MiR-106a-5p靶向E2F3和SP-1抑制C2C12细胞成肌分化的研究

为探究miR-106a-5p对成肌分化的作用及潜在调控靶点,在线预测miR-106a-5p潜在靶基因,通过RT-qPCR及Westernblot检测miR-106a-5p对靶基因的调控作用,利用双荧光素酶报告系统验证miR-106a-5p与靶基因之间的互作,并以C2C12细胞系为实验模型,采用过表达技术,在细胞形态学水平初步探索其对成肌分化的作用。在线预测发现E2F3和SP-1可能是miR-106a-5p的潜在靶基因;RT-qPCR分析表明,miR-106a-5p与E2F3和SP-1的表达模式相反;Westernblots结果发现,miR-106a-5p抑制E2F3和SP-1蛋白翻译;双荧光素酶报告载体系统表明,E2F3和SP-1是miR-106a-5p调控成肌分化的靶基因;此外,超表达miR-106a-5p抑制C2C12细胞分化,肌管数目显著减少。结果表明,E2F3和SP-1是miR-106a-5p抑制C2C12细胞成肌分化的靶基因。

Interaction between enteric epithelial cells and Peyer's patch lymphocytes in response to Shigella lipopolysaccharide: Effect on nitric oxide and IL-6 release

瞄准：在氮的氧化物的版本上调查在伤寒上皮细胞和 Peyer 的补丁的淋巴细胞之间的相互作用的效果(没有) 并且响应志贺氏菌属脂肪的多糖(LPS ) 的 IL-6。方法：人的结肠的上皮细胞(Caco-2 ) 是有 Peyer 的补丁从的淋巴细胞的混合 cocultured 野类型(C57 老鼠) 并且可诱导没有 synthase 大美人老鼠，并且与志贺氏菌属 F2a-12 LPS 质问了。版本没有并且 mIL-6 被 Griess 比色测定和连接酶的免疫吸着剂试金(ELISA ) 分别地测量。结果：当 LPS 挑战不在时，不在 Caco-2 上皮细胞的培养基然而并非在 Peyer 的补丁的淋巴细胞被检测，并且 NO 版本在有从也的淋巴细胞的两 cocultures 是进一步起来调整的野类型或 i NOS 大美人老鼠，与一显著地，高水平与 i NOS 猛烈淋巴细胞在 coculture 观察了。在为 24-h 的志贺氏菌属 F2a-12 LPS 挑战以后，没有生产显著地从野类型的老鼠然而并非从 i NOS 猛烈老鼠与 Peyer 的补丁的淋巴细胞在独自一个的 Caco-2 和 coculture 被增加。LPS 被发现从淋巴细胞刺激 mIL-6 的版本，它被 coculture 与 Caco-2 上皮细胞压制。在从 i NOS 猛烈老鼠的淋巴细胞的导致 LPS 的 mIL-6 生产从野类型的老鼠比那显著地大。结论：Peyer 的补丁的淋巴细胞从伤寒维持没有生产的组成的基础水平上皮的房间 Caco-2。从 Peyer 的补丁的淋巴细胞的导致 LPS 的 mIL-6 版本被 cocultured 上皮细胞压制。当没有变化在在淋巴细胞从的没有生产是可检测的时野类型并且在 LPS 前后的 i NOS 猛烈老鼠质问，不从淋巴细胞看起来起一个禁止的作用在上皮响应 LPS 的没有版本和他们的自己的 mIL-6 版本。

两种肠道侵袭性菌与小鼠小肠微皱褶细胞相互作用的初步研究

利用小鼠肠袢模型进行局部感染 ,在不同的时间取Peyer’s结对其进行扫描电镜和透射电镜的观察 ,并用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果表明 ,鼠伤寒沙门氏菌 460 0 43和痢疾杆菌F2a 12两种肠道侵袭性菌与微皱褶细胞的粘附发生在局部感染 3 0min ,感染 60～ 90min在M细胞和淋巴细胞中可见到细菌 ,而在感染 6～ 8h后Peyer’s结中的细胞凋亡百分率与对照相比差异最为明显。提示 :鼠伤寒沙门氏菌 460 0 43和痢疾杆菌F2a 12均是借助于M细胞通过上皮屏障 。