肾衰饮对肾间质纤维化大鼠炎症与氧化应激相关基因表达谱的影响

目的 运用网络药理学整合动物实验验证的研究思路寻找肾衰饮治疗肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis, RIF)的可能分子机制。方法 通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库筛选肾衰饮的活性成分;NCBI-GEO数据库寻找疾病靶点,构建病药重合靶点网络及相互作用关系,然后对重合靶点进行KEGG及GO富集分析。最后采用单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction, UUO)大鼠肾脏组织对靶点进行验证。结果 筛选出肾衰饮活性成分共计207个及7个关键重合靶点:重合靶点核转录因子-κB p65(RELA)、胞核癌基因(FOS)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、增殖细胞核抗原(PCNA)、CYP1B1酶(CYP1B1)、2型3α-羟基类固醇脱氢酶醛酮还原酶(AKR1C3)、螺旋环螺旋结构域扩散激酶(CHUK)。动物实验表明肾衰饮能够有效减轻肾间质纤维化,肾衰饮能够显著下调小鼠肾脏组织RELA(P<0.01)、FOS(P<0.05)、MMP9(P<0.01)、PCNA(P<0.01)、CYP1B1(P<0.01)mRNA表达,上调AKR1C3(P<0.05)mRNA表达。结论 肾衰饮通过调节炎症、氧化应激等途径发挥治疗肾间质纤维化作用。

肾衰饮对TGF-β1诱导的下游因子CTGF及FN的调控作用

目的:通过观察肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏CTGF、FN的表达,探讨肾衰饮抗肾纤维化药效学机制。方法:采用腺嘌呤肾病模型,与尿毒清作对照,观察肾衰饮对CRF大鼠TGF-β1刺激的下游因子CTGF及FN、TNF-a、IL-6的影响。结果:与正常组比较,模型组CTGF、FN表达明显增强,TNF-a、IL-6、SCr、BUN升高(P<0.01);与模型组比较,肾衰饮组CTGF、FN表达明显减少,TNF-a、IL-6、SCr水平下降,明显优于尿毒清组(P<0.05)。结论:肾衰饮抑制TGF-β1诱导的下游因子CTGF表达,降低FN、TNF-a、IL-6含量,有效抑制肾纤维化。

肾衰饮调控慢性肾功能衰竭大鼠肾脏细胞凋亡的机制

背景:前期动物实验已经做过肾衰饮治疗慢性肾功能衰竭在内质网凋亡通路方面的研究,但其有关细胞凋亡其他途径的机制还有待研究。目的:从Fas/FasL途径探讨肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏细胞凋亡的调控机制。方法:选取60只雄性SD大鼠,随机分成空白组、模型组、尿毒清组和肾衰饮组,后3组通过腺嘌呤悬浊液200 mg/(kg•d)灌胃建立慢性肾功能衰竭大鼠模型;肾衰饮组大鼠给予肾衰饮煎剂33.3 g/(kg•d)灌胃;尿毒清组大鼠给予尿毒清颗粒2.25 g/(kg•d)灌胃;空白组和模型组给予0.9%氯化钠注射液8 mL/kg灌胃;均为1次/d,疗程4周。治疗完成后检测血清肌酐、尿素氮水平;苏木精-伊红染色法观察大鼠肾脏组织病理学变化,原位末端标记法染色评价肾组织细胞凋亡情况;免疫印迹法检测大鼠肾脏组织Fas、FasL、Caspase8、Caspase3蛋白表达水平。实验方案经辽宁中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号为21000092017044)。结果与结论:①与空白组比较,模型组、尿毒清组和肾衰饮组大鼠的血清肌酐、尿素氮水平显著升高(P<0.01);肾脏细胞凋亡指数明显升高(P<0.01);肾脏组织中Fas、FasL、Caspase3、Caspase8蛋白表达水平均明显升高(P<0.01);尿毒清组和肾衰饮组大鼠以上指标均优于模型组(P<0.01),尿毒清组和肾衰饮组相比差异无显著性意义(P>0.05);②结果说明,肾衰饮能够降低慢性肾功能衰竭大鼠肾脏细胞凋亡,改善肾脏功能,其机制可能与肾衰饮能够抑制Fas/FasL介导的凋亡途径相关。

