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云南省2016—2022年志贺氏菌分子分型及耐药性分析
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作者 尹艳珠 杨祖顺 +3 位作者 邹颜秋硕 任翔 国译丹 范璐 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第7期79-86,共8页
目的对云南省2016—2022年食源性疾病主动监测分离的志贺氏菌进行血清、分子分型和药敏试验等分析,了解云南省志贺氏菌的病原学特性,为志贺氏菌感染的防控和治疗提供数据支持。方法2016年1月至2022年12月从患者粪便中分离志贺氏菌,采用... 目的对云南省2016—2022年食源性疾病主动监测分离的志贺氏菌进行血清、分子分型和药敏试验等分析,了解云南省志贺氏菌的病原学特性,为志贺氏菌感染的防控和治疗提供数据支持。方法2016年1月至2022年12月从患者粪便中分离志贺氏菌,采用玻片凝集法进行血清学分型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型分析,微量肉汤稀释法进行药敏试验。结果共分离志贺氏菌89株,其中福氏志贺氏菌占52.81%,宋内志贺氏菌占47.19%。PFGE分析发现,2种志贺氏菌均分为A和B 2个聚类簇,B簇为优势簇。47株福氏志贺氏菌分为30种PFGE带型,有3组优势带型,42株宋内志贺氏菌分为22种PFGE带型,有4组优势带型,并识别两起疑似暴发事件。志贺氏菌对13种抗生素存在不同程度的耐药,78.65%的菌株为多重耐药菌株。结论云南省志贺氏菌PFGE优势带型明显,部分带型聚集分布。耐药形势严峻,多重耐药现象严重。福氏志贺氏菌和宋内志贺氏菌耐药表型存在差异。 展开更多
关键词 志贺氏菌 血清型 脉冲场凝胶电泳 耐药性
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重组酶介导的等温扩增结合CRISPR/Cas12a检测志贺氏菌和克罗诺杆菌
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作者 张欣悦 杨钰娟 +4 位作者 孔祥翔 杨捷琳 钮冰 陈沁 刘志勇 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第11期35-44,共10页
目的应用重组酶介导的等温扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)结合成簇规则的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR),建立志贺氏菌和克罗诺杆菌的快速检测方法。方法通过... 目的应用重组酶介导的等温扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)结合成簇规则的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR),建立志贺氏菌和克罗诺杆菌的快速检测方法。方法通过筛选志贺氏菌和克罗诺杆菌特异性基因,设计特异扩增引物、CRISPR脱氧核糖核酸(CRISPR deoxyribonucleic acid,crDNA)和探针,将靶标进行RAA扩增后,建立CRISPR检测方法。对方法的灵敏度、特异性和应用性进行评价,并与国标检测方法进行对比。结果本研究对志贺氏菌和克罗诺杆菌纯菌液DNA最低检出限分别为4.9×10^(3) CFU/mL、4.4×10^(4) CFU/mL,基因组DNA最低检出限为6.8×10^(‒3) ng/μL、5.7×10^(‒3 )ng/μL,特异性好,与其他病原菌无交叉反应。同时,该方法成功检测出加标猪肉样品和人工污染奶粉中的志贺氏菌和克罗诺杆菌,比国家标准检出限更低。结论本研究建立的RAA-CRISPR方法可有效应用于志贺氏菌和克罗诺杆菌的检测,这为快速筛查食品中是否污染这两种病原菌提供重要价值。 展开更多
关键词 志贺氏菌 克罗诺杆菌 重组酶介导的等温扩增 成簇规则的间隔短回文重复序列
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《细菌性痢疾诊疗方案(2023年版)》解读
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作者 宋承润 陈恩强 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期743-748,共6页
细菌性痢疾是我国规定的法定传染病之一。近几十年来,随着卫生设施的改善、水源和食品安全的管理加强以及积极的公共卫生措施,我国细菌性痢疾的发生率和死亡率大幅下降,但志贺菌仍是引起急性感染性腹泻的常见致病菌。为进一步规范细菌... 细菌性痢疾是我国规定的法定传染病之一。近几十年来,随着卫生设施的改善、水源和食品安全的管理加强以及积极的公共卫生措施,我国细菌性痢疾的发生率和死亡率大幅下降,但志贺菌仍是引起急性感染性腹泻的常见致病菌。为进一步规范细菌性痢疾临床诊疗工作,国家卫生健康委员会医疗应急司组织制定《细菌性痢疾诊疗方案(2023年版)》,现对该指南的部分意见进行分析,以促进细菌性痢疾治疗的规范化。 展开更多
