肾络通对大鼠系膜细胞外基质分泌及转化生长因子β_1表达的影响

目的探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质不同成分的抑制作用及对转化生长因子β1(TGFβ1)表达的调节作用。方法以体外培养大鼠肾小球系膜细胞及血清药理学方法为基础,采用酶联免疫吸附试验检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量;采用逆转录多聚酶链反应(RTPCR)检测TGFβ1mRNA的表达。结果细胞外基质FN,ColⅣ的含量与TGFβ1mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对二者均有抑制作用。结论肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制TGF-β1的分泌与表达,从而进一步明确了其防治多种肾小球疾病,延缓肾小球硬化的作用机制。

肾络通治疗系膜增生性肾小球肾炎的临床观察

目的:探讨肾络通治疗系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)的疗效。方法:治疗组56例,以肾络通治疗;对照组30例,以雷公藤多甙治疗。疗程为3个月。结果:治疗组完全缓解率和总有效率为25.0％和82.1％,显著高于对照组的20.0％和53.3％(P<0.05),而治疗组复发率仅8.7％,明显低于对照组的56.2％(P<0.01)。结论:说明肾络通是治疗MsPGN的有效方药之一。

肾络通对阿霉素肾病大鼠肾小管间质增殖细胞核抗原表达的影响

目的 :观察中药肾络通对单侧肾切除加重复阿霉素注射所诱导的肾小管间质纤维化大鼠增殖细胞核抗原 (PCNA)和转化生长因子 β1(TGF β1)的影响。方法 :实验动物分为病理模型组、中药治疗组、西药治疗组和假手术组 ,采用生化、放免、免疫组化、病理图像分析等方法 ,检测肾功能、肾小管间质PCNA、TGF β1的蛋白表达。结果 :中药肾络通组 2 4h尿蛋白定量、血肌酐、尿 β2 MG、尿NAG明显低于病理模型组 ,部分优于西药组。结论 :肾络通可能是通过抑制PCNA和TGF β1表达 ,保护肾功能 ,延缓肾小管间质纤维化的进展。

中药自拟方肾络通治疗以蛋白尿为主的IgA肾病临床研究

目的探讨肾络通治疗以蛋白尿为主的IgA肾病的临床疗效。方法将120例以蛋白尿为主的IgA肾病患者随机分为治疗组、对照组。在基础治疗基础上,治疗组予肾络通方,对照组予洛丁新,均治疗12个月,观察治疗前后两组疗效和中医症候积分、肾小球滤过率(GFR)、血肌酐(Scr)、24h尿蛋白定量、血浆清蛋白(ALB)等指标的变化情况。结果两组疗效比较差异有统计学意义(P<0.01),治疗后两组中医症状积分比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组治疗后24h尿蛋白定量降低、ALB升高,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较24h尿蛋白定量、ALB差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论肾络通具有改善患者症状、降低蛋白尿、保护肾功能的作用。

肾络通对肾间质纤维化实验大鼠细胞外基质的影响

目的观察肾络通对实验大鼠肾间质纤维化的拮抗作用并探讨其作用机制。方法用单侧输尿管结扎方法复制大鼠肾梗阻模型,将其随机分为缬沙坦组、肾络通组、肾络通加缬沙坦组与模型组,并设假手术组。观察梗阻侧肾脏组织形态学改变及胶原(Col)Ⅲ的表达。结果模型组及各治疗组与假手术组相比均呈现程度不同的病理损害,梗阻肾间质ColⅢ沉积明显增加(P<0·05)。各治疗组与模型组比较,ColⅢ表达明显减少(P<0·05,P<0·01)。治疗各组间比较,肾络通+缬沙坦组优于缬沙坦组(P<0·05),其他各组间均无明显差异(P>0·05)。结论输尿管梗阻后肾组织呈现程度不同的病理损害,肾间质ColⅢ沉积明显增加。肾络通及缬沙坦对其有一定的抑制作用,且肾络通与缬沙坦联合用药,其作用比单一用药更强。

