基于NLRP3/Caspase-1信号通路探讨参芪健心方对慢性心力衰竭模型大鼠心肌细胞焦亡的影响

目的 从细胞焦亡角度探讨参芪健心方治疗慢性心力衰竭的可能作用机制。方法 将52只大鼠随机分为假手术组8只和造模组44只,造模组大鼠结扎左冠状动脉前降支构建慢性心力衰竭大鼠模型。将造模成功的40只大鼠随机分为模型组、沙库巴曲缬沙坦组、参芪健心方组、MCC950组及参芪健心方+MCC950组,每组8只。参芪健心方组予参芪健心方药液7.4 g/(kg·d)灌胃;沙库巴曲缬沙坦组予沙库巴曲缬沙坦混悬液68 mg/(kg·d)灌胃;MCC950组予以腹腔注射MCC950 10 mg/kg,隔日1次;参芪健心方+MCC950组予参芪健心方7.4 g/(kg·d)灌胃,再腹腔注射MCC950 10 mg/kg隔日1次;假手术组和模型组予生理盐水10 ml/(kg·d)灌胃。各组连续干预3周后,ELISA法检测大鼠血清脑B型钠尿肽(BNP)、肌酸激酶同工酶MB (CK-MB)、白细胞介素1β (IL-1β)、白细胞介素18 (IL-18)水平;HE染色、MASSON染色观察大鼠心肌病理改变。除沙库巴曲缬沙坦组外,Western blot法检测各组大鼠心肌NOD样受体蛋白3 (NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)蛋白表达,RT-PCR法检测NLRP3、Caspase-1mRNA的表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠HE染色示心肌损伤明显,MASSON染色示胶原纤维化面积增大,血清BNP、CK-MB、IL-1β、IL-18含量,心肌组织NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达及NLRP3、Caspase-1 mRNA表达均升高(P<0.05)。与模型组比较,参芪健心方组、沙库巴曲缬沙坦组、MCC950组及参芪健心方+MCC950组大鼠心肌细胞损伤减轻,胶原纤维化面积减小,血清BNP、CK-MB、IL-1β、IL-18含量均降低;除沙库巴曲缬沙坦组未检测外,其余三个干预组心肌组织NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达及NLRP3、Caspase-1 mRNA表达均降低(P<0.05)。与参芪健心方组比较,MCC950组、参芪健心方+MCC950组血清IL-1β、IL-18含量减少,胶原纤维化面积减小,心肌组织NLPR3、Caspase-1蛋白表达及Caspase-1mRNA表达均降低,参芪健心方+MCC950组ASC蛋白、NLRP3 mRNA表达亦降低(P<0.05);与MCC950组比较,参芪健心方+MCC950组血清IL-18水平下降,胶原纤维化面积减小,NLRP3、Caspase-1 mRNA表达降低(P<0.05)。结论 参芪健心方能够有效改善慢性心力衰竭模型大鼠心肌损伤,其机制可能与其通过NLRP3/Caspase-1通路抑制心肌细胞焦亡,减轻心肌内炎症水平有关,且MCC950联合参芪健心方能更有效抑制心肌细胞焦亡,治疗效果优于单一MCC950和参芪健心方。