关键词 细菌性痢疾 志贺菌 治疗 诊断
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耐高浓度氨氮微生物Y5的脱氮特性及应用研究
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作者 刘诗园 张婷 +5 位作者 高雅娟 李晨晨 杨永宇 张国伟 谭骞骞 靳永胜 《工业水处理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期162-170,共9页
污水脱氮是污水净化处理的关键步骤之一。为去除水体中高浓度氨氮,于某化工污水中筛选出一株具有异养硝化-好氧反硝化性能的菌株鲍氏志贺菌(Shigella boydii Y5),通过单因素实验研究其最佳生存环境,并考察其应用于实际废水中的脱氮性能... 污水脱氮是污水净化处理的关键步骤之一。为去除水体中高浓度氨氮,于某化工污水中筛选出一株具有异养硝化-好氧反硝化性能的菌株鲍氏志贺菌(Shigella boydii Y5),通过单因素实验研究其最佳生存环境,并考察其应用于实际废水中的脱氮性能。结果表明,其最佳生存环境是碳源为蔗糖,C/N为10,pH为7,转速为140 r/min,此环境下生长的菌株Y5对初始质量浓度为1000 mg/L氨氮废水具高效的脱氮能力,且菌株Y5为嗜盐菌。将菌株Y5应用于核酸废水,对氨氮和总氮的最大降解率达98.22%和90.27%。通过高通量测序分析废水脱氮过程中Y5菌株的作用和稳定性,结果表明,与只添加碳源处理组相比,添加碳源和菌株Y5处理组废水中微生物多样性水平出现显著性差异,表明Shigella boydii Y5在实际废水处理中有巨大应用价值。 展开更多
关键词 好氧反硝化 鲍氏志贺菌 脱氮特性 核酸废水
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TaqMan探针双重荧光聚合酶链式反应技术检测食源性沙门氏菌和志贺氏菌
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作者 郭瑞 赵林萍 +5 位作者 韩小改 屈凌波 赵光升 姬建生 郑怀信 任宝红 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第10期261-269,共9页
目的建立TaqMan探针双重荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测食源性沙门氏菌和志贺氏菌的方法。方法通过比对沙门氏菌和志贺氏菌的基因组序列,选择同源性高、保守性好的区域设计特异性引物和探针,经过引探筛选... 目的建立TaqMan探针双重荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测食源性沙门氏菌和志贺氏菌的方法。方法通过比对沙门氏菌和志贺氏菌的基因组序列,选择同源性高、保守性好的区域设计特异性引物和探针,经过引探筛选、浓度调试等一系列优化,建立了食源性沙门氏菌和志贺氏菌双重荧光PCR核酸检测方法,并对其特异性、质粒最低检出限、菌液敏感性、重复性、稳定性以及实际样品进行了验证。结果该方法与大部分食源性致病菌无交叉反应,特异性强;沙门氏菌和志贺氏菌质粒的最低检出限可达5 copies/μL,沙门氏菌菌液敏感性为1.0×10^(2) cfu/mL,志贺氏菌菌液敏感性10 cfu/mL;质粒和菌液核酸梯度的批内和批间变异系数均在0.177%~1.958%之间,小于5.0%,具有较强的稳定性;标准曲线相关系数(r^(2))均大于0.999。结论本研究成功建立了一种TaqMan探针双重荧光PCR技术同时检测食源性沙门氏菌和志贺氏菌的方法,该方法扩增时间短,只需要30 min即可,而且特异性强、稳定性好,可用于疑似沙门氏菌和志贺氏菌污染样品的检测,为食品安全的快速检测提供技术支撑。 展开更多
关键词 沙门氏菌 志贺氏菌 食源性 荧光聚合酶链式反应
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29株食源性志贺氏菌病原学特征和耐药特性分析
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作者 王子夫 李涛 孔凡明 《食品安全导刊》 2024年第2期103-107,共5页
