参榆洗液改善痔术后大鼠痛觉敏化及对cAMP/PKA信号通路的影响

目的:基于环磷酸腺苷/蛋白激酶A(c AMP/PKA)信号通路探究参榆洗液对痔术后大鼠疼痛的影响。方法:构建痔术后大鼠模型,将造模成功的56只SD大鼠随机分为模型组、溶剂模型组、参榆洗液组、参榆洗液+Forskolin(c AMP/PKA信号通路激动剂)组、Forskolin组、H-89(c AMP/PKA信号通路抑制剂)组、NS-398(PGE_(2)抑制剂)组,每组8只;另取8只大鼠为空白组。各组大鼠给予对应药物干预,连续7 d。给药结束后1 d,观察大鼠一般状态及疼痛相关动物学行为,观察创面变化并计算创面愈合率,苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠创面组织病理学改变,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测各组大鼠背根神经节TRPV1、p-PKA蛋白表达及创面组织中c AMP、PKA蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠创面组织中c AMP m RNA、PKA m RNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测创面组织中PGE_(2)、IL-6、IL-1β含量。结果:模型组大鼠背根神经节组织中p-PKA、TRPV1及创面周围组织c AMP、PKA、PGE_(2)、c AMP m RNA、PKA m RNA、IL-6、IL-1β表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,H-89组、NS-398组、参榆洗液+Forskolin组、参榆洗液组创面组织病变程度减轻,创面愈合率依次上升,背根神经节组织中p-PKA、TRPV1及创面组织c AMP、PKA、c AMP m RNA、PKA m RNA、IL-6、PGE_(2)、IL-1β表达水平依次降低(P<0.05);Forskolin干预能显著提高痔术后大鼠模型c AMP、PKA、TRPV1、p-PKA、PGE_(2)、IL-6、IL-1β表达水平(P<0.05),与参榆洗液联合干预后,上述蛋白及炎症因子表达水平显著下降(P<0.05)。结论:参榆洗液对痔术后大鼠cAMP/PKA信号通路有抑制作用,抑制c AMP/PKA信号通路可改善痔术后痛觉敏化,其机制可能与抑制PGE_(2)表达、减少炎症因子释放、抑制TRPV1活化有关。

通过SP/NK-1R信号通路探讨参榆洗液对痔术后大鼠的止痛机制

目的:探究参榆洗液通过调节SP/NK-1R信号通路对痔术后大鼠疼痛的改善作用。方法:将40只SD大鼠随机分为参榆洗液组(实验组)、金玄痔科熏洗散组(对照组)、模型组、空白组,每组各10只,完成模拟外痔切除术后,各组予以相应药物治疗及换药刺激,连续7 d,期间观察大鼠疼痛相关动物学行为。分别于第4天、第7天采集数据后麻醉处死各组半数大鼠,取肛周组织行HE染色观察以及检测肛周组织中P物质及NK-1受体的蛋白含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠组织水肿与炎性浸润明显(P<0.05);与模型组比较,实验组、对照组可减少痔术后大鼠疼痛导致的扭体反应次数,延长首次舔舐肛周创面的潜伏时间,缩短舔舐肛周总时间,减少肛周创面组织中P物质、NK-1受体的阳性表达(均P<0.05)。与对照组比较,实验组对以上各项指标的改善效果更优(均P<0.05)。结论:参榆洗液可通过下调肛周组织P物质和NK-1受体表达抑制SP/NK-1R通路,阻碍疼痛信号的产生和传递,减轻组织水肿和炎性浸润,缓解大鼠的疼痛反应,故抑制SP/NK-1R通路是参榆洗液缓解痔术后疼痛的机制之一。