肾络通对肾小管间质纤维化大鼠肾素血管紧张素系统的影响

目的 :观察肾络通对阿霉素诱导的肾小管间质纤维化大鼠肾组织肾素血管紧张素系统 (RAS)及转化生长因子 β1(TGF β1)、TGF β1mRNA表达和纤维连接蛋白 (FN)、层粘连蛋白 (LN)的影响。 方法 :采用生化、放射免疫法及免疫组织化学、原位杂交等方法观察大鼠肾功能 ,肾组织肾素活性、血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)水平及TGF β1、FN、LN的蛋白表达和TGF β1mRNA表达。 结果 :肾络通及缬沙坦组肾功能明显改善 ,肾素活性、ANGⅡ水平有所下降 ,TGF β1、FN、LN的蛋白表达及TGF β1mRNA减少。 结论 :肾络通可能通过调节RAS ,抑制TGF β1和TGF β1mRNA的表达 ,减少细胞外基质的沉积 ,减轻肾小管间质纤维化进程。

肾络通对阿霉素肾病大鼠细胞表型转化的影响

目的肾络通对阿霉素诱导的肾病大鼠细胞表型转化的影响。方法单侧肾切除加重复阿霉素尾静脉注射制作肾病模型,以αSMA、FN、LN等为观察指标,采用免疫组化、病理图像分析和流式细胞检测等方法,进行阳性表达细胞定位和半定量及蛋白表达定量分析。结果阿霉素肾病模型组大鼠肾小管间质有αSMA明显表达,阳性细胞率和蛋白表达定量分析明显高于假手术组,且伴有FN、LN在肾小管间质和肾小球的大量沉积,肾络通组各项指标较模型组为低。结论肾络通能抑制肾小管上皮细胞表型转化,减少FN、LN等细胞外基质的沉积。

肾络通对系膜增生性肾小球肾炎大鼠血脂代谢及肿瘤坏死因子表达的影响

探讨中成药肾络通胶囊对实验性系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)的血脂代谢及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。采用改良的慢性血清病性Ms PGN模型,检测血清TC、TG、HDL、LDL及采用免疫组织化学法和逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测TNF-α及TNF-αmRNA的表达并进行半定量分析。结果显示两治疗组血清TC、TG、LDL明显降低(P<0.01,P<0.05),HDL则显著升高(P<0.01)。肾络通组TC略高于雷公藤多甙组,TG、HDL略低于雷公藤多甙组,LDL与雷公藤多甙组相等,但两治疗组相比无统计学意义(P>0.05)。肾组织中TNF-α免疫组化及RT-PCR结果显示肾络通可有效下调TNF-α及TNF-αmRNA的表达,与模型组相比有显著差异(P<0.01,P<0.05),肾络通组与雷公藤多甙组相比,二者无统计学意义(P>0.05)。从以上结果说明肾络通能够有效改善高血脂,抑制肾小球分泌TNF-α及下调TNF-αmRNA的表达,延缓疾病进展。

肾络通对肾间质纤维化实验大鼠Ⅲ型胶原及转化生长因子-β_1的影响

目的观察肾络通对实验大鼠肾间质纤维化的拮抗作用并探讨其作用机制。方法选择健康、雌性SD大鼠50只,采用单侧输尿管结扎诱导的大鼠肾间质纤维化模型,将其随机分为缬沙坦组、肾络通组、肾络通加缬沙坦组与模型组,并设假手术组。观察实验大鼠梗阻侧肾脏组织形态学改变及ColⅢ、TGF-β1蛋白及其mRNA的表达。结果模型组及各治疗组与假手术组相比均呈现程度不同的病理损害。ColⅢ蛋白的沉积:阳性面积、积分光密度5组间比较差异均有显著性意义(P<0.01),各治疗组与模型组比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。TGF-β1蛋白及其mRNA的表达、分布及半定量分析结果:5组间比较差异均有显著性意义(P<0.01),各治疗组与模型组比较,TGF-β1的表达间差异均有显著性意义(P<0.05)。结论输尿管梗阻后肾组织呈现程度不同的病理损害,肾间质ColⅢ沉积明显增加,这可能与TGF-β1蛋白及其mRNA的表达增加有关。肾络通及缬沙坦对其有一定的抑制作用,且肾络通与缬沙坦联合用药的作用比单一用药更强。