目的:分析29株食源性志贺氏菌的病原学特征和耐药特性。方法:利用《食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验》(GB 4789.5—2012)中的血清学方法对29株食源性志贺氏菌进行分群血清凝集实验;利用高通量测序技术对菌株进行全基因组... 目的:分析29株食源性志贺氏菌的病原学特征和耐药特性。方法:利用《食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验》(GB 4789.5—2012)中的血清学方法对29株食源性志贺氏菌进行分群血清凝集实验;利用高通量测序技术对菌株进行全基因组测序和生物信息学分析,确定其群型和血清型;利用微量肉汤稀释法对菌株进行药敏实验。结果:通过血清学鉴定和wgSNP分析,29株食源性志贺氏菌中仅有2株为福氏志贺氏菌,其余27株均为宋内氏志贺氏菌;29株菌均对氨苄西林、氨苄西林舒巴坦、氯霉素、环丙沙星、头孢噻肟、萘啶酸、复方新诺明和四环素有不同程度的耐药特性,对复方新诺明和萘啶酸耐药率最高(100.00%),对头孢噻肟和环丙沙星的耐药率较低,分别为6.90%和3.45%。结论:临沂市食源性志贺氏菌流行优势菌株为宋内氏志贺氏菌,耐药形势严峻,针对志贺氏菌感染病例应采用更加个性化的治疗方案。 展开更多
关键词 食源性志贺氏菌 基因组 病原学特征
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常见细菌性食源性疾病研究进展 被引量:1
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作者 柏超凡 洪梦杰 +2 位作者 赵小青 杨帅 时光霞 《食品安全导刊》 2024年第1期148-150,共3页
细菌性食源性疾病在全球范围内非常普遍,并对公共卫生和个人健康造成了影响。常见的3种食源性病原菌分为沙门氏菌、大肠杆菌和志贺氏菌,本文针对其形态特征和食源性致病机制,以及诊断细菌性食源性疾病的方法、有关细菌性食源性疾病治疗... 细菌性食源性疾病在全球范围内非常普遍,并对公共卫生和个人健康造成了影响。常见的3种食源性病原菌分为沙门氏菌、大肠杆菌和志贺氏菌,本文针对其形态特征和食源性致病机制,以及诊断细菌性食源性疾病的方法、有关细菌性食源性疾病治疗方案等进行综述,以期为临床实践和预防措施的制定提供理论依据。 展开更多
关键词 沙门氏菌 大肠杆菌 志贺氏菌 食源性疾病
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志贺氏杆菌分泌蛋白Dnak的表达纯化与多克隆抗体的制备及应用
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作者 贾雪娇 刘梦琦 +7 位作者 刘洋 刘长城 李小凤 胡屹硕 李香雨 李润林 李永刚 赵微 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期236-242,共7页
目的表达轮状病毒感染的乳鼠体内志贺氏杆菌分泌蛋白Dnak(Hsp70),并制备Dnak多克隆抗体。方法以提取的志贺氏杆菌基因组为模板PCR扩增Dnak片段,与pET-24a(+)和PCDNA3.1分别连接构建原核表达质粒pET24a(+)-Dnak和真核表达质粒PCDNA3.1-Dn... 目的表达轮状病毒感染的乳鼠体内志贺氏杆菌分泌蛋白Dnak(Hsp70),并制备Dnak多克隆抗体。方法以提取的志贺氏杆菌基因组为模板PCR扩增Dnak片段,与pET-24a(+)和PCDNA3.1分别连接构建原核表达质粒pET24a(+)-Dnak和真核表达质粒PCDNA3.1-Dnak;pET24a(+)-Dnak原核表达质粒转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,经镍柱纯化Dnak蛋白。以纯化后的重组蛋白为免疫原免疫C57BL/6小鼠制备多克隆抗体,采用间接ELISA检测效价,Western Blot法检测灵敏度和特异性。利用制备的多克隆抗体在GST Pull-down实验中检测Dnak与轮状病毒非结构蛋白Nsp2的相互作用。真核表达质粒PCDNA3.1-Dnak转染至HEK293T细胞,以制备的DnaK多克隆抗体为一抗,Western blot法检测Dnak在细胞中的表达。利用MEGA11及Genedoc软件分析此志贺氏杆菌与志贺菌属其他细菌Dnak氨基酸序列同源性。结果重组质粒pET24a(+)-Dnak与PCDNA3.1-Dnak经测序比对包含与此志贺氏杆菌(Shigella:PRJNA804371)序列一致的基因,证明质粒构建成功。诱导表达的重组Dnak蛋白主要以可溶性形式存在,相对分子质量约为75 kDa,浓度可达0.62 mg/mL;Dnak鼠多克隆抗体可与重组Dnak蛋白发生特异性反应,效价为1∶32000,至少可以在1∶6000稀释度下检测到Dnak蛋白。GST Pull-down实验可以检测到Dnak与轮状病毒非结构蛋白Nsp2发生相互作用。转染PCDNA3.1-Dnak重组质粒的HEK293T细胞可以表达Dnak蛋白。经MEGA11和Genedoc软件比对PRJNA804371株与宋内志贺菌(Shigella sonnei)、痢疾志贺菌(Shigella dysenteriae)、鲍氏志贺菌(Shigella boydii)、福氏志贺菌(Shigella flexneri)Dnak氨基酸序列同源性较高。结论成功表达志贺氏杆菌Dnak蛋白,具有良好反应性与免疫原性;制备的鼠多克隆抗体效价及灵敏度较高可满足后续实验需要。 展开更多
关键词 志贺氏杆菌 DNAK 蛋白表达与纯化 多克隆抗体 轮状病毒
