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术前血清Lp-PLA2与NLRP3水平对IABP辅助PCI治疗的高危冠心病患者发生MACE的预测价值
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作者 王涛 邹永辉 杨蕾 《医学临床研究》 CAS 2024年第5期700-703,共4页
【目的】探讨术前血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)与核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)水平对主动脉内球囊反搏(IABP)辅助经皮冠状动脉介入治疗(PCI)高危冠心病患者发生心血管不良事件(MACE)的预测价值。【方法】选取本院收治... 【目的】探讨术前血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)与核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)水平对主动脉内球囊反搏(IABP)辅助经皮冠状动脉介入治疗(PCI)高危冠心病患者发生心血管不良事件(MACE)的预测价值。【方法】选取本院收治的120例高危冠心病患者,所有患者均行IABP辅助PCI治疗。统计术后6个月内MACE发生情况,分为非MACE组和MACE组,比较两组术前血清Lp-PLA2、NLRP3水平,分析术前血清Lp-PLA2、NLRP3水平与冠脉狭窄程度的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析术前血清Lp-PLA2、NLRP3水平预测术后发生MACE的价值。【结果】120例IABP辅助PCI术后高危冠心病患者MACE发生率为34.17%(41/120);MACE组术前血清Lp-PLA2、NLRP3水平均高于非MACE组(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,术前血清Lp-PLA2、NLRP3水平与冠脉狭窄程度呈正相关(r_(s)=0.750、0.815,均P<0.05)。重度患者术前血清Lp-PLA2、NLRP3水平高于中度、轻度患者,中度患者高于轻度患者(P<0.05)。ROC曲线分析显示,术前血清Lp-PLA2、NLRP3水平单独预测的曲线下面积分别为0.770、0.844,二者联合预测AUC为0.909(P<0.05)。【结论】术前血清Lp-PLA2、NLRP3水平与高危冠心病患者冠脉狭窄程度呈正相关,二者联合检测可为临床预测高危冠心病患者IABP辅助PCI手术治疗后发生MACE提供一定参考依据。 展开更多
关键词 冠心病 1-烷基-2-乙酰甘油磷酸胆碱酯酶/血液 NLR家族 热蛋白结构域包含蛋白3/血液 经皮冠状动脉介入治疗
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利用小泛素蛋白修饰分子融合技术在大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组抗菌肽LLv
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作者 殷文霞 王为栋 +4 位作者 刘晓东 邵坤 单虎 张洪亮 王述柏 《青岛农业大学学报(自然科学版)》 2023年第4期265-269,共5页
为了研究在大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)中利用小分子泛素蛋白(small ubiquitin-like modifier,SUMO)融合技术表达重组抗菌肽LLv(antimicrobial peptide LLv)的方法。试验以天然抗菌肽LL-37氨基酸组成及分子结构为依据,人工设计了LLv的氨... 为了研究在大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)中利用小分子泛素蛋白(small ubiquitin-like modifier,SUMO)融合技术表达重组抗菌肽LLv(antimicrobial peptide LLv)的方法。试验以天然抗菌肽LL-37氨基酸组成及分子结构为依据,人工设计了LLv的氨基酸序列和基因序列。利用SUMO融合技术,构建重组大肠杆菌表达载体pSUMO-LLv在E.coli BL21(DE3)中表达SUMO-LLv,并研究异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl beta-D-thiogalacyranoside,IPTG)浓度和诱导时间对融合蛋白SUMO-LLv表达的影响,同时分析融合蛋白SUMO-LLv表达的可溶性并分离纯化目的蛋白LLv。结果表明:建立的E.coli BL21(DE3)的pSUMO-LLv重组表达载体,经DNA测序验证构建正确;SUMO-LLv的诱导表达最佳条件是IPTG浓度0.5 mmol/L,诱导表达时间为2 h;融合蛋白SUMO-LLv主要存在于菌液上清液中,表达含量为11.34μg/mL;免疫印迹试验(Western blot)鉴定证明融合蛋白具有良好的反应原性;采用Ni柱亲和层析法在诱导菌液中成功纯化到了目的蛋白LLv,大小为5 kDa。说明在E.coli BL21(DE3)中利用SUMO融合技术表达重组抗菌肽LLv的方法可行。 展开更多
