补髓生血丸对再生障碍性贫血模型小鼠骨髓VEGF及 Notch-1蛋白表达的影响

目的:研究补髓生血丸对再生障碍性贫血模型小鼠的改善作用,并从调控骨髓造血微环境角度探讨其作用机制。方法:取昆明种雄性小鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、补髓生血丸2.3、4.5、9 g/kg组和再造生血片2.7 g/kg组,每组15只。除正常对照组外,其余各组采用白消安10 mg/kg和环磷酰胺20 mg/kg交替腹腔注射给药,连续12 d,制备再生障碍性贫血小鼠模型。造模同时各组小鼠按剂量灌胃给药,连续30 d。末次给药禁食不禁水12 h,颈椎脱臼法处死小鼠,分离双侧股骨,采用瑞士-姬姆萨法观察小鼠骨髓涂片;HE法观察骨髓病理情况;采用ELISA法检测小鼠骨髓上清中血管内皮生长因子(VEGF)、血小板生成素(TPO)、血管细胞粘附因子-1(VCAM-1)的含量;采用免疫组化法检测小鼠骨髓微血管密度(MVD)、小鼠血管VEGF和Notch-1的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠外周血红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)数量、血红蛋白(HGB)含量明显降低(P<0.05);骨髓腔空虚,大量脂肪细胞代替造血细胞,未见巨核细胞,骨髓上清中VCAM-1含量明显降低(P<0.05);骨髓MVD显著降低(P<0.01),VEGF、Notch-1蛋白表达明显下调(P<0.05);连续给药30 d后,与模型对照组比较,给药各组小鼠外周血象指标均有不同程度的升高,骨髓造血功能改善明显,骨髓可见增生现象,有核细胞逐渐增多,巨核细胞多见;再造生血片2.7 g/kg组及补髓生血丸各组骨髓上清中VCAM-1含量显著升高(P<0.01);骨髓MVD显著增加(P<0.01);除补髓生血丸2.3 g/kg组外,其余各组骨髓VEGF和Notch-1蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:补髓生血丸对再生障碍性模型小鼠有一定防治作用,其机制可能为通过增加骨髓MVD,上调VEGF和Notch1蛋白表达,促进血管新生,改善骨髓造血微环境。

生血补髓方对激素性股骨头缺血性坏死模型大鼠血清OPG、RANK、RANKL含量的影响

目的通过研究生血补髓方对激素性股骨头缺血性坏死模型大鼠血清护骨素(OPG)、核因子κB受体活化因子(RANK)及核因子κB受体活化因子配体(RANKL)含量的影响,探讨生血补髓方预防激素性股骨头缺血性坏死的作用机制。方法采用随机数字表法将40只SD大鼠分为空白组、模型组、福善美组、生血补髓方组4组,每组10只。除空白组外,其余各组大鼠通过注射大肠埃希杆菌内毒素和强的松龙建立激素性股骨头缺血性坏死模型。造模成功后,各组灌胃生理盐水及相应药物,灌胃8周后采用双抗夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血清OPG、RANK、RANKL的含量。结果与空白组比较,模型组大鼠血清RANK、RANKL含量明显升高,OPG含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,福善美组、生血补髓方组大鼠血清RANK、RANKL含量明显降低,OPG含量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论生血补髓方能调节激素性股骨头缺血性坏死模型大鼠血清OPG、RANK、RANKL的表达,抑制破骨细胞的活化,促进新骨的形成及骨修复,使骨代谢恢复平衡。