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致牛腹泻4种细菌多重荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:1
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作者 高睿 徐伟 +4 位作者 罗艳 谢晓刚 李梦磊 张琪 许信刚 《动物医学进展》 北大核心 2023年第6期21-27,共7页
随着规模化和集约化养牛业的不断发展,多种致病菌混合感染造成牛腹泻严重制约了养牛业的快速发展,对腹泻病原进行快速准确鉴别诊断对疫病防控至关重要。根据沙门氏菌的ivnA基因、大肠埃希氏菌的23S rRNA基因、产气荚膜梭菌的plc基因以... 随着规模化和集约化养牛业的不断发展,多种致病菌混合感染造成牛腹泻严重制约了养牛业的快速发展,对腹泻病原进行快速准确鉴别诊断对疫病防控至关重要。根据沙门氏菌的ivnA基因、大肠埃希氏菌的23S rRNA基因、产气荚膜梭菌的plc基因以及志贺氏菌的ipaH基因的保守区域建立了可同时检测这4种细菌的多重荧光定量PCR检测方法,并对其特异性、灵敏性和重复性进行了研究。结果显示,建立的标准曲线线性关系良好;优化后的检测方法仅可特异性扩增出4种目标细菌;对大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌和产气荚膜梭菌的最低检出限分别为9.4×10~1copies/μL、1.2×10~2copies/μL、9.1×10~1copies/μL和1.4×10~3copies/μL,该方法的灵敏性高于普通单项PCR检测方法10倍;批内、批间差异均小于5%。用此方法检测人工感染病料,每份病料均检测出对应攻毒细菌的荧光信号。以上结果表明,所建立的多重荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于致牛腹泻细菌的实验室检测。 展开更多
关键词 大肠埃希氏菌 沙门氏菌 志贺氏菌 产气荚膜梭菌 多重荧光定量PCR
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小檗碱抗沙门菌、志贺菌、弧菌、分枝杆菌和克雷伯菌药理作用及其机制的研究进展 被引量:1
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作者 张明发 沈雅琴 《抗感染药学》 2023年第11期1117-1122,共6页
小檗碱具有广谱的抗菌作用,对大肠埃希菌、幽门螺杆菌、球菌等均有较好的抑杀作用。小檗碱通过多靶点地作用于细菌,可干扰其糖、脂、氨基酸、核酸和蛋白质的代谢,从而破坏细胞膜和细胞壁的形成;此外,小檗碱还可增强免疫细胞功能,提高机... 小檗碱具有广谱的抗菌作用,对大肠埃希菌、幽门螺杆菌、球菌等均有较好的抑杀作用。小檗碱通过多靶点地作用于细菌,可干扰其糖、脂、氨基酸、核酸和蛋白质的代谢,从而破坏细胞膜和细胞壁的形成;此外,小檗碱还可增强免疫细胞功能,提高机体对细菌的防卫和杀伤能力。小檗碱不仅不易被细菌耐药,还可抑制细菌对其他抗菌药物耐药的产生。本文笔者主要对小檗碱的抗沙门菌、志贺菌、弧菌、分枝杆菌和克雷伯菌药理作用及其机制进行了综述和分析,为小檗碱的进一步临床研究提供参考。 展开更多
关键词 小檗碱 抗菌作用 药理机制 沙门菌 志贺菌 弧菌 分枝杆菌 克雷伯菌
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鸡鲍氏志贺菌ipaH基因的克隆与序列分析
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作者 陈宇 李佳怡 +4 位作者 王晓启 尹紫怡 王泽帅 丁婉婷 刘红英 《现代牧业》 2023年第1期6-9,25,共5页
利用PCR技术扩增鸡鲍氏志贺菌侵袭性质粒抗原H基因(invasive plasmid,ipaH),并与GenBank数据库中不同菌株进行序列比对与同源性分析。结果显示,分别扩增出ipaH_1、ipaH_2、ipaH_3、ipaH_4、ipaH_5和ipaH_6等目的基因。核苷酸序列比对和... 利用PCR技术扩增鸡鲍氏志贺菌侵袭性质粒抗原H基因(invasive plasmid,ipaH),并与GenBank数据库中不同菌株进行序列比对与同源性分析。结果显示,分别扩增出ipaH_1、ipaH_2、ipaH_3、ipaH_4、ipaH_5和ipaH_6等目的基因。核苷酸序列比对和同源性分析结果显示,鸡鲍氏志贺菌6个ipaH基因片段均与美国鲍氏志贺菌CP001063的核苷酸序列同源性最高,其次是中国鲍氏志贺菌CP000036,提示鸡鲍氏志贺菌可能起源于人鲍氏志贺菌。 展开更多
关键词 鲍氏志贺菌 ipaH 同源性分析
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貉源志贺菌分离鉴定、致病性及耐药性分析 被引量:2