中药自拟方肾络通治疗以蛋白尿为主的IgA肾病临床研究

目的探讨肾络通治疗以蛋白尿为主的IgA肾病的临床疗效。方法将120例以蛋白尿为主的IgA肾病患者随机分为治疗组、对照组。在基础治疗基础上,治疗组予肾络通方,对照组予洛丁新,均治疗12个月,观察治疗前后两组疗效和中医症候积分、肾小球滤过率(GFR)、血肌酐(Scr)、24h尿蛋白定量、血浆清蛋白(ALB)等指标的变化情况。结果两组疗效比较差异有统计学意义(P<0.01),治疗后两组中医症状积分比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组治疗后24h尿蛋白定量降低、ALB升高,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较24h尿蛋白定量、ALB差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论肾络通具有改善患者症状、降低蛋白尿、保护肾功能的作用。

肾络通胶囊的工艺路线确定及质量标准研究

目的确定肾络通胶囊主要的工艺参数并对其质量标准进行研究。方法以2015版药典为依据,并广泛参考其他相关文献,研究肾络通胶囊的制剂工艺及质量标准。工艺方面通过正交试验,以干浸膏得率为评价指标,优化最佳提取工艺条件,确立制剂工艺。质量标准方面:研究处方中主要药味的定性鉴别、君药黄芪的有效成分含量测定,建立有效、可控的质量标准。结果粉碎工艺:将7/10处方量蝉蜕、1/2处方量僵蚕、1/2处方量乌鞘蛇、1/2处方量地龙烘干研细,过60目筛;提取工艺:提取2次,第1次提取1 h,第2次提取30 min,由于加水倍数对干浸膏得率影响较小,因此第1次提取加水10倍,第2次加水8倍。质量标准研究:建立肾络通胶囊中黄芪、丹参、川芎、地龙、僵蚕五味药的薄层色谱鉴别方法,应用HPLC建立了成品中黄芪甲苷的含量测定方法。结论肾络通胶囊工艺参数明确,制备工艺合理;建立的质量标准能准确地进行定性、定量检测,可对产品质量进行有效控制。

郭恩绵多途径治疗慢性肾衰竭

郭恩绵教授将慢性肾衰竭命名为"虚劳水气病",认为是由外感风寒、风热,疮毒,水湿;或饮食不调,或先天不足,或后天失养,或久病耗伤脾肾所致之水气病日久不复,耗伤气血,导致脏腑、气血阴阳俱虚的虚劳证。为脾肾两虚,湿毒浊邪内蕴,普遍存在瘀血阻络;可分为标本两端,脾肾两虚,气血阴阳皆亏为本,瘀血阻络,湿毒浊邪内蕴为标,为本虚标实之证。以攻为主,祛邪为先,主张祛邪之剂不宜过度峻猛,也不宜过分柔和,补益脾肾,解毒化浊,活血通络,扶正祛邪不忘活血化瘀通络,不必有明显血瘀之证才活血化瘀,应早期长期应用;采用"口服化浊,灌肠泄浊,药浴散浊,敷脐驱浊"等多种途径治疗慢性肾衰竭,自拟肾衰饮(黄芪、白术、太子参、砂仁、白蔻、藿香、佩兰、山茱萸、大黄、车前子、泽泻、菟丝子、丹参等)内服,精选大黄、附子、红花和白头翁组成"降氮煎剂"灌肠;取麻黄、桂枝、羌活、独活、丹参、防风、艾叶、土茯苓、地肤子、白鲜皮等药浴;灸法和药物敷脐由经络循行速达病所,用于湿毒浊邪壅滞三焦,呕恶较剧,药食难入者,疏通经络、通达脏腑、扶正祛邪、调理阴阳。

肾络通对阿霉素诱导的肾病大鼠TGF-β_1、TGF-β_1 mRNA及c-fos表达的影响

目的:观察中药肾络通对肾小管-间质纤维化大鼠TGF-β1、TGF-β1 mRNA及c-fos基因表达的影响。方法:建立单侧肾切除加重复阿霉素注射所诱导的肾病模型,采用病理形态学、免疫组化、原位杂交、流式细胞仪检测等方法,观察TGF-β1、TGF-β1 mRNA及c-fos基因表达特点及肾络通的影响。结果:模型组呈强阳性表达,肾络通组较模型组明显减弱。结论:活血化瘀中药肾络通能够抑制TGF-β1、TGF-β1 mRNA及c-fos基因表达,减轻肾小管间质纤维化,减缓慢性肾功能衰竭的进展。