关键词 LLv SUMO 融合蛋白 诱导表达 E.coli bl21(DE3)
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NLRP3基因敲减对高脂高糖饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎小鼠模型的影响
3
作者 黄倩 王卓媛 +5 位作者 安梓铭 辛鑫 孙沁梅 苟小军 胡义扬 冯琴 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期952-960,共9页
目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)基因敲减对高脂高糖诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠模型的影响。方法将44只小鼠随机分为正常饮食组(CON)20只,高脂高糖造模组(HFHC)24只。造模14周末,随机选取4只HFHC组小鼠进行腺... 目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)基因敲减对高脂高糖诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠模型的影响。方法将44只小鼠随机分为正常饮食组(CON)20只,高脂高糖造模组(HFHC)24只。造模14周末,随机选取4只HFHC组小鼠进行腺相关病毒9(AAV9)尾静脉注射预实验,4周后验证NLRP3敲减模型是否成功。18周末确认敲减成功后,对剩余40只小鼠进行AAV9一次性尾静脉注射,分为CON+NLRP3敲减阴性对照组(CON+NLRP3-NC)、CON+NLRP3敲减组(CON+NLRP3-KD)、HFHC+NLRP3-NC及HHFHC+NLRP3-KD组,每组10只,继续造模6周。24周末取材观察炎症小体活化效应,检测小鼠体质量、肝质量、肝指数及糖代谢(空腹血糖、空腹胰岛素及HOMA-IR指数)指标;检测小鼠肝脂质含量(肝组织TG及油红O染色)、肝脏炎症(血清ALT活性、HE染色及炎症相关基因)及肝纤维化(天狼星红染色及纤维化相关基因)指标。计量资料多组间比较使用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与CON+NLRP3-NC组相比,Western Blot结果提示,HFHC+NLRP3-NC组的NLRP3、pro-Caspase1、Caspase1、ASC及IL-1β蛋白水平均升高,HFHC+NLRP3-KD组均降低(P值均<0.05);HFHC+NLRP3-NC组小鼠体质量、肝质量、肝指数及糖代谢指标均有不同程度升高,HFHC+NLRP3-KD组均显著改善(P值均<0.05);在肝脂肪沉积方面,与CON+NLRP3-NC组相比,HFHC+NLRP3-NC组肝脏TG明显增高,油红O染色显示大量红色脂滴,HFHC+NLRP3-KD组肝脏TG及肝脂滴数量显著减少(P值均<0.01);在肝脏炎症方面,HFHC+NLRP3-NC组血清ALT,非酒精性脂肪性肝病活动度(NAS)评分及炎症相关基因均较CON+NLRP3-NC组明显升高,HFHC+NLRP3-KD组均明显降低(P值均<0.01);在肝纤维化方面,HFHC+NLRP3-NC组肝胶原纤维面积以及纤维化相关基因均较CON+NLRP3-NC组明显升高,HFHC+NLRP3-KD组纤维化相关基因均明显降低(P值均<0.05),胶原纤维面积虽有降低趋势但差异无统计学意义(P>0.05)。结论NLRP3基因敲减可显著改善高脂高糖饮食诱导的NASH小鼠模型肝脂肪沉积及炎症。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 NLR家族 热蛋白结构域包含蛋白3 膳食 高脂 炎症 小鼠 近交C57bl
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Photometric Monitoring of Blazar 3C 66A with the Yunnan University Astronomical Observatory 1 m Telescope
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作者 Wei Zeng Tao Wen +4 位作者 Zhen-Lu Gong Shi Chen Fan Wu Hao-Yang Zhang Ben-Zhong Dai 《Research in Astronomy and Astrophysics》 SCIE CAS CSCD 2023年第4期148-163,共16页