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作者 张召兴 贾青辉 +2 位作者 张艳英 高桂生 史秋梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期25-31,共7页
为鉴定引起河北地区貉腹泻的志贺菌并分析其相关生物学特性,本研究对2017年~2019年采自河北地区养殖场中患腹泻病貉的肛拭子、粪便及病料样品共计193份进行细菌分离,并经生化特性及PCR鉴定。将分离的志贺菌以0.25 mL/只(108 cfu/mL)感... 为鉴定引起河北地区貉腹泻的志贺菌并分析其相关生物学特性,本研究对2017年~2019年采自河北地区养殖场中患腹泻病貉的肛拭子、粪便及病料样品共计193份进行细菌分离,并经生化特性及PCR鉴定。将分离的志贺菌以0.25 mL/只(108 cfu/mL)感染小鼠分析分离菌对小鼠的致病性。采用玻板凝集试验、PCR分别检测分离志贺菌的血清型及相关毒力基因。通过K-B药敏纸片法和PCR分别检测分离菌的耐药性及相关耐药基因,采用SPSS18软件中的Fisher确切概率法分析分离菌耐药表型与耐药基因之间的相关性。结果显示,从193份腹泻病貉样品中共分离到83株志贺菌,其中65株对小鼠具有致病性,且以致小鼠死亡4只(30.1%)、5只(22.9%)的菌株为主;65株致病性志贺菌分属于9种血清型,以福氏志贺菌2a(23.1%,15/65)、3a(20.0%,13/65)和1b(18.5%,12/65)型为主要流行的血清型;65株致病性志贺菌毒力基因ipaH、ipa BCD、ial、sen、Sat、Set1A、Set1B、sigA检出率均在50.8%以上,其他毒力基因检出率在38.5%~40%,未检出毒力基因stx、Pic,且均同时携带5~6种毒力基因;对β-内酰胺类的阿莫西林、氨苄西林,氨基糖苷类的6种药物,四环素类的多西环素,磺胺类的磺胺间甲氧嘧啶,多粘菌素类的多粘菌素11种药物耐药的致病性志贺菌占40.0%~100%,对β-内酰胺类的头孢噻呋、头孢噻肟,酰胺醇类的氟苯尼考,喹诺酮类的恩诺沙星、环丙沙星,林可胺类的林可霉素,氨基糖苷类的替米考星7种药物耐药的志贺菌占9.2%~36.9%,且分离菌呈多重耐药性,以耐11(16.9%)、10(20.0%)、9(13.8%)种药物的分离菌株最多;65株致病性志贺菌四环素类耐药基因tetA、tetE、tetG,氨基糖苷类耐药基因aadAI、aac(3)-IV,磺胺类耐药基因sulI、sulII,酰胺醇类耐药基因cmlA及多粘菌素类耐药基因mcr-1的检出率在40.0%以上,部分β-内酰胺类和喹诺酮类耐药基因的检出率在12.3%~32.3%。经分析65株致病性志贺菌的耐药表型与耐药基因之间基本呈正相关(二者之间符合率最低为79.1%,最高达100%)。本研究首次报道貉源志贺菌的致病性、血清型、毒力基因及耐药性等生物学特性,为志贺菌致病机制、流行病学调查及相关疫病的防控研究提供科学依据。 展开更多
关键词 志贺菌 致病性 血清型 毒力基因 耐药性
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适配体识别-化学发光技术检测福氏志贺菌 被引量:2
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作者 陈威风 李晓雪 +3 位作者 裴兰梅 常惟丹 崔丽伟 潘春梅 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期267-272,278,共7页
福氏志贺菌(Shigella flexneri)是一种危害人类健康的食源性致病菌。该实验首先制备鲁米诺功能化花状纳米金和氨基化磁性纳米Fe_(3)O_(4),然后将福氏志贺菌适配体的互补序列(FSZ-2HH)连接在鲁米诺功能化花状纳米金的表面构建信号探针,... 福氏志贺菌(Shigella flexneri)是一种危害人类健康的食源性致病菌。该实验首先制备鲁米诺功能化花状纳米金和氨基化磁性纳米Fe_(3)O_(4),然后将福氏志贺菌适配体的互补序列(FSZ-2HH)连接在鲁米诺功能化花状纳米金的表面构建信号探针,并将福氏志贺菌适配体(FSZ-1)通过亲和素的桥接作用修饰到氨基化磁性纳米Fe_(3)O_(4)表面构建捕获探针。当目标物存在时,目标物和信号探针会竞争性结合捕获探针,进而通过测定化学发光来达到检测目的。实验结果表明:在浓度2.6×10~2.6×10^(5) CFU/mL,福氏志贺菌的浓度与化学发光强度呈良好的线性关系,检出限为12 CFU/mL,特异性良好。该实验建立的方法为食品中福氏志贺菌的快速高灵敏检测提供了良好思路。 展开更多
关键词 福氏志贺菌 适配体传感器 化学发光 磁分离技术
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一株可裂解动物源性多重耐药志贺氏菌的噬菌体分离鉴定及其生物学特性研究
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作者 徐美余 张瑶 +5 位作者 邓征宇 何秀 罗成莹 邓先余 林连兵 王峰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2023年第5期91-100,共10页
