参元丹含药血清对心肌缺血保护作用及其微管相关蛋白及自噬相关基因表达的影响

目的:通过参元丹胶囊含药血清对心肌细胞活性、培养液上清乳酸脱氢酶(LDH)活性、LC3微管相关蛋白LC3及自噬相关基因Beclin1-mRNA表达影响的研究,探讨参元丹胶囊对心肌缺血保护作用及作用机制。方法:分离1～3天龄Wistar大鼠心肌细胞进行细胞培养,采用无血清无糖培养建立心肌缺血细胞模型,于不同时间点加入参元丹胶囊含药血清,采用MTT法、比色法、蛋白免疫印迹技术(Western Blot)及逆转录PCR(RT-PCR)测定细胞活性、上清培养LDH含量、微管相关蛋白LC3蛋白(LC3I及LC3II)表达及哺乳动物自噬相关基因Beclin1-mRNA表达。结果:10%参元丹含药血清与相应时间点10%空白血清比较,能明显增加心肌缺血模型中3、6、18及24h心肌细胞活性(P<0.01)、降低培养液上清LDH活性(P<0.05);通过计算LC3II/LC3I比值发现参元丹含药血清能明显抑制缺血诱导24h的细胞自噬活性(P<0.05),而对心肌缺血模型各个时间点Beclin1-mRNA的表达没有影响。结论:参元丹含药血清对心肌细胞缺血损伤有保护作用,并可以在心肌细胞缺血较长时间后抑制自噬的活性,但其对自噬活性的影响可能与Beclin1表达无关。