3C 66A is one of our first batches of photometric monitoring objects with the 1 m optical telescope at Yunnan University Astronomical Observatory.In the present work,the observational campaign was performed from 2021 ... 3C 66A is one of our first batches of photometric monitoring objects with the 1 m optical telescope at Yunnan University Astronomical Observatory.In the present work,the observational campaign was performed from 2021 November 1 to 2022 February 27 in the Johnson-Morgan system V and R bands.The average magnitudes in each band were■=15.52±0.18 mag and■=15.07±0.17 mag.The overall variability amplitudes wereΔV=■,Amp=70.27%andΔR=■,Amp=68.56%,respectively.Most of the intraday variabilities(IDVs)occurred in 2021 December and 2022 February.The minimal rise/decay timescale was about 6 minutes(5.82±2.74 minutes and 6.18±2.81 minutes on 2022 February 11,6.99±3.70 minutes and 6.17±2.91 minutes on 2022 February 12).Durations of these rapid variabilities were from 11.99 to 179.67 minutes.The discrete correlation function analyses between V and R bands showed significantly correlated variability.Color index analysis of ID Vs showed that the spectrums do not change with variabilities. 展开更多
关键词 (galaxies:)bl Lacertae objects individual(3C 66A)-galaxies photometry-galaxies active
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Chemerin、Gal-3、Visfatin与房颤患者首次导管射频消融术后复发的相关性
5
作者 张莉侠 董锦丽 《医学临床研究》 CAS 2024年第1期18-21,共4页
【目的】探讨血清半乳糖凝集素3(Gal-3)、内脂素(Visfatin)、趋化素(Chemerin)水平与房颤患者首次导管射频消融术后复发的相关性。【方法】选取2019年8月至2021年8月本院收治的184例房颤患者,所有患者入院后均行射频消融术治疗,根据术后... 【目的】探讨血清半乳糖凝集素3(Gal-3)、内脂素(Visfatin)、趋化素(Chemerin)水平与房颤患者首次导管射频消融术后复发的相关性。【方法】选取2019年8月至2021年8月本院收治的184例房颤患者,所有患者入院后均行射频消融术治疗,根据术后6个月内是否复发将其分为复发组(n=53)和未复发组(n=131)。比较两组临床资料及术前、术后1个月血清Chemerin、Gal-3、Visfatin水平,分析术后1个月上述指标与房颤术后复发的相关性及预测价值。【结果】复发组患者合并高血压、冠心病所占比例及左房容积指数(LAVI)高于未复发组,左心室射血分数(LVEF)低于未复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。复发组术前、术后1个月血清Gal-3、Visfatin、Chemerin水平均高于未复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,术后1个月血清Gal-3、Visfatin、Chemerin高水平为术后房颤复发的独立危险因素(P<0.05)。Gal-3、Visfatin、Chemerin高水平患者术后房颤复发风险分别为低水平患者的4.076倍、2.847倍、6.272倍(P<0.05)。【结论】血清Gal-3、Visfatin、Chemerin与房颤患者首次射频消融术后复发密切相关,可早期预测患者术后复发风险,有助于临床医师针对性制定治疗方案,降低复发率。 展开更多
关键词 心房颤动/外科学 半乳糖凝集素3/血液 烟酰胺磷酸核糖基转移酶/血液 导管消融术
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Endocan与Galectin-3在微血管性心绞痛患者血清中的表达及其诊断价值
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作者 陈敬 王永强 刘猛 《医学临床研究》 CAS 2024年第7期1041-1043,1047,共4页