从鸡的肠道内分离鉴定多重耐药志贺氏菌(Shigelle),纯化获得可侵袭、裂解该志贺氏菌的噬菌体,并研究其生物学特性。以养殖场病鸡肠道中分离的志贺氏病原菌为宿主,筛选鉴定噬菌体,聚乙二醇沉淀浓缩噬菌体,通过透射电镜观察噬菌体形态,双... 从鸡的肠道内分离鉴定多重耐药志贺氏菌(Shigelle),纯化获得可侵袭、裂解该志贺氏菌的噬菌体,并研究其生物学特性。以养殖场病鸡肠道中分离的志贺氏病原菌为宿主,筛选鉴定噬菌体,聚乙二醇沉淀浓缩噬菌体,通过透射电镜观察噬菌体形态,双层平板法测定噬菌体宿主谱、最佳感染复数、一步生长曲线、酸碱耐受性和热稳定性,测定噬菌体对多重耐药致病性志贺氏菌的裂解效果。通过上述方法,共筛选到26株志贺氏菌分离株,分别命名为BS1~BS26。以志贺氏菌BS26为宿主菌分离得到一株裂解性噬菌体并命名为噬菌体PSF26,鉴定为有尾噬菌体目,长尾噬菌体科,噬菌体对福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)和宋内志贺氏菌(Shigella sonnei)分离株均有裂解作用。噬菌体PSF26的最佳感染复数为0.1,感染周期为90 min,包括75 min的潜伏期和15 min的爆发期,裂解量为(58±17)pfu/cell。噬菌体PSF26在pH 5~8,温度0~40℃条件下能保持较高活性,对宿主菌的抑菌圈直径为(11.33±1.53)mm。结果表明,噬菌体PSF26爆发期短,裂解量高,有较好的酸碱、温度耐受性,对多重耐药性福氏和宋内志贺氏菌有良好的作用效果,为利用噬菌体防控饲养动物中食源性致病菌感染和饲用抗生素替代技术研发提供参考。 展开更多
关键词 志贺氏菌 噬菌体 抗生素替代 细菌感染疾病防治 生物学特性
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食品中志贺氏菌快速检测免疫磁分离样品前处理技术研究 被引量:2
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作者 李静雯 陈尔凝 +3 位作者 康福英 洪甜 富迎辉 杜美红 《计量学报》 CSCD 北大核心 2023年第3期326-333,共8页
采用Protein A磁珠与志贺氏菌混合血清制备抗志贺氏菌多靶标免疫磁珠,建立了25 mL志贺氏菌免疫磁分离体系,并通过测定代表性食品(牛奶、水果、面包)中志贺氏菌生长曲线,设计食品样品前处理可行性技术方案,与环介导等温扩增(LAMP)检测技... 采用Protein A磁珠与志贺氏菌混合血清制备抗志贺氏菌多靶标免疫磁珠,建立了25 mL志贺氏菌免疫磁分离体系,并通过测定代表性食品(牛奶、水果、面包)中志贺氏菌生长曲线,设计食品样品前处理可行性技术方案,与环介导等温扩增(LAMP)检测技术整合进行了食品中痕量志贺氏菌快速检测验证。结果显示:多靶标免疫磁珠能同时捕获福氏、宋内氏、鲍氏、痢疾氏等4种志贺氏菌,捕获效率为35%~94%,非特异性小于1%(金黄色葡萄球菌10%除外),1~2×10^(1)CFU志贺氏菌在25 mL纯牛奶、25 g梨/面包+25 mL志贺氏菌增菌肉汤基础中,通过6 h培养+免疫磁分离的策略可获得10^(2)CFU/mL以上的志贺氏菌,将志贺氏菌检测样品前处理时间由48 h缩短至8 h内,并能够满足后续检测技术检出限的需求,实现了食品中志贺氏菌的快速检测。 展开更多
关键词 计量学 食品检测 志贺氏菌 免疫磁分离 捕获效率 Protein A磁珠 多价血清
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Different Species of Salmonella spp and Shigella spp and Their Risk of Infection in N’Djamena Chad
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作者 Mahamat Tahir N’garé Hassan Ahmat Idriss Ahmat +4 位作者 Yacoub Mahamat Allamine Abakar Lawane Idriss Allagueryane Djimadinan Abderrazzack Adoum Foudda Ali Mahamat Moussa 《Journal of Biosciences and Medicines》 2023年第11期1-12,共12页
