过程中MCP-1mRNA的表达,从而可能延缓大鼠肺纤维化的形成。

生地黄水提液调控Wnt-5a/ROR2通路对输尿管梗阻大鼠肾纤维化的影响

目的:生地黄水提液调控Wnt-5a/ROR2通路对输尿管梗阻大鼠肾纤维化的影响。方法:将90只无特定病原体级SD大鼠,随机分为对照组(n=15)、模型组(n=15)、盐酸咪哒普利组(n=15)、生地黄水提液低剂量组(n=15)、生地黄水提液中剂量组(n=15)、生地黄水提液高剂量组(n=15),除对照组外,建立大鼠输尿管梗阻模型,造模后盐酸咪哒普利组、生地黄水提液低剂量组、生地黄水提液中剂量组、生地黄水提液高剂量组分别给0.9 g/(kg·d)盐酸咪哒普利和0.8、1.6、3.2 g/(kg·d)生地黄水提液灌胃连续2周,于实验终点确定大鼠肾脏/体重比值,采用苏木精-伊红染色法、HE染色确定各组大鼠肾脏病理水平,Masson染色确定各组大鼠肾脏纤维化水平,Western blot检测确认各组大鼠纤维化生物标志蛋白CollagenⅠ、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)表达水平及Wnt信号通路Wnt-5a、ROR2蛋白表达水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠肾脏/体重比值升高,肾脏组织炎性细胞浸润增加,病理损伤增加,纤维化水平上升,纤维化生物标志物CollagenⅠ、α-SMA、Vimentin表达水平升高、Wnt-5a、ROR2蛋白表达水平升高(P<0.01);与模型组相比,生地黄水提液给药各组大鼠炎性细胞浸润降低,病理损伤降低,纤维化水平下降,纤维化生物标志物CollagenⅠ、α-SMA、Vimentin表达水平降低、Wnt-5a、ROR2蛋白表达水平降低,且具有剂量依赖效应(P<0.01)。结论:生地黄水提液可以抑制大鼠肾脏纤维化发挥肾脏保护作用,其机制可能与抑制Wnt-5a/ROR2信号通路相关。

基于一测多评结合响应面法的生地黄质量评价研究

目的:优选生地黄环烯醚萜苷类成分的最佳提取工艺,同时建立测定4种标志性成分的一测多评方法。方法:结合单因素实验,设计响应面法试验,以梓醇、桃叶珊瑚苷、地黄苷D、益母草苷含量及干膏率为评价指标,赋予各指标权重系数,计算综合评分优化工艺;以梓醇为内参物,建立与另3种成分的相对校正因子,计算质量分数,外标法对28批药材进行验证。结果:最佳提取工艺为乙醇浓度20%、物液比1:13、提取时间20 min、提取次数为2次;建立的一测多评法准确性高,与外标法结果无统计性差异;不同批次生地黄间存在质量差异。结论:所建立的提取工艺结合一测多评的方法可为生地黄的质量评价提供科学依据。