【目的】探讨内皮细胞特异分子-1(Endocan)与半乳糖凝集素-3(Galectin-3)在微血管性心绞痛(CMSA)患者血清中的表达及其诊断价值。【方法】延津县人民医院收治的87例CMSA患者作为观察组,另选取院内同期体检的87例健康者作为对照组,比较... 【目的】探讨内皮细胞特异分子-1(Endocan)与半乳糖凝集素-3(Galectin-3)在微血管性心绞痛(CMSA)患者血清中的表达及其诊断价值。【方法】延津县人民医院收治的87例CMSA患者作为观察组,另选取院内同期体检的87例健康者作为对照组,比较两组的临床资料和血清Endocan与Galectin-3表达水平。采用Logistic多因素回归分析CMSA的影响因素;以受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评估血清Endocan与Galectin-3水平对CMSA的诊断价值。【结果】观察组糖尿病、高血压占比及空腹血糖、血清Endocan、Galectin-3水平均高于对照组(P<0.05)。Logistic多因素回归分析结果显示,糖尿病、高血压、空腹血糖及血清Endocan、Galectin-3表达水平升高均为CMSA的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清Endocan、Galectin-3水平单一及联合检测诊断CMSA的AUC分别为0.731、0.785和0.891。【结论】CMSA患者血清Endocan与Galectin-3均存在高表达,且血清Endocan与Galectin-3在CMSA诊断中的效能较高。 展开更多
关键词 微血管性心绞痛 半乳糖凝集素3/血液
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L-3-正丁苯酞对实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用及其机制
7
作者 韩红霞 张晋欣 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第2期184-191,共8页
目的 基于RhoA/ROCK信号通路探讨L-3-正丁苯酞(L-3-n-butylphthalide, NBP)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)小鼠的疗效及潜在机制。方法 32只雌性C57BL/6小鼠随机分为4组:对照组、EAE组、... 目的 基于RhoA/ROCK信号通路探讨L-3-正丁苯酞(L-3-n-butylphthalide, NBP)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)小鼠的疗效及潜在机制。方法 32只雌性C57BL/6小鼠随机分为4组:对照组、EAE组、NBP低剂量组(L-NBP)和NBP高剂量组(H-NBP),每组8只。使用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55, MOG35-55)作为抗原乳剂免疫诱导C57BL/6小鼠建立EAE模型。EAE模型制作成功后,L-NBP组和H-NBP组分别以3.25,6.5 mg/(kg·d)NBP腹腔注射,连续28 d。免疫当日起,每7 d记录各组小鼠的体质量,每天进行神经功能障碍评分;对脊髓组织进行HE染色和劳克坚牢蓝(Luxol fast blue, LFB)染色,观察病理改变;使用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测外周血白细胞介素-10(IL-10)、IL-1β、IL-6和IL-18含量;real time-PCR检测脊髓组织炎症相关因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、TNF受体1(TNFR1)、IL-1β的表达;Western blot检测RhoA、ROCKⅠ及ROCKⅡ蛋白表达情况。结果 与对照组相比,EAE组小鼠体质量下降,神经功能障碍评分、组织病理学评分升高,IL-10含量降低,IL-18、IL-6和IL-1β含量增加,TNF-α、TNFR1及IL-1β mRNA表达升高,RhoA、ROCKⅠ及ROCKⅡ蛋白表达增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与EAE组相比,L-NBP和H-NBP组小鼠体质量增加,发病潜伏期延长,高峰期延迟,神经功能障碍评分、组织病理学评分降低,IL-10含量增高,IL-1β、IL-6和IL-18含量降低,TNF-α、TNFR1及IL-1β mRNA表达降低,RhoA、ROCKⅠ和ROCKⅡ蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与L-NBP组相比,H-NBP组小鼠体质量增加,发病潜伏期延长,高峰期延迟,神经功能障碍评分、组织病理学评分降低,IL-10含量增高,IL-1β、IL-6和IL-18含量降低,TNF-α、TNFR1和IL-1β mRNA表达降低,RhoA和ROCKⅡ蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NBP能够减轻EAE小鼠外周及中枢炎症反应,进而改善EAE的神经障碍症状,其作用机制可能是通过抑制RhoA/ROCK信号通路来实现的。 展开更多
关键词 L-3-正丁苯酞 多发性硬化 自身免疫性脑脊髓炎 RhoA/ROCK信号通路 神经炎症 C57bl/6小鼠
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Glu-1和Glu-3等位变异及1BL/1RS易位与面包和面条品质关系的研究 被引量:26