肾衰饮对老年慢性肾衰竭患者疗效及机体免疫功能影响

目的：探讨肾衰饮对老年慢性肾衰竭患者疗效及机体免疫功能的影响。方法：选取2015年3月—2016年8月我院诊治的76例老年慢性肾衰竭患者,随机分成对照组与治疗组,每组38例。均予营养支持、纠正磷钙代谢紊乱以及水电解质酸碱平衡等基础治疗,对照组予药用炭片治疗,治疗组在上述基础上予中药肾衰饮治疗,均治疗2个月。检测免疫相关指标及肾功能指标,评估主要症状积分,比较临床效果。结果：与治疗前比较,对照组IgM、IgG、IgA等免疫球蛋白以及主要症状积分均无变化（P〉0.05）,治疗组IgM、IgG、IgA升高（P〈0.05）,倦怠乏力、恶心呕吐、水肿、腰膝酸软症状积分降低（P〈0.01）,两组血BUN、Scr降低（P〈0.01）;与对照组比较,治疗组IgM、IgG、IgA较高（P〈0.05）,BUN、Scr较低（P〈0.01）,倦怠乏力、恶心呕吐、水肿、腰膝酸软症状积分较低（P〈0.01）,总有效率较高（P〈0.05）。结论：肾衰饮可有效调节患者免疫功能,改善中医症状,改善肾脏功能。

肾衰饮对糖尿病肾病大鼠足细胞标志蛋白、足细胞裂孔膜蛋白影响

目的研究肾衰饮对糖尿病肾病(DKD)大鼠足细胞标志蛋白(PCX)、足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)的影响。方法选取SPF级雄性SD大鼠72只随机分为空白组、DKD组、厄贝沙坦组、肾衰饮低剂量组、肾衰饮中剂量组、肾衰饮高剂量组。采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射建立DKD大鼠模型。厄贝沙坦组采用厄贝沙坦2.7 mg/mL灌胃;肾衰饮低、中、高剂量组分别采用肾衰饮2.79、5.58、11.16 g/mL灌胃;空白组、DKD组采用等体积生理盐水灌胃。连续给药8周后检测各组大鼠尿蛋白(PRO)、总胆固醇(TC)、血肌酐(Scr)、甘油三酯(TG)、血尿素氮(BUN)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、葡萄糖(GLU)、谷丙转氨酶(ALT)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷草转氨酶(AST)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理形态学变化;酶联免疫吸附试验检测血清碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平;蛋白免疫印迹法检测肾脏组织PCX、Nephrin蛋白表达水平。结果与空白组比较,DKD组大鼠GLU、ALT、AST、PRO、Scr、BUN、TC、TG、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著下降(P<0.01);肾小球发生硬化性改变、上皮细胞颗粒样变性、囊腔明显变窄,肾小管周围大量炎性细胞浸润;血清bFGF、IGF、MCP-1表达水平显著升高(P<0.01);PCX、Nephrin水平显著降低(P<0.01)。与DKD组比较,厄贝沙坦组和肾衰饮各剂量组大鼠GLU、ALT、AST、PRO、Scr、BUN、TC、TG、LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著上升(P<0.05,P<0.01);肾脏病理损害不同程度减轻;厄贝沙坦组、肾衰饮高剂量组大鼠血清bFGF、IGF、MCP-1表达水平均有不同程度下降(P<0.01);厄贝沙坦组、肾衰饮高剂量组大鼠PCX、Nephrin水平均有不同程度上升(P<0.05,P<0.01)。结论肾衰饮能够有效降低DKD大鼠血糖、血脂、肝功能、肾功能、蛋白尿水平,抑制血清bFGF、IGF、MCP-1表达,改善肾组织病理改变,其机制可能与上调PCX、Nephrin蛋白表达以修复足细胞损伤有关。

肾衰饮联合排毒穴贴治疗慢性肾衰的临床观察

目的:观察肾衰饮联合排毒穴贴对慢性肾衰疾病毒素清除及肾脏保护作用。方法:对100例慢性肾衰患者,在基础治疗的同时,口服中药汤剂肾衰饮,外用排毒穴贴。观察治疗前后症状好转情况及肾功能(尿素氮、血肌酐、血尿酸、胱抑素C)的变化。结果:治疗总有效率为85%,治疗后较治疗前明显好转,差异有统计学意义(P<0.05);其尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、血尿酸(UA)的下降有统计学意义(P<0.05);内生肌酐清除率(Ccr)的升高有临床意义(P<0.05);胱抑素C(Cys-C)无明显变化(P>0.05)。结论:肾衰饮联合排毒穴贴治疗慢性肾衰患者具有清除毒素、延缓肾功能进展的作用。