藏药十五味萝蒂明目丸对紫外线诱导的永生化人晶状体上皮细胞系HLEC-B3的保护作用

目的研究藏药十五味萝蒂明目丸对紫外线所致的人类晶状体上皮细胞系-B3(human lens epithelial cells-B3,HLEC-B3)氧化损伤的保护机制。方法紫外线照射人晶状体上皮细胞,采用免疫印迹法(West-ern blotting,WB)检测不同剂量(800mg·mL-1、400mg·mL-1、200mg·mL-1)十五味萝蒂明目丸对照射后12h、24h、48h、72h人晶状体上皮细胞中晶状体上皮源性生长因子(lens epithelium-derived growth factor,LEDGF)和热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)的表达;并应用流式细胞仪检测其对人晶状体上皮细胞凋亡的影响。结果 Western blotting结果显示:晶状体上皮细胞在受到紫外线照射后,LEDGF和HSP27表达均升高,与正常对照组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05),并且在24h达到最高;在应用藏药十五味萝蒂明目丸之后,二者表达进一步升高,高剂量组与阳性药物组相比,差异有统计学意义(P<0.05);48h后LEDGF和HSP27表达水平均降低,并且持续降低,至72h后甚至降至12h水平。流式细胞术检测发现:正常对照组晶状体上皮细胞平均凋亡率为1.20%,经紫外线照射后,阴性对照组晶状体上皮细胞凋亡平均率为5.62%;应用十五味萝蒂明目丸后,高剂量组晶状体上皮细胞凋亡平均率为1.31%,阳性药物组晶状体上皮细胞凋亡平均率为2.55%,并且在不同时间点中,阴性对照组在24h晶状体上皮细胞凋亡平均率明显高于其他几个时间点,而高剂量组晶状体上皮细胞凋亡率除正常组外,均低于其他几组。结论藏药十五味萝蒂明目丸能够促进LEDGF及HSP27的表达,起到抗氧化损伤的作用,并且对受到紫外线照射后的晶状体上皮细胞具有抑制细胞凋亡的作用。

藏药十五味萝蒂明目丸对紫外线诱导的白内障大鼠晶状体上皮细胞的保护作用

目的探讨藏药十五味萝蒂明目丸(shi wu wei luo diming mu wan of Tibetan medicine)对紫外线诱导的白内障大鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)的保护作用。方法将90只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药物组(吡诺克辛滴眼液)、藏药高剂量组、藏药低剂量组和预防组,以紫外线诱导大鼠白内障模型后予以治疗,预防组自造模第一天同时给药。利用逆转录聚合酶链反应检测给药后50d、70d、90d LECs内抗氧化蛋白基因表达的水平,并在透射电镜下观察LECs的超微机构,进一步证明十五味萝蒂明目丸对紫外线诱导的白内障LECs是否具有保护作用。结果应用不同剂量的十五味萝蒂明目丸对混浊的晶状体进行干预,随着时间的延长抗氧化蛋白基因表达水平升高,透射电镜下细胞损伤的程度减轻,其中治疗组[藏药高剂量组50d时抗氧化蛋白基因水平为(29.00±0.05)]效果优于阳性药物组,以预防组效果最为明显。结论藏药十五味萝蒂明目丸对紫外线诱导的白内障LECs具有较好的保护作用,并起到预防及治疗效果。