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作者 刘丽 周阳 +2 位作者 刘建军 何中虎 杨金 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1265-1273,共9页
高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)和低分子量麦谷蛋白亚基(LMW-GS)组成和1BL/1RS易位是决定小麦加工品质的关键因素。将试验Ⅰ80份和试验Ⅱ78份国内外小麦品种分别在2种和4种环境条件下种植,研究了HMW-GS和LMW-GS的组成及1BL/1RS易位对面... 高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)和低分子量麦谷蛋白亚基(LMW-GS)组成和1BL/1RS易位是决定小麦加工品质的关键因素。将试验Ⅰ80份和试验Ⅱ78份国内外小麦品种分别在2种和4种环境条件下种植,研究了HMW-GS和LMW-GS的组成及1BL/1RS易位对面团流变学特性、面包和面条品质的影响。结果表明,Glu-B1、Glu-D1和Glu-B3位点对面团流变学特性、面包和面条品质的效应较大,而Glu-A3位点的效应较小。单个亚基对面筋强度和面包体积的贡献大小为,在Glu-A1位点,1>2*>N;在Glu-B1位点,7+8>7+9;在Glu-D1位点,5+10>4+12>2+12;在Glu-A3位点,Glu-A3d>Glu-A3c>Glu-A3a;在Glu-B3位点,Glu-B3d>Glu-B3f>Glu-B3b>Glu-B3j。单个亚基对延伸性和面条评分的贡献大小为,在Glu-A1位点,1>N;在Glu-B1位点,20>7+9>7+8;在Glu-D1位点,4+12>5+10≥2+12;在Glu-A3位点,Glu-A3c≥Glu-A3d>Glu-A3a;在Glu-B3位点,Glu-B3b≥Glu-B3f>Glu-B3d>Glu-B3j。1BL/1RS易位对面团流变学特性、面包和面条品质皆有极显著的负面影响。 展开更多
关键词 GLU-1 Glu-3 等位变异 1bl/1RS易位 面包 面条 品质 小麦
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用Glu-B3、Gli-B1和SEC-1b复合引物PCR检测普通小麦1BL/1RS易位系 被引量:23
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作者 张立平 何中虎 +4 位作者 陆美琴 庞斌双 张学勇 夏兰琴 Frank Ellison 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1566-1570,共5页
利用低分子量 (LMW )麦谷蛋白Glu B3的STS PCR标记、醇溶蛋白Gli B1的SSR标记和黑麦碱SEC 1b的STS PCR标记的复合PCR ,对 10个普通小麦品种、中优 950 7/CA963 2的 91个DH系和 2 8个F2 个体植株 ,进行了1BL/1RS易位系的检测。结果表明 ... 利用低分子量 (LMW )麦谷蛋白Glu B3的STS PCR标记、醇溶蛋白Gli B1的SSR标记和黑麦碱SEC 1b的STS PCR标记的复合PCR ,对 10个普通小麦品种、中优 950 7/CA963 2的 91个DH系和 2 8个F2 个体植株 ,进行了1BL/1RS易位系的检测。结果表明 ,中优 950 7/CA963 2的 3 9个DH系和CA963 2、晋麦 45、兰考 2 4、烟农 18、京冬 8等5个品种缺失 2个小麦贮藏蛋白位点的PCR产物 ,而拥有黑麦碱的PCR产物。利用PAGE和ELISA方法 ,对上述品种 (系 )进行了黑麦碱 (secalin)蛋白的检测 ,发现这些品种 (系 )均包含secalin ,与分子标记的检测结果吻合 ,是 1BL/1RS易位系。对 2 8个F2 单株的检测表明 ,该复合标记可以检测出早代 展开更多
关键词 Glu-B3 Gli-B1 SEC-1b复合引物 PCR检测 小麦 1bl/1RS易位系 低分子量
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柯萨奇病毒B3诱导的病毒性心肌炎C57BL/6J小鼠模型的建立 被引量:7
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作者 赵小建 张洁钰 +4 位作者 杨帆 王丽 张真真 唐琳 赵洛沙 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第2期212-217,共6页