Introduction: Salmonella and Shigella are gram-negative bacilli that are resistant to most antibiotics and play an important role in an etiology of diarrhea disease. The aim of the study was to determine the prevalenc... Introduction: Salmonella and Shigella are gram-negative bacilli that are resistant to most antibiotics and play an important role in an etiology of diarrhea disease. The aim of the study was to determine the prevalence of Salmonella spp and Shigella spp isolated from stool and blood samples in the city of N’Djamena. Materials and Method: This was a prospective study conducted in the four district hospitals of N’Djamena from 14 July 2022 to 31 December 2022. A questionnaire form was drawn up to collect the information sent to the study patients. The samples were analyzed at the CHU de la Mère et de l’Enfant, Labo-Redes laboratory according to their protocols and the standard of the antibiogram committee of the French microbiology society. Results: Of the 803 biological samples analyzed, 39 were positive for Salmonella spp and Shigella spp, including 15 for Salmonella and 24 for Shigella, giving an overall prevalence rate of 4.85%. Borehole water, uncooked food and lack of access to a latrine constitute a risk of being infected by Salmonella spp and Shigella spp species. Of the 8 antibiotics tested, Salmonella spp and Shigella spp strains showed good sensitivity to nalidixic acid (100% for Salmonella and 90 for Shigella) and to ciprofloxacin (90.9% for Salmonella and 75% for Shigella). Resistance to ampicillin was found in 81.81% of Salmonella species and 78.57% of Shigella species, as was resistance to chloramphenicol (81.81% of Salmonella species and 67.85% of Shigella species). Similarly, cleanliness of the service and equipment is an essential factor in preventing Salmonella and Shigella infections. 展开更多
关键词 SALMONELLA SHIGELLA Species PREVALENCE ANTIBIOTICS Resistance CHAD
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志贺氏菌标准物质的制备方法 被引量:6
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作者 柯璐 戴晓丽 +3 位作者 林杰 黄嫦娇 曾维扬 张温玲 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第24期253-259,共7页
采用冷冻干燥法制备标准物质。通过正交试验法选择冻干保护率最高的保护剂配方方案。以鸡肉粉作为标准物质基质,按比例与保护剂配方混合,添加拟定菌数的新鲜菌液后进行冷冻干燥。实验制备的标准物质样品其特性值(含菌数)为530 CFU/瓶,... 采用冷冻干燥法制备标准物质。通过正交试验法选择冻干保护率最高的保护剂配方方案。以鸡肉粉作为标准物质基质,按比例与保护剂配方混合,添加拟定菌数的新鲜菌液后进行冷冻干燥。实验制备的标准物质样品其特性值(含菌数)为530 CFU/瓶,不确定度为24 CFU/瓶。冷冻干燥样品在-20℃及4℃条件下保存12个月,特性值稳定;25℃条件下保存9个月,特性值稳定;60℃条件下保存,稳定性差。 展开更多
关键词 宋氏志贺氏菌 标准物质 基质 鸡肉
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分子信标PCR检测志贺菌ipaH基因 被引量:14