慢性肾脏病“肾络瘀阻”理论探讨及机制研究

慢性肾脏病本虚标实,病情复杂,赵玉庸教授总结多年临床经验,运用络病理论,提出慢性肾脏病“肾络瘀阻”病机学说,以益气活血通络为法,创立“肾络通”方剂,取得很好临床疗效。文章从理论探讨、方药确立、临床应用及机制研究等角度进行阐述。

肾络通对肾间质纤维化实验大鼠病理及基质金属蛋白酶系统的影响

目的观察肾络通对实验大鼠肾间质纤维化的拮抗作用并探讨其作用机理。方法用单侧输尿管结扎方法复制大鼠肾梗阻模型,将其随机分为缬沙坦组、肾络通组、肾络通加缬沙坦组与模型组,并设假手术组。观察梗阻侧肾脏组织形态学改变、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在蛋白及基因水平的表达并与假手术组比较。结果模型组及各治疗组与假手术组比较均呈现程度不同的病理损害,MMP-1、TIMP-1表达均有显著增高(P<0.05),且TIMP-1表达明显高于MMP-1表达。各治疗组与模型组比较,MMP-1表达无明显差异(P>0.05),TIMP-1表达却明显减少(P<0.05)。治疗各组间比较,TIMP-1表达肾络通加缬沙坦组明显低于缬沙坦组(P<0.05),其他组间均无明显差异(P>0.05)。结论输尿管梗阻后肾组织呈现程度不同的病理损害,可能与MMP-1/TIMP-1表达明显失衡有关。肾络通及缬沙坦对其有一定的抑制作用,且肾络通与缬沙坦联合用药,其作用比单一用药更强。

肾络通对5/6肾切除肾衰竭大鼠残余肾组织PAI-1蛋白表达的影响

目的观察肾络通对5/6肾切除肾衰竭大鼠残余肾组织纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)蛋白表达的影响。方法5/6肾切除制备肾衰竭大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、肾络通组和缬沙坦组,分别灌胃给药16周取材,应用蛋白质印迹法检测肾组织PAI-1蛋白的表达。结果模型组与假手术组相比,PAI-1蛋白的表达明显增高(P<0.01);肾络通组PAI-1蛋白表达较模型组显著降低(P<0.05),与缬沙坦组比较无明显差异。结论肾络通可下调慢性进展性纤维化肾组织PAI-1蛋白表达,改善纤溶系统的失衡,延缓5/6肾切除肾衰大鼠的病程进展。

肾络通煎剂对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化的影响

目的探讨肾络通煎剂对梗阻性肾病大鼠血清醛固酮、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、α平滑肌激动蛋白(α-smooth muscle protein,α-SMA)、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)表达的影响,探讨肾络通煎剂改善肾间质纤维化的初步机制。方法将48只健康Wistar大鼠随机分为假手术组(12只)、造模组(36只)。先采用单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)手术复制肾间质纤维化模型,再将造模成功大鼠随机分为模型组、西药组和中药组,每组12只。西药组(依普利酮)按照100 mg/(kg·d)剂量加入饲料中,中药组按照26 g/(kg·d)的剂量入水瓶饮用,假手术组和模型组给予等量生理盐水饮用,每天1次。给药10天后摘取梗阻侧肾脏,观察肾脏病理形态学,检测血清醛固酮、MCP-1含量,肾组织MCP-1、α-SMA、NF-κB mRNA或蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠肾组织中大量炎性细胞浸润,胶原沉积显著增加,血清醛固酮及MCP-1含量显著升高(P<0.01),MCP-1核酸和蛋白表达水平明显上调(P<0.01),α-SMA及NF-κB蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较,西药组及中药组炎性细胞浸润及胶原沉积均减轻,血清MCP-1含量降低,MCP-1 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.01),α-SMA及NF-κB蛋白表达水平明显降低(P<0.01),同时,中药组血清醛固酮含量减少(P<0.01)。结论梗阻性肾病模型鼠肾组织炎症损伤可促进肾间质纤维化。肾络通煎剂可通过减少血清醛固酮及MCP-1含量,下调肾组织MCP-1、NF-κB表达,抑制α-SMA表达,减轻肾间质纤维化。