目的:建立由柯萨奇病毒B3(CVB3)Nancy株诱导的病毒性心肌炎(VMC)C57BL/6J小鼠模型。方法:4周龄、6周龄C57BL/6J小鼠各50只,每个年龄组随机选取15只作为对照(腹腔注射PBS),剩余35只腹腔接种含CVB3 Nancy株的病毒悬液(1×10^... 目的:建立由柯萨奇病毒B3(CVB3)Nancy株诱导的病毒性心肌炎(VMC)C57BL/6J小鼠模型。方法:4周龄、6周龄C57BL/6J小鼠各50只,每个年龄组随机选取15只作为对照(腹腔注射PBS),剩余35只腹腔接种含CVB3 Nancy株的病毒悬液(1×10^5PFU/只),于感染后第14天取心脏,行HE染色和CD3、CD45免疫组化染色,进行病理学评价,检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并做心肌组织中病毒滴度检测,采用Western blot法检测磷酸化AKT、Ik Bα、GSK3β的表达。结果:4周龄小鼠造模过程中有19只(54.3%)死亡;与对照小鼠比较,模型小鼠心肌呈现弥漫性炎性细胞浸润和片状心肌细胞变性坏死,CD3、CD45阳性细胞弥漫浸润于心肌间质,血清IL-1β、TNF-α水平明显升高(P〈0.05),心肌组织中磷酸化AKT、Ik Bα、GSK3β表达增高(P〈0.05)。6周龄小鼠造模过程中有3只(8.6%)死亡,模型小鼠心肌组织中炎症反应轻于4周龄模型小鼠(P〈0.05)。结论:成功建立了VMC的C57BL/6J小鼠模型,4周龄C57BL/6J小鼠更适用于模型的建立。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒B3 病毒性心肌炎 C57bl/6J小鼠 动物模型
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枯草杆菌纳豆激酶基因的克隆及其在E.coliBL21(DE3)plysS中的表达 被引量:3
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作者 张立全 刘慧 +6 位作者 苏慧敏 扈廷茂 侯鑫 扈会平 邢万金 常福厚 王永胜 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期284-287,共4页
用CTAB法从枯草杆菌(纳豆株)中提取基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增获得837bp的DNA片段,将该基因片断克隆到pMD18-T载体上,筛选重组子,通过限制性内切酶、PCR技术和测序分析确定该重组子所含插入片断为纳豆激酶基因.利用基因重组技... 用CTAB法从枯草杆菌(纳豆株)中提取基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增获得837bp的DNA片段,将该基因片断克隆到pMD18-T载体上,筛选重组子,通过限制性内切酶、PCR技术和测序分析确定该重组子所含插入片断为纳豆激酶基因.利用基因重组技术构建了纳豆激酶基因的融合表达载体,转化E.coliBL21(DE3)plysS后经IPTG诱导在大肠杆菌中高效表达,经SDS-PAGE电泳及bandscan软件分析融合蛋白分子量约为33.4kD,约占菌体总蛋白29.4%. 展开更多
关键词 枯草杆菌 纳豆激酶 克隆表达 bl21(DE3)plysS
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一步法制备大肠杆菌BL21(DE3)菌株感受态细胞及转化条件优化 被引量:6
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作者 张迹 李智 +1 位作者 张宇 袁巧云 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第12期529-532,共4页
大肠杆菌BL21(DE3)菌株是大肠杆菌表达系统最常用的宿主菌株,因此人们需要1种便捷有效的感受态细胞制备和转化方法。一步法感受态细胞制备操作方便,只加1种试剂即可,更快捷稳定,转化也更方便,不需要热激。研究大肠杆菌感受态细胞一步法... 大肠杆菌BL21(DE3)菌株是大肠杆菌表达系统最常用的宿主菌株,因此人们需要1种便捷有效的感受态细胞制备和转化方法。一步法感受态细胞制备操作方便,只加1种试剂即可,更快捷稳定,转化也更方便,不需要热激。研究大肠杆菌感受态细胞一步法制备对BL21菌株的适用性,并对转化过程中的关键参数进行探索和优化。结果表明,该一步法制备的BL21菌株感受态细胞可获得106CFU/μg DNA转化效率,完全能够满足常规转化要求。转化过程中相关参数的最佳条件为冰水浴30 min,室温放置10 min,37℃、150 r/min振荡复苏40 min。 展开更多
关键词 感受态细胞制备 一步法 大肠杆菌bl21(DE3)菌株 转化条件
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黑麦CenH3基因克隆及其在小麦1BL/1RS易位染色体中的定位 被引量:3
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作者 李亚莉 聂园军 +4 位作者 杨峰 孙玉 董艳辉 任永康 唐朝晖 《山西农业科学》 2016年第7期889-893,共5页
黑麦属蕴藏着丰富的遗传变异和改良小麦品质的优良基因,将其导入小麦能够拓宽小麦的遗传基础、丰富小麦的遗传变异。研究采用分子克隆技术获得黑麦CenH3基因的部分片段,并进行探针标记;同时,利用基因组原位杂交技术,筛选出32份1BL/1RS... 黑麦属蕴藏着丰富的遗传变异和改良小麦品质的优良基因,将其导入小麦能够拓宽小麦的遗传基础、丰富小麦的遗传变异。研究采用分子克隆技术获得黑麦CenH3基因的部分片段,并进行探针标记;同时,利用基因组原位杂交技术,筛选出32份1BL/1RS易位系;应用FISH技术,检测筛选出的32份1BL/1RS易位系,所有1BL/1RS易位系材料中均未发现黑麦CenH3基因的信号。但是,应用小麦和黑麦特异着丝粒DNA序列进行FISH检测,2个信号均出现在所有被检测的1BL/1RS易位系材料中。说明1BL/1RS易位染色体在不同小麦背景和山羊草属背景中均能稳定遗传,1RS的着丝粒DNA序列对1BS的着丝粒DNA序列有很好的补偿性,与小麦CenH3蛋白相互作用指导易位染色体正确分离且稳定遗传。 展开更多