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作者 赵丽华 周勇 万成松 《热带医学杂志》 CAS 2006年第5期499-502,共4页
目的用分子信标探针PCR快速检测志贺菌属(Shigella)。方法根据GenBank上公布的福氏志贺菌M32063株ipaH基因序列,设计引物和分子信标探针,以4种细菌进行对照,进行特异性和灵敏度分析,建立Shigella的实时PCR技术快速检测,应用于食物中毒... 目的用分子信标探针PCR快速检测志贺菌属(Shigella)。方法根据GenBank上公布的福氏志贺菌M32063株ipaH基因序列,设计引物和分子信标探针,以4种细菌进行对照,进行特异性和灵敏度分析,建立Shigella的实时PCR技术快速检测,应用于食物中毒和食品检测。结果检测20个样本,Shigella呈阳性,其它呈阴性,时间约2h。结论Shigella分子信标探针技术具有快速、灵敏度高、特异性强等特点,可用于Shigella食物中毒快速诊断和食品微生物检测,为食源性疾病的早期、准确诊断提供新的检测手段。 展开更多
关键词 SHIGELLA 分子信标 实时PCR ipaH
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牛奶样品中志贺氏菌胶体金免疫试纸条检测方法的建立 被引量:6
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作者 徐锋 武晓丽 +3 位作者 徐迪 明星 魏华 黎鹏 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2012年第5期46-50,共5页
通过用超声波破碎的宋内氏志贺氏菌和福氏志贺氏菌的菌体碎片为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得4株能稳定分泌抗志贺氏菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取其中一株制备单抗,并用胶体金标记。同时抗志贺氏菌的兔多抗和驴抗鼠抗体(二抗)分别喷涂... 通过用超声波破碎的宋内氏志贺氏菌和福氏志贺氏菌的菌体碎片为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得4株能稳定分泌抗志贺氏菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取其中一株制备单抗,并用胶体金标记。同时抗志贺氏菌的兔多抗和驴抗鼠抗体(二抗)分别喷涂于硝酸纤维素膜作为检测线(T线)和质控线(C线),研制了志贺氏菌胶体金快速检测试纸条。结果显示试纸条的灵敏度为105mL-1,并只与两株志贺氏菌有阳性反应外,而与其它23株常见的细菌无交叉反应。同时在检测添加有阪崎肠杆菌和长双歧杆菌的牛奶样品中,结果显示试纸条的灵敏度为106mL-1。志贺氏菌免疫胶体金试纸条的建立,为加强食品中志贺氏菌的检测工作,建立一种快速、简便的筛查方法具有重要的意义。 展开更多
关键词 宋内氏志贺氏菌 福氏志贺氏菌 试纸条 检测方法
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对三代头孢菌素不敏感宋内志贺菌的流行趋势和克隆传播 被引量:4
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作者 鲍春梅 陈素明 +4 位作者 郭桐生 崔恩博 张菊玲 汤一苇 曲芬 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期617-620,636,共5页
目的为了观察对三代头孢菌素不敏感宋内志贺菌的流行和克隆传播趋势,为进一步防控提供指导。方法分析2002年到2007年宋内志贺菌及对三代头孢菌素不敏感菌的流行趋势,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)确定对三代头孢菌素不敏感宋内志贺菌的亲... 目的为了观察对三代头孢菌素不敏感宋内志贺菌的流行和克隆传播趋势,为进一步防控提供指导。方法分析2002年到2007年宋内志贺菌及对三代头孢菌素不敏感菌的流行趋势,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)确定对三代头孢菌素不敏感宋内志贺菌的亲缘关系,找出流行株。结果6年间宋内志贺菌在志贺菌中的比例及对三代头孢不敏感菌的比例逐年上升,2007年分别达55.29%和40.43%。PFGE测定45株三代头孢菌素不敏感宋内志贺菌,结果显示91.1%为流行株,在北京地区至少有A1~A66个克隆株流行,在不同年份不完全相同。结论宋内志贺菌及对三代头孢菌素不敏感株在北京地区流行趋势增加,存在克隆株的传播,应加强监控。 展开更多
关键词 宋内志贺菌 流行 脉冲场凝胶电泳 抗药性
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