肾络通对肾间质纤维化模型小鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的探讨肾络通治疗肾间质纤维化的可能作用机制。方法纯系C57BL/6J野生小鼠(WT)及肾上腺髓质素基因敲除杂合子小鼠(AMKO)随机分为假手术组、模型组、依普利酮组及肾络通组,每组5只。除假手术组外,其余各组结扎左侧输尿管复制肾间质纤维化小鼠模型。依普利酮组给予依普利酮100 mg/(kg·d)加入饲料喂养,肾络通组给予肾络通溶液26 g/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予蒸馏水0.3 ml灌胃,共10天。HE、Masson染色观察各组小鼠梗阻侧肾组织病理改变;免疫组化法及Western Blot法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肾上腺髓质素(ADM)的表达;检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平。结果 WT及AMKO小鼠各组血Scr和BUN含量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。肾脏病理结果显示,模型组肾小管扩张、上皮细胞坏死,肾间质大量炎性细胞浸润,胶原组织沉积显著增多,依普利酮组和肾络通组可明显抑制间质炎性细胞浸润及胶原沉积。与本鼠种假手术组比较,WT模型组和AMKO模型组α-SMA、TGF-β1表达明显升高,而ADM表达明显降低(P<0.01)。与本鼠种模型组比较,依普利酮组和肾络通组α-SMA、TGF-β1表达明显降低,而ADM表达明显升高(P<0.05或P<0.01)。两鼠种之间比较,AMKO假手术组、模型组、依普利酮组、肾络通组ADM表达均低于相应的WT小鼠组(P<0.05或P<0.01)。结论肾络通可能通过上调ADM表达,降低α-SMA、TGF-β1表达,从而抑制肾小管上皮细胞表型转化,减轻了肾脏病理损伤。

肾络通汤对慢性肾小球肾炎患者TGF-β_1,MMP-9和TMP-1因子的影响

目的:观察肾络通汤治疗慢性肾小球肾炎气虚血瘀证的临床疗效,并从抗炎和抗纤维化方面探讨其作用机制。方法:将140例慢性肾小球肾炎患者,采用分层区组,随机按数字表法分为对照组和观察组。对照组给予双嘧达莫片,50 mg/次,3次/d,口服;盐酸贝那普利片,10 mg/次,1次/d,口服。血脂异常者加用阿托伐他汀钙片,20 mg/次,1次/d,晚餐后口服。观察组西医处理措施同对照组,并加用肾络通汤,1剂/d。两组均连续服用16周。进行24 h尿蛋白定量(24 h UPR),血清白蛋白(ALB),肌酐(SCr),尿素氮(BUN)和尿常规检查,并计算肾小球滤过率(GFR);进行气虚血瘀证评分;检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),IL-1β,Ⅰ型前胶原(PCⅠ),Ⅲ型前胶原(PCⅢ),透明质酸(HA)和层黏连蛋白(LN),转化生长因子-β1(TGF-β1),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TMP-1)水平;治疗前后各检测1次。结果:观察组临床疗效有效率为87.69%,高于对照组的73.02%,(χ~2=4.384,P<0.05);观察组中医证候疗效总有效率为90.77%,高于对照组的74.6%(χ~2=5.874,P<0.05);治疗后观察组24 h UPR,SCr,BUN,尿红细胞均低于对照组,ALB高于对照组(P<0.05,P<0.01);治疗后观察组GFR较治疗前升高(P<0.01),并高于治疗后对照组(P<0.05);治疗后观察组血清TNF-α,IL-6和IL-1β水平均低于对照组(P<0.01);治疗后观察组患者血清PCⅠ,PCⅢ,HA和LN水平均低于对照组(P<0.01);治疗后观察组患者血清TGF-β1和TMP-1水平均低于对照组(P<0.01),MMP-9和MMP-9/TMP-1均高于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:肾络通汤治疗CGN气虚血瘀证患者能减轻患者的蛋白尿,改善肾功能,提高血清白蛋白,减轻临床症状,提高疾病疗效和中医证候疗效,其作用机制可能与减轻炎症反应,调节TGF-β1,MMP-9和TMP-1等因子,抑制肾纤维化有关。