关键词 黑麦 CenH3基因 荧光原位杂交 1bl/1RS易位系
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利用组织芯片技术研究C57BL/6J和C3H/HeN小鼠放射性肺损伤进程差异及其机制 被引量:5
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作者 刘英 李杨 +4 位作者 彭瑞云 高亚兵 马俊杰 王水明 王德文 《中国体视学与图像分析》 2008年第3期170-176,共7页
目的建立C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠放射性肺损伤进程相关组织芯片,并应用其研究FN、LN和a-SMA的表达变化及意义。方法采用20Gy60Coγ射线照射C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠复制动物模型,测定肺组织中羟脯氨酸含量,制备组织芯片,应用免疫... 目的建立C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠放射性肺损伤进程相关组织芯片,并应用其研究FN、LN和a-SMA的表达变化及意义。方法采用20Gy60Coγ射线照射C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠复制动物模型,测定肺组织中羟脯氨酸含量,制备组织芯片,应用免疫组织化学(im-munohistochemistry,IHC)染色方法与图像分析技术定量检测纤连蛋白(fibronectin,FN)、层粘连蛋白(laminin,LN)和a-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,a-SMA)在放射性肺损伤进程中的表达变化。结果组织芯片制备成功,其HE和免疫组织化学染色结果与普通切片具有良好一致性。照射后1~6mC57BL/6J小鼠肺组织病变经历炎症期、增生期和纤维化期,胶原沉积增多,照后1~3mFN表达明显高于正常对照组,照后6m逐渐减少至正常,LN表达在照射后呈渐进性增加,a-SMA表达强于C3H/HeN小鼠;照射后1~6mC3H/HeN小鼠肺组织主要表现为间质性炎症改变,FN表达于照射后1~6m与正常对照组相比无明显变化,LN表达于照射后1~3m明显增强,6m逐渐减少。结论γ射线照... 展开更多
关键词 放射性肺损伤 C57bl/6J小鼠 C3H/HeN小鼠 组织芯片
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TAT-hEGF融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中高效自我表达 被引量:1
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作者 智庆文 苗爱玲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期89-91,100,共4页
为了获得TAT-hEGF融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中高效表达,构建了原核表达载体pRSET-tat-hegf,将其转化E.coliBL21(DE3)得到重组工程菌BL21(DE3)/pRSET-tat-hegf。工程菌在无IPTG的诱导下实现了高效表达,TAT-hEGF融合蛋白的表达量占总菌... 为了获得TAT-hEGF融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中高效表达,构建了原核表达载体pRSET-tat-hegf,将其转化E.coliBL21(DE3)得到重组工程菌BL21(DE3)/pRSET-tat-hegf。工程菌在无IPTG的诱导下实现了高效表达,TAT-hEGF融合蛋白的表达量占总菌体蛋白的45.6%,主要以包涵体形式存在。 展开更多
关键词 TAT—hEGF融合蛋白 人表皮生长因子 包涵体 E.COLI bl21(DE3)
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基因工程菌株BL21(DE3)(pECB-ST1)菌种的限定代次及保存条件试验 被引量:1
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作者 邓光存 吕玉玲 +1 位作者 王玉炯 许崇波 《宁夏农学院学报》 2002年第2期24-26,共3页
本文对基因工程菌株BL2 1(DE3) (pECB -ST1)菌种的限定代次及保存条件进行了详细研究。实验结果证实 ,基因工程菌株BL2 1(DE3) (pECB -ST1)基础种子体外传至 10代 ,其效力、培养特性均不发生变化 ,表明基因工程菌株BL2 1(DE3) (pECB -S... 本文对基因工程菌株BL2 1(DE3) (pECB -ST1)菌种的限定代次及保存条件进行了详细研究。实验结果证实 ,基因工程菌株BL2 1(DE3) (pECB -ST1)基础种子体外传至 10代 ,其效力、培养特性均不发生变化 ,表明基因工程菌株BL2 1(DE3) (pECB -ST1)是一株良好的疫苗生产菌株。基因工程菌株BL2 1(DE3) (pECB -ST1)甘油菌种和冻干菌种分别在 2 0℃保存 2年和 3年 ,菌种的数量未明显减少 。 展开更多
关键词 保存条件 基因工程菌株bl21 DE3 pECB-ST1 菌种 限定代次 基因工程灭活苗
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BL21(DE_3)/PET-11做为人IL-2表达系统的研究 被引量:2
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作者 公茂凯 章静波 +3 位作者 刘德培 张世馥 刘丕旭 董敏 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期60-65,共6页
BL21(DE_3)/PET-11做为人IL-2表达系统的研究公茂凯,章静波,刘德培,张世馥刘丕旭,董敏(中国医学科学院中国协和医科大学北京基础医学研究所,北京100005)关键词白细胞介素2,BL21(DE_3),聚... BL21(DE_3)/PET-11做为人IL-2表达系统的研究公茂凯,章静波,刘德培,张世馥刘丕旭,董敏(中国医学科学院中国协和医科大学北京基础医学研究所,北京100005)关键词白细胞介素2,BL21(DE_3),聚合酶链反应中图号R392。12白细... 展开更多
关键词 白细胞介素2 bl21(DE3) 聚合酶链反应
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BL3棒材热镦开裂原因分析
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作者 李祥才 《金属制品》 2003年第6期29-30,共2页
关键词 棒材 热镦 开裂原因 金相分析 力学性能 化学成分 螺帽 bl3
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大肠杆菌BL21(DE3)lpxM突变株的构建 被引量:2
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作者 张君 方宏清 +2 位作者 谢达平 刘志敏 陈惠鹏 《生物技术通讯》 CAS 2006年第4期489-492,共4页
目的:lpxM基因失活可以产生极低内毒素活性的脂多糖。构建大肠杆菌BL21(DE3)的lpxM突变株,并考察该突变株的生长状态和表达重组蛋白的能力。方法:构建同源臂长500bp左右的打靶载体,借助Red同源重组系统,使E.coliBL21(DE3)的lpxM基因发... 目的:lpxM基因失活可以产生极低内毒素活性的脂多糖。构建大肠杆菌BL21(DE3)的lpxM突变株,并考察该突变株的生长状态和表达重组蛋白的能力。方法:构建同源臂长500bp左右的打靶载体,借助Red同源重组系统,使E.coliBL21(DE3)的lpxM基因发生插入失活,再导入编码FLP位点特异性重组酶的质粒pCP20去除抗性基因。PCR鉴定发生插入突变的菌株,应用SDS-PAGE分析突变前后的脂多糖,考查对重组蛋白表达的影响。结果:PCR鉴定结果说明lpxM基因发生了插入突变。与出发株比较,突变株的脂多糖电泳图谱发生了明显变化,但其生长状态与表达重组蛋白的能力与出发株基本一致。结论:大肠杆菌BL21(DE3)的lpxM突变株可以用于重组蛋白的表达。 展开更多
关键词 大肠杆菌bl21(DE3) lpxM基因 Red同源重组系统
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基于重组工程法高转化效率的大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株构建 被引量:2
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作者 张飞飞 石牡丹 尚广东 《安徽农业科学》 CAS 2015年第20期29-31,72,共4页
[目的]提高最常用的异源蛋白表达宿主菌E.coli BL21(DE3)的转化效率。[方法]利用基于质粒的重组工程系统和双链断裂修复功能。[结果]敲除了编码降解外源DNA的I型限制性内切酶的hsdR基因,获得了高转化效率以及其他功能与BL21(DE3)仍保持... [目的]提高最常用的异源蛋白表达宿主菌E.coli BL21(DE3)的转化效率。[方法]利用基于质粒的重组工程系统和双链断裂修复功能。[结果]敲除了编码降解外源DNA的I型限制性内切酶的hsdR基因,获得了高转化效率以及其他功能与BL21(DE3)仍保持一致的LS1928菌株。[结论]获得的LS1928菌株可能会作为获得催化用酶的关键材料,进而在蛋白质工程等研究领域有着重要的作用。 展开更多
关键词 重组工程 基因敲除 双链断裂修复 大肠杆菌bl